Лад краткое содержание белов: Василий Иванович Белов, Лад: краткое содержание по главам

Содержание

Василий Иванович Белов, Лад: краткое содержание по главам

Писать о народе и его традициях несложно. Сложно писать так, чтобы захватывало дух, чтобы в голове появлялись красочные образы, звучали мелодии и дул тёплый летний ветерок. Вот так писать умеют далеко не все люди, именующие себя писателями. Сегодня мы поговорим о выдающемся человеке, который был одарён писательским талантом – Василии Белове. Более подробно мы рассмотрим одну его книгу, которая называется «Лад». Она посвящена изучению быта русского человека, и другое её название выглядит так: «Очерки о народной эстетике». Белов «Лад» (краткое содержание которого мы рассмотрим в статье) написал под влиянием музы, в чём вы сами сможете убедиться.

Немного об авторе

Василий Белов является известным русским писателем, одним из ярчайших представителей так называемой «деревенской прозы». Его перу принадлежат работы, которые можно читать не только для наслаждения, но и для пополнения своих знаний о быте и обычаях наших предков. Язык Белова точный, краткий и красочный, из-за чего в голове выстраивается много образов, которые ведут к понимаю русской души. За своё творчество Белов был неоднократно награждён государственными премиями. Его книги – это некий проводник в исконно русский мир, который предстает пред внутренним взором читателя во всём своём величии и многообразии.

Творчество Василия Белова

Хотели бы узнать краткое содержание Белова («Лад»)? Для читательского дневника оно будет приведено немного ниже, а сейчас мы поговорим о творчестве писателя, его карьерной жизни. Всего автор написал 12 книг, каждая из которых является жемчужиной в своём роде. Настоящие талантливые писатели никогда не пишут слишком часто. Очень много работ только у тех, кто работает на публику и желает получить больше прибыли. Истинные писатели пишут только тогда, когда нельзя молчать, когда их переполняет вдохновение и они не могут больше сдерживать в себе творческий поток. Произведения Белова писались с 1961 по 2000 год. На сегодняшний день автор больше не занимается писательством, но его работ достаточно для того, чтобы с головой окунуться в мистерию русской души и оценить одаренность Белова. Известность пришла к писателю после того, как он начал публиковать в разных журналах свои этнографические очерки. Они были слишком коротки, и читатель хотел всё больше и больше. Именно это и заставило задуматься Василия Белова о написании первой книги, а потом и последующих.

Книги

Как уже было сказано ранее, автор написал 12 книг. Его первые очерки были задуманы как простенькие зарисовки северного быта русских людей. В своих произведениях он рассказывает о жителях Вологодской, Кировской и Архангельской областей России. Откуда он это знает? Всю свою сознательную жизнь он посвятил тому, что собирал по крупинкам народные устные песни, пословицы, бывальщины, предметы быта и культуры, а также бессонными ночами изучал архивные данные для полноты картины.

Много чего было записано Беловым из уст его матери, которая и привила ему любовь ко всему народному. Она была настоящей русской женщиной, которая всю жизнь жила согласно традициям. «Очерки о народной эстетике» – это очень ценный и интересный источник для изучения этнографии России, который подарил всем нам талантливый писатель Белов. «Лад», краткое содержание которого вы увидите ниже, был написан в 1982 году. Считается, что это одно из лучших произведений писателя.

«Лад»: часть первая

Книга «Лад» делится на три части. Каждая из них посвящена обзору материала определенной тематики. Мы рассмотрим все части книги, а также по одной главе в каждой из них. Глава выбиралась по степени насыщенности информации и важности её в тексте. Главы первой части называются так: «Круглый год», «Подмастерья и мастера», «Спутник женской судьбы», «Рукодельницы» и «Остановленные мгновения». О чем же рассказывает в книге Белов («Лад»)? Краткое содержание для читательского дневника будет вмещать основные положения из каждой главы.

В главе «Круглый год» речь идет о четырёх временах года. Автор описывает каждое из них очень подробно, рассказывая, какой быт вел народ в разных погодных условиях. При этом описываются не сухие факты – материал подается в виде красочного рассказа. Также в тексте можно встретить старорусские пословицы. Каждый временной отрезок характеризуется тем, что кроме описания быта, можно встретить рассказы о настроении народа, культурных особенностях и традициях празднования великих торжеств.

В главе «Подмастерья и мастера» речь идет о разных видах деятельности, которые были распространены на Руси. Здесь есть описания даже знахарей и нищих. Кроме этого, автор описывает труд и жизнь пастухов, сапожников, кузнецов, плотников, торговцев, мельников и т. д. После прочтения этой главы складывается ощущение, что побывал сразу в нескольких ролях – настолько точно и ярко Белов описывает каждую профессию.

В главе «Рукодельницы» речь идёт о таких женских занятиях, как шитье, плетение и вязание. В этой главе автор говорит не только о труде, но также о том, как женщины развлекали себя во время работы: пели, придумывали песни, частушки, танцевали. Кроме того, Василий Белов делает акцент на том, что, несмотря на то что эта работа считается женской, она требует немало силы и упорства.

Глава «Остановленные мгновения» поведает о красоте: резьбе по кости, бересте, чернению по серебру и кружевоплетению. Большое внимание уделяется мастерству, умению делать свою работу. Глава получила такое название, потому что мастера творили тогда, когда к ним приходило вдохновение, а время вокруг останавливалось до тех пор, пока шедевр не будет создан.

«Спутник женской судьбы»

Эта глава первой части книги вынесена отдельно не случайно. Во-первых, она самая объёмная, а во-вторых здесь рассматриваются все виды женского труда. Автор описывает работы с огромной точностью, что заставляет читателя действительно окунуться в эпоху. Также большое внимание уделяется мистическому значению женского труда. Например, лен издавна считался спутником женской жизни. Согласно поверьям, когда женщина работает со льном, она уготавливает себе судьбу. Занимательный факт: девочки на Руси начинали готовить себе приданое уже с 7-8 лет. Другими словами, уже в этом возрасте они умели работать со льном.

Очень интересно сочетаются факты с народными поверьями. Каждая стадия любого трудового процесса шла вместе с определёнными обычаями. Дар Белова именно в том, чтобы незаметно переходить от фактического к художественному, тем самым создавая интереснейшую литературу. Кроме отдельных работ, были и общие женские труды. Например, каждый год наступал день веревочного витья. На середине улицы выставляли дровни, и каждый мог крутить ручку для того, чтобы вить веревки. Это было в некотором роде народной забавой, которую любили и дети, и старики.

«Лад»: часть вторая

Вторая часть книги знакомит нас с такими главами: «Миряне», «Жизненный круг», «Родное гнездо», «Будни и праздники», «Застольщина», «Одежда», «Игры». Как видно из глав, эта часть книги посвящена повседневной жизни людей. Здесь, в отличие от первого раздела, культуре, традициям и обычаям уделяется уже не частичное, а полное внимание.

Глава «Миряне» рассказывает об устройстве жизни от края до отдельной семьи. Рассматривается уклад жизни в крае, деревне, волости, подворье и в семье. «Родное гнездо» проведет в дом жителя деревни. Читатель побывает во дворе, в доме, амбаре, избушке и на сеновале. Глава «Будни и праздники» посвящена рассказам о том, как люди делили дни недели и чем каждый из них был особенный. В главе «Одежда» автор рассказывает об одеяниях народа на разные случаи жизни, а раздел «Игры» расскажет о народном баловстве, забавах, играх и частушках.

Жизненный круг

Глава под названием «Жизненный круг» поведает нам о жизни от младенчества до глубокой старости, расскажет о том, какие этапы проходил каждый русский человек. Здесь подробно описывается все то, что встречает человек на своем пути. Жизнь — это определенный ритм, которому следует подчиняться, чтобы получилась красивая мелодия. Именно ритму подчинена вся жизнь русских людей. Все имеет свою продолжительность, своё время: есть игры для разных времен года, праздники, сезонные работы, забавы и т. д. Переход от одного возрастного этапа к следующему происходил постепенно, резких границ не было, ведь каждый чувствовал прелести своего времени.

Часть третья

Что же подготовил в последней части своей книги Василий Белов? «Лад», краткое содержание которого подходит к концу, заканчивается философской главой. Здесь читатель узнает о том, как проходили праздники на Руси. Об этом расскажет глава «Длиною в жизнь». О том, как строились дома, мельницы, храмы и часовни, узнаем из главы «Древотесное-камнетесное». Также Белов освещает религиозные аспекты в части «Не словом единым». Эта часть также расскажет о народной скульптуре, философских вопросах культуры и человеческой жизни.

«Начало всех начал»

Что же откроет в этой главе Белов? «Лад», краткое содержание которого очень сжато здесь рассмотрено, в этой главе расскажет о народных заговорах, загадках, сказках, частушках, причитаниях и т. д. Всё вышеперечисленное – это основа жизни народа, то, на что он опирается в трудные времена. Краткое содержание Белова («Лад») лишь в малой доле передает всю информационную и художественную насыщенность. Именно поэтому этот ярчайший труд следует читать полностью.

Главные герои

Откуда брал информацию Василий Белов? «Лад», главные герои которого обезличены, — описывает обычных людей, с которыми он общался на протяжении всей своей жизни. Герои создавались как прототипы известных ему людей: мать, родственники, односельчане и т. д. Каждый образ лаконичен, но закончен именно потому, что он не вымышленный. Важные особенности, которые отличают каждого героя — это жизне- и трудолюбие, доброта и простодушность.

Дал ключи от древней и чудесной двери – вот что сделал Белов. «Лад», краткое содержание по главам которого мы рассмотрели, — это очень ценный и весомый труд об этнографии севера России. Читать это произведение – это окунаться в дивный мир наших предков и угощаться их мудростью. «Лад» (Василий Белов), отзывы о котором трудно найти на просторах Интернета, является не самой читаемой книгой. Можно долго размышлять о том, в чем же причина, но всё кроется в нежелании народа знать о своём прошлом.

Краткое содержание белов лад за 2 минуты пересказ сюжета — КИЦ г.Севастополь

Немного об авторе

Творчество Василия Белова

Очень много работ только у тех, кто работает на публику и желает получить больше прибыли. Истинные писатели пишут только тогда, когда нельзя молчать, когда их переполняет вдохновение и они не могут больше сдерживать в себе творческий поток. Произведения Белова писались с 1961 по 2000 год.

На сегодняшний день автор больше не занимается писательством, но его работ достаточно для того, чтобы с головой окунуться в мистерию русской души и оценить одаренность Белова. Известность пришла к писателю после того, как он начал публиковать в разных журналах свои этнографические очерки. Они были слишком коротки, и читатель хотел всё больше и больше.

Именно это и заставило задуматься Василия Белова о написании первой книги, а потом и последующих.

Книги

«Лад»: часть первая

Главы первой части называются так: «Круглый год», «Подмастерья и мастера», «Спутник женской судьбы», «Рукодельницы» и «Остановленные мгновения».

О чем же рассказывает в книге Белов («Лад»)? Краткое содержание для читательского дневника будет вмещать основные положения из каждой главы.

В главе «Подмастерья и мастера» речь идет о разных видах деятельности, которые были распространены на Руси. Здесь есть описания даже знахарей и нищих.

Кроме этого, автор описывает труд и жизнь пастухов, сапожников, кузнецов, плотников, торговцев, мельников и т. д.

После прочтения этой главы складывается ощущение, что побывал сразу в нескольких ролях – настолько точно и ярко Белов описывает каждую профессию.

«Спутник женской судьбы»

Также большое внимание уделяется мистическому значению женского труда. Например, лен издавна считался спутником женской жизни. Согласно поверьям, когда женщина работает со льном, она уготавливает себе судьбу. Занимательный факт: девочки на Руси начинали готовить себе приданое уже с 7-8 лет.

Другими словами, уже в этом возрасте они умели работать со льном.

«Лад»: часть вторая

Жизненный круг

Жизнь — это определенный ритм, которому следует подчиняться, чтобы получилась красивая мелодия. Именно ритму подчинена вся жизнь русских людей. Все имеет свою продолжительность, своё время: есть игры для разных времен года, праздники, сезонные работы, забавы и т. д.

Переход от одного возрастного этапа к следующему происходил постепенно, резких границ не было, ведь каждый чувствовал прелести своего времени.

Часть третья

«Начало всех начал»

Всё вышеперечисленное – это основа жизни народа, то, на что он опирается в трудные времена. Краткое содержание Белова («Лад») лишь в малой доле передает всю информационную и художественную насыщенность.

Именно поэтому этот ярчайший труд следует читать полностью.

Главные герои

Откуда брал информацию Василий Белов? «Лад», главные герои которого обезличены, — описывает обычных людей, с которыми он общался на протяжении всей своей жизни.

Герои создавались как прототипы известных ему людей: мать, родственники, односельчане и т. д. Каждый образ лаконичен, но закончен именно потому, что он не вымышленный.

Важные особенности, которые отличают каждого героя — это жизне- и трудолюбие, доброта и простодушность.

Читать это произведение – это окунаться в дивный мир наших предков и угощаться их мудростью. «Лад» (Василий Белов), отзывы о котором трудно найти на просторах Интернета, является не самой читаемой книгой.

Можно долго размышлять о том, в чем же причина, но всё кроется в нежелании народа знать о своём прошлом.

Источник: https://autogear.ru/article/288/491/vasiliy-belov-lad-kratkoe-soderjanie/

Василий Белов «Лад» – анализ А. Солженицына — Русская историческая библиотека

Но Белов и сам предупреждает, что он «никак не претендует на академичность», хотя очень продуманное, стройное изложение и богатство фактического материала дозволяет книге служить и обширным, и местами незаменимым, справочным пособием.

Мало сказать, что это очень серьёзная, размыслительная книга, но она вся пропитана поэтичным (Белов – в своей родной стихии!), любовным и умиряющим духом.

Она содержит и цитаты, эпиграфы из поэтов, из фольклора, высказывания русских мыслителей, художников, изрядную долю и личного опыта автора, показательные случаи из жизни, – в книге разные слои, и они перемешиваются. Немало авторских комментариев от светлой души, – и они с интересом и легко читаются.

Василий Белов. Лад

Книга составлена из последовательных разделов: «Круглый год» (сезонные чередования крестьянской работы и жизни). – «Подмастерья и мастера». – Работы и рукоделья женские. – «Родное гнездо» (жильё и что его окружает).

– «Жизненный круг» (от младенчества и до смерти, шаг за шагом прослеживая переливы возрастных признаков; и от рожденья до похорон, черезо все бытовые обряды, игры, гулянья, праздники, сходы; но – примечательно для Белова: обряды церковные и вообще церковность, и церковный дух простонародья – вовсе не охвачены этой обильной книгою). – Еда и одежда. – Искусство народного слова (и виды его: разговор, предание, бывальщина, сказка, пословица, песня, причитание, частушка, загадка, прозвища; тут и – природные свойства сказочников, роль импровизации; и судьба всех этих жанров в послереволюционное время). – Наконец деревянное зодчество и народная скульптура. «Деревянные северные храмы поражали не размерами, а соразмерностью». Орнамент деревянных сооружений, птицы и кони в архитектуре. Шемогодская резьба по берёсте и холмогорская резьба по кости. Резная посуда, резные игрушки (и лаконизм игрушек глиняных). – Всё это и сгущено в названии «Лад», лад жизни – в контраст с разладом её.

Василий Иванович Белов

Роль ритма в жизни и труде. Ритмичность в ежегодном повторе работ. Работы погоняют и перекрывают друг друга, бывает тесно одной работе от другой.

«Такое состояние, когда человек не знает, чем ему заняться, совершенно исключено в крестьянском быту». Детская игра переходит в труд. Многообразие, многослойность и внутренняя гармоничность крестьянского хозяйства.

Эта гармония придаёт сельскому труду красоту. Кто умеет красиво косить или плотничать – накосит и наплотничает больше и лучше.

Память и меткость в приметах погоды, их полугодовой пересчёт. Почти однодневная угадка момента посева. «Тот или иной обычай так естественен, так древен, что выглядит произведением самой природы».

Молитва при начале важных работ, особенно сева. Взаимопонимание и сотрудничество с лошадью при каждой работе (а у женщины – с коровой).

Да душевные отношения со всеми домашними животными – и отзывчивость тех.

(Но показательны и его замечания о сходстве гоголевских миргородских сюжетов и персонажей – с северными.) «Трудолюбивые добрые люди были в чести у мира». Широкая взаимовыручка, особенно к сиротам и вдовам. Роль стариков в многодетных семьях (где теперь и те, и другие?), их душевное равновесие в ожидании смерти.

«Русская печь остывала только с гибелью семьи или дома».

Всё начинается с неудержимого и неизъяснимого желания трудиться». Мастерство – та же почва, из которой вырастают художники. «Потребность таланта теплится в каждом из нас, только вырастает в разной мере». «Высокий восторг и вдохновение возможны в любом труде».

И при том: большие мастера своего дела не гнались за мирской известностью, «даже видели в ней нечто постыдное, мешающее их художеству».

(Тут – и все виды древесных материалов, и: крыши изб крылись без единого гвоздя, да так, что никакой ветер их не сорвёт.

) Но со вниманием и пониманием вникает автор в работу печников, кузнецов, гончаров («рождение образа из глины и огня»), столяров, бондарей, швецов (портных), сапожников, скорняков (кожевников), шорников, колесников, лудильщиков, дегтярей, смолокуров, пастухов, даже копателей колодцев (как угадывают «водяную жилу», где копать, и по росе, и по растущей траве, и по толчее мошки), помянет и слесаря-односельчанина, который сладил железный протез обезножевшему фронтовику, и катальщиков валенок – для каждой профессии находит автор любовные слова и разъясняет тонкости мастерства. Услеживает и безвозвратно погибшие виды художественных промыслов и гибель художественности от поточности производства. И, конечно, о кормильцах-мельниках, и о тех, кто пошёл по торговой линии, и тут важное психологическое замечание: сами торговцы считали увеличение своей торговли – грехом (как и вообще «в старину многие люди считали Божьим наказанием не бедность, а богатство»).

Да, почти всё это – ушло невозвратимо, никогда уже не вернётся – но тем дороже, что так любовно схвачено при своём иссякании.

У Белова – множество метких замечаний по творчеству всех видов, и как оно связано с терпением, трудолюбием и пониманием традиции.

(«Почти все умельцы становились подмастерьями, но только часть из них – мастерами», однако было и: «мастерство, передаваемое по наследству или по волостному соседству».)

Прослеживает всю неповторимую технологию обработки неповторимого же по качествам и многолетне служащего льна (так и не восполненного никакими новейшими тканями). И как эта обработка погоняла к неутомному труду, но и вписывалась в быт, в супрядки-«беседы» с их игровыми элементами.

Дальше – виды тканья, виды шитья, вязанье, кружево, плетение – и сочетание рукоделий с песнями. (И как краски труда изгасли в колхозных условиях.)

Перерождение гуляний в советское время, снижение хорового искусства и плясок. «Народная музыкальная эстетика немыслима без слияния со звуками и шумами природы». А «после войны художественная организованность народного быта ещё намного снизилась». – Чувство меры в одежде – между щегольством и убожеством.

(«От сословной спеси национальные традиции в одежде стали считаться признаком косности».) Сочетание добротности и удобства, особенно в одежде повседневной. И бережливость к одежде, донашивание её в поколениях. «Выбрасывать – считалось грехом, как и покупать лишнее». «Неустойчивый быт 20 – 30-х годов свёл на нет резкую границу между выходным одеянием и будничным».

– Наконец – и разные, многие виды крестьянской пищи, теперь тоже невозвратно ушедшие (та же выпечка ржаных караваев, которых нам уже никогда не есть).

На фоне огромного бытового материала порой не минует Белов и соображений о глубокой дали русской истории. Украшает книгу и его высокая чуткость к русскому словообразованию.

Нашлось в книге и место оспорить мнение, будто северная русская природа «неяркая, неброская»: не говоря уже о переменах, связанных с временами года, – «смена пейзажных настроений происходит порою буквально в считанные секунды.

Лесное озеро из густо-синего моментально может преобразиться в серебристо-сиреневое, стоит подуть из леса лёгкому шуточному ветерку. Ржаное поле и берёзовый лес, речное лоно и луговая трава меняют свои цвета в зависимости от силы и направления ветра. А ещё же – небо, солнце, луна, тепло и холод…

Зелень льна меняется с его ростом, зелень трав – бесконечно, а луга после косьбы снова ярко зелены, и до зимы зеленеет озимь. Вода в озёрах и реках то стальная, то голубая, то – до чернильной густоты…»

Книга «Лад» – драгоценность в русской печатности.

Отрывок очерка о Василии Белове из «Литературной коллекции», написанной Александром Солженицыным. отзывы Солженицына о других книгах Василия Белова: «Привычное дело», «Плотницкие рассказы», «Кануны», «Всё впереди».

Источник: http://rushist.com/index.php/literary-articles/4324-vasilij-belov-lad-analiz-a-solzhenitsyna

Плотницкие рассказы (краткий пересказ содержания). Белов Василий Иванович

Плотницкие рассказы

Краткое содержание повести

Март 1966 г; Тридцатичетырехлетний инженер Константин Платонович Зорин вспоминает, как его, выходца из деревни, унижали городские бюрократы и как когда-то возненавидел он все деревенское.

А теперь тянет назад, в родную деревню, вот и приехал он сюда в отпуск, на двадцать четыре дня, и хочется баню топить каждый день, но его баня слишком стара, а восстановить её в одиночку, несмотря на плотницкую закваску, приобретенную в школе ФЗО, Зорин не может и поэтому обращается за помощью к соседу-старику Олеше Смолину, да только тот не спешит приниматься за дело, а вместо этого рассказывает Зорину о своем детстве.

Родился Олеша, как Христос, в телячьем хлеву и как раз на самое Рождество. А грешить его заставил поп: не верил, что у Олеши нет грехов, и больно драл за уши, вот и решил тот согрешить — украл отцовский табак и стал курить. И тут же покаялся. А как начал Олеша грешить, жить стало легче, стегать враз перестали, но только пошла в его жизни с тех пор всякая путанка…

На следующий день Зорин и Смолин, взяв инструменты, идут ремонтировать баню. Мимо них проходит сосед, Авинер Павлович Козонков, сухожильный старик с бойкими глазами. Олеша разыгрывает Авинера, говоря, что у того корова якобы нестельная и что он останется без молока.

Козонков, не понимая юмора, злится и угрожает Олеше, что напишет куда следует про сено, накошенное Смолиным без разрешения, и что сено у него отберут. В ответ Олеша говорит, что Авинер с разрешения сельсовета косит на кладбище — покойников грабит.

Смолин и Козонков окончательно ссорятся, но когда Авинер уходит, Олеша замечает: всю жизнь у них с Авинером споры. С малолетства так. А жить друг без дружки не могут.

И начинает Смолин рассказывать. Олеша и Авинер — одногодки. Как-то ребята делали птичек из глины и фуркали — кто дальше.

А Авинер (тогда еще Виня) набрал глины больше всех, насадил на ивовый прут да прямехонько в Федуленково окно, стекло так и брызнуло. Все, конечно, бежать.

Федуленок — из избы, а Виня один на месте остался и только приговаривал: «Вон оне в поле побежали!» Ну, Федуленок и ринулся за ними, и Олешу настиг. Да и прикончил бы, если б не Олешин отец.

В двенадцать лет Винька и Олеша приходскую школу кончили, так Винька на своем гумне все ворота матюгами исписал — почерк у него был, как у земского начальника, а от работы Винька старался увильнуть, даже плуг отцовский портил, лишь бы навоз в борозду не кидать. И когда его отца пороли за неуплату податей, Виня бегал глядеть, да еще и хвастался: видел, дескать, как тятьку пороли и он на бревнах привязанный дергался… А потом отправился Олеша в Питер. Там мастера-плотники били его сильно, но работать научили.

После стычки с Олешей Авинер в бане не показывается. Зорин, услышав, что к Козонкову приехала дочь Анфея, отправляется в гости. Авинер поит своего шести— или семилетнего внука водкой, а сам, пьяный, рассказывает Зорину о том, как ловок он был в молодости — обманывал всех вокруг и даже из-под углов только что заложенной церкви деньги вытащил.

https://www.youtube.com/watch?v=90Z3-8w3328

Смотрите также

Привычное дело
Такая война

На следующее утро Олеша на баню не является. Зорин идет к нему сам и узнает, что от Олеши требуют идти в лес — рубить ветошный корм (это результат козней Козонкова: он ведь и про работу магазина каждую неделю жалобу строчит).

Только после обеда Зорин приходит ремонтировать баню и снова начинает рассказывать.

На этот раз про то, как Козонков захотел жениться, да невестин отец отказал ему: на Авинеровых розвальнях завертки веревочные, так на первой же горушке, глядишь, завертка-то и лопнет…

Потом Олеша рассказывает про свою любовь. У Таньки, Федуленковой дочки, коса густая была, ниже пояса. уши белые. А глаза — даже и не глаза, а два омутка, то синие, то черные. Ну, а Олеша робок был.

И как-то в Успеньев день после праздника мужики напились, а парни спали на повети неподалеку от девок. Винька тогда пьяным прикинулся, а Олеша стал проситься под полог, где собирались спать Олешина двоюродная да Танька. Тут двоюродная-то и шмыгнула в избу: самовар, дескать, забыла закрыть.

И назад не вышла — догадливая она была. А Олеша, весь от страха дрожа, — к Таньке, да та стала уговаривать его уйти… Олеша сдуру и пошел на улицу. Проплясался, а когда уже под утро зашел на поветь, услышал, как Винька под пологом его Таньку жамкает. И как целуются.

А двоюродная, обсмеяв Олешу, сказала, что Танька велела его найти, да только где сыскать-то? Будто век не плясывал.

Олеша заканчивает свой рассказ. Мимо проезжает грузовик, водитель оскорбляет Смолина, однако Олеша лишь восхищается им: молодец, сразу видно — нездешний. Зорин, злясь и на водителя и на беззлобие Смолина, уходит не попрощавшись.

Козонков, придя к Смолину, рассказывает, как с восемнадцатого года стал он правой рукой Табакова, уполномоченного финотдела РИКа. И сам с колокольни колокол спехивал, да еще и маленькую нужду оттуда справил, с колокольни-то.

И в группке бедноты, созданной, чтоб вывести кулаков на чистую воду и открыть в деревне классовую войну, Авинер тоже участвовал. Так теперь товарищ Табаков, говорят, на персональной живет, и Козонков интересуется, нельзя ли и ему тоже персональную? Вот и документы все собраны…

Зорин смотрит документы, но их явно недостаточно. Авинер жалуется, что посылал, дескать, заявление на персональную в район, да затеряли там: кругом одна плутня да бюрократство. А ведь Козонков, считай, с восемнадцатого года на руководящих работах — и секретарем в сельсовете, и бригадиром, два года «зав.

мэтээф работал, а потом в сельпе» всю войну займы распространял. И наган у него был. Как-то повздорил Козонков с Федуленком — наганом грозил, а потом добился, чтоб того в колхоз не приняли: две коровы, два самовара, дом двоежилой. И тут Федуленка, как единоличника, таким налогом обложили… Авинер уходит.

Дом Федуленка, где была контора колхоза, глядит пустыми, без рам, окошками. А на князьке сидит и мерзнет нахохленная ворона. Ей ничего не хочется делать.

Отпуск Зорина подходит к концу. Олеша работает на совесть и потому медленно. И рассказывает он Зорину, как направляли их, бывало, на трудгужповинность — дороги строить, как гнали то на лесозаготовку, то на сплав, а потом еще надо было в колхозе хлеб посеять, да только получалось на четыре недели позже нужного. Вспоминает Олеша, как пришли описывать имущество Федуленка.

Дом — с молотка. Всю семью — в ссылку. Когда прощались, Танька к Олеше при всем народе подошла. Да как заплачет… Увезли их в Печору, было от них в первое время два или три письма, а потом — ни слуху ни духу. Олеше тогда Винька Козонков кулацкую агитацию приписал, и мучили Смолина сильно. Да и теперь Олеша не решается рассказать Зорину все до конца — тот ведь «партейный».

Баня оказывается готовой. Зорин хочет рассчитаться с Олешей, но тот будто не слышит. Потом они вместе парятся. Зорин специально для Олеши включает транзистор, оба слушают «Прекрасную мельничиху» Шуберта, а затем Зорин дарит транзистор Олеше.

Перед отъездом к Зорину приходят Олеша и Авинер. Выпив, они начинают спорить о коллективизации. Олеша говорит, что в деревне было не три слоя — кулак, бедняк и середняк, — а тридцать три, вспоминает, как в кулаки записали Кузю Перьева (у него и коровы-то не было, да только Табакова обматерил в праздник).

А по словам Авинера, Смолина самого следовало бы вместе с Федуленком — под корень: «Ты контра была, контра и есть». Доходит до драки. Авинер стучит о стену Олешиной головой. Появляется Настасья, жена Олеши, и уводит его домой. уходит и Авинер, приговаривая: «Я за дисциплинку родному брату… головы не пожалею…

Отлетит в сторону!»

У Зорина начинается грипп. Он засыпает, потом встает и, пошатываясь, идет к Смолину. А там сидят и мирно беседуют… Авинер и Олеша.

Смолин говорит, что оба они в одну землю уйдут, и просит Авинера, если Олеша умрет раньше, сделать ему гроб честь по чести — на шипах. И Козонков просит Смолина о том же, если Олеша его переживет.

А потом оба, клоня сивые головы, тихо, стройно запевают старинную протяжную песню.

Зорин не может им подтянуть — он не знает ни слова из этой песни…

Источник: https://www.ukrlib.com.ua/kratko-zl/printout.php?id=40&bookid=0

Читать

Василий Иванович Белов

ЛАД

Белов В. И.

Б 43 Лад: Очерки о народной эстетике. — М.: Мол. гвардия, 1982. 293 с., ил.

7 р. 50 к. 50000 экз.

Известный советский писатель рассказывает об эстетике крестьянского труда, о народном фольклоре, быте, художественных промыслах. В книге использованы этнографические материалы Вологодской, Архангельской, Кировской областей.

Издание предназначено для широкого круга читателей.
4904000000-232 078(02)-82
058-81

ББК 84Р7+63.5(2) Р2+902.7

Фотосъемка проведена в Вологодской и Архангельской областях в 1979–1981 годах.
Архивные фотографии получены из фондов Вологодского краеведческого музея.
ИБ № 2826
Василий Иванович Белов
ЛАД

Редактор 3. Костюшина Художественный редактор С. Сахарова Технический редактор Е. Брауде Корректоры В. Авдеева, И. Тарасова

ОТ АВТОРА

Стихия народной жизни необъятна и ни с чем не соизмерима. Постичь ее до конца никому не удавалось и, будем надеяться, никогда не удастся.

В неутолимой жажде познания главное свойство науки — ее величие и бессилие. Но для всех народов Земли жажда прекрасного не менее традиционна.

Как не похожи друг на друга две эти человеческие потребности, одинаковые по своему могуществу и происхождению! И если мир состоит действительно лишь из времени и пространства, то, думается, наука взаимодействует больше с пространством, а искусство со временем…

Все, что было лишним, или громоздким, или не подходящим здравому смыслу, национальному характеру, климатическим условиям, — все это отсеивалось временем.

А то, чего недоставало в этом всегда стремившемся к совершенству укладе, частью постепенно рождалось в глубинах народной жизни, частью заимствовалось у других народов и довольно быстро утверждалось по всему государству.

Подобную упорядоченность и устойчивость легко назвать статичностью, неподвижностью, что и делается некоторыми «исследователями» народного быта. При этом они намеренно игнорируют ритм и цикличность, исключающие бытовую статичность и неподвижность.

Перебои в ритме семейной жизни (болезнь или преждевременная смерть, пожар, супружеская измена, развод, кража, арест члена семьи, гибель коня, рекрутство) не только разрушали семью, но сказывались на жизни и всей деревни.

Ритм проявлялся во всем, формируя цикличность. Можно говорить о дневном цикле и о недельном, для отдельного человека и для целой семьи, о летнем или о весеннем цикле, о годовом, наконец, о всей жизни: от зачатья до могильной травы…

При этом единство и цельность вовсе не противоречили красоте и многообразию. Красоту нельзя было отделить от пользы, пользу — от красоты. Мастер назывался художником, художник — мастером.

Иными словами, красота находилась в растворенном, а не в кристаллическом, как теперь, состоянии.

Меня могут спросить: а для чего оно нужно, такое пристальное внимание к давнему, во многом исчезнувшему укладу народной жизни? По моему глубокому убеждению, знание того, что было до нас, не только желательно, но и необходимо.

Молодежь во все времена несет на своих плечах главную тяжесть социального развития общества. Современные юноши и девушки не исключение из этого правила.

Но где бы ни тратили они свою неуемную энергию: на таежной ли стройке, в полях ли Нечерноземья, в заводских ли цехах — повсюду молодому человеку необходимы прежде всего высокие нравственные критерии… Физическая закалка, уровень академических знаний и высокое профессиональное мастерство сами по себе, без этих нравственных критериев, еще ничего не значат.

Например, выращивание и обработка льна сохранили все древнейшие производственно-эстетические элементы так называемого льняного цикла.

Все лишь ускорено и механизировано, но лен надо так же трепать, прясть и ткать, как это делалось в новгородских селах и десять веков назад.

Культура и народный быт также обладают глубокой преемственностью. Шагнуть вперед можно лишь тогда, когда нога отталкивается от чего-то, движение от ничего или из ничего невозможно. Именно поэтому так велик интерес у нашей молодежи к тому, что волновало дедов и прадедов.

Так же точь-в-точь и будущие поколения не смогут обойтись без ныне живущих, то есть без нас с вами. Им так же будет необходим наш нравственный и культурный опыт, как нам необходим сейчас опыт людей, которые жили до нас.

Добрая половина материалов записана со слов моей матери Анфисы Ивановны Беловой. Воспоминаний, а также впечатлений сегодняшнего дня оказалось слишком много.

Волей-неволей мне пришлось систематизировать материал, придавая рассказу какой-то, пусть и относительный, порядок, чем и продиктовано композиционное построение книги.

Из экономии места мне приходилось то и дело сокращать или вовсе убирать живой фактический материал, довольствуясь общими размышлениями.

КРУГЛЫЙ ГОД

Весна.

Когда-то все на Руси начиналось с весны. Даже Новый год. Христианские святцы легко ужились с приметами языческого календаря, чуть не на каждый день имелась своя пословица: 6 марта — Тимофей-весновей.

12 марта — Прокоп — увяз в сугроб.
13 марта — Василий-капельник.
14 марта — Евдокия — замочи подол.

Говорили, что ежели Евдокия напоит курицу, то Никола (22 мая) накормит корову[1]. Приметы, рожденные многовековым опытом общения с природой, всегда определенны и лишены какого-либо мистицизма. Например, если прилетели ласточки, надо не мешкая сеять горох.

Неясны, расплывчаты границы между четырьмя временами года у нас на Севере. Но нигде нет и такого контраста, такой разницы между зимой и летом, как у нас.

Весна занимала в году место между первой капелью и первым громом.

17 марта — Герасим-грачевник.

30 марта — Алексей — с гор вода. 4 апреля — Василий-солнечник. 9 апреля — Матрена-настовица.

14 апреля — Марья — зажги снега, заиграй овражки.
28 апреля — Мартын-лисогон.
29 апреля — Ирина — урви берега.

В крестьянском труде после масленицы нет перерывов. Одно вытекает из другого, только успевай поворачиваться. (Может, поэтому и говорят: круглый год.) И все же весной приходят к людям свои особые радости.

В поле, в лесу, на гумне, в доме, в хлеву — везде ежедневно появляется что-нибудь новое, присущее одной лишь весне и забытое за год.

А как приятно встречать старых добрых знакомцев! Вот к самым баням подошла светлая талая вода — вытаскивай лодку, разогревай пахучую густую смолу. Заодно просмолишь сапоги и заменишь ими тяжелые, надоевшие за зиму валенки.

Вот прилетел первый грач, со дня на день жди и скворцов. Никуда не денешься, надо ставить скворечники — ребячью радость. А то вдруг вытаяла в огороде потерянная зимой рукавица… И вспомнишь декабрьский зимник, по которому ехал с кряжами для новой бани.

Источник: https://www.litmir.me/br/?b=203245&p=2

Лад — краткое содержание книги Белова

В центре произведения Белова «Лад» является описание жизни в обыкновенной деревне. В таких поселениях были практически одинаковые устои и обычаи. В этой деревне много полей и открытых просторов, лесов практически нет. Позднее в произведении появляется мужик на телеге, ему сложно удерживать вожжи, потому что он сильно пьян. Иван Дрынов успел напиться с утра вместе со своим другом Михаилом.

Два мужчины веселы. Иван с трудом вспоминает дорогу в деревню. Он ездил в соседний поселок, чтобы взять продукты питания для магазина.

Ивану понадобилось время, чтобы протрезветь и вспомнить дорогу домой. Но, на его пути появляется очередной знакомый. Он не смог отказать товарищу и выпил с ним немного за встречу.

Находясь в состоянии алкогольного опьянения, он решает посватать Мишу со своей двоюродной сестрой. Радостно и весело они отправляются к родственнице Ивана. Женщине не понравилось данное предложение. Она побоялась оставлять в доме двоих пьяных мужчин. Она предложила им заночевать в бане.

В произведении наглядно видно, какая жизнь была в деревне. Для жителей села, является нормой алкоголь и пьянство. Напившись люди, забывают о своих обязанностях, теряют память, но пить не прекращают.

Читательский дневник.

Другие произведения автора:

Лад. Читательский дневник

Советуем почитать

Пикуль
С каждым годом интерес Валентина Саввича Пикуля к русской истории становилась все сильнее. Он с головой погрузился в работу, много читал, учился.
Гарин-Михайловский
Николай Григорьевич Гарин-Михайловский не ставил перед собой цель стать великим писателем. У него было любимое дело, а писал он в свободное время. Это было его творческое хобби, благодаря которому мужчина внёс значительный вклад во всю русскую литературу.
Краткое содержание поэмы Саша Некрасова
Поэма «Саша» была написана Николаем Алексеевичем Некрасовым в 1855 году. Главной героиней произведения становится юная девушка, которая впервые испытывает настоящее сердечное чувство и переживания
Краткое содержание повести Знак четырёх Дойла
События, описанные в этом рассказе, происходят в Лондоне и его окрестностях за 12 лет до окончания 19 века. Шерлок Холмс и доктор Ватсон скучают в своей квартире на Бейкер стрит.
Благие намерения — краткое содержание рассказа Лиханов
Главной героиней данного произведения является молодой педагог по имени Надежда Георгиевна. Она только что закончила педагогический университет и ее направили на работу в интернат.

✅ Белов лад краткое содержание по главам. В

Краткое содержание Белов Лад для читательского дневника

В центре повествования деревня с ее обычным укладом. Данные поселения мало отличаются друг от друга. В этой преобладают открытые просторы, чем наличие деревьев. На горизонте появляется мужичонка на телеге, с трудом удерживающий вожжи ввиду беспробудного опьянения. Иван Дрынов с ранних часов навеселе, успевший уже употребить спиртного по случаю встречи с другом Михаилом.

Мишка также пребывает в веселом расположении духа, причем довел приятеля до кондиции, что тот едва помнит обратную дорогу в поселок. В соседнее село он совершил поездку исключительно с целью взятия продуктов для местного магазина. После герой сожалел бы, если бы не отметил событие разговором с давним знакомым.

Незначительно протрезвев и вспомнив маршрут домой, поворотив телегу в нужном направлении, на глаза снова попадается дружок. Не отказывая приятелю, приходится снова выпивать на дорожку.

Совершенно опьянев, ему вдруг приходит мысль, что не плохо бы сосватать Мишаню за двоюродную сестру. На пьяную голову друзья отправляются к родственнице Ивана, проживающей в данном местечке. Будучи одинокой, она отказывается от их предложения, разместив на ночлег нежданных гостей в бане из опасения иметь в доме двоих изрядно подвыпивших мужчин.

История наглядно изображает привычный уклад русской деревни, для жителей которых привычным является одурманивание алкоголем и полная забывчивость о возложенных обязанностях.

Читать краткое содержание Лад. Краткий пересказ. Для читательского дневника возьмите 5-6 предложений

Белов. Краткие содержания произведений

Картинка или рисунок Лад

Другие пересказы и отзывы для читательского дневника

Эта глава из произведения «Записки охотника» представляет собой, скорей, очерк. Конечно, у Тургенева всегда много внимания уделяется прекрасной русской природе, но именно здесь совсем нет героев. Разве охотник с его ощущениями природы

У стариков было трое сыновей, двое считались умными, а третьего никто и за человека не считал, потому что он глупым был

В этой главе автор рассказывает читателю о главном герое Илье Ильиче Обломове, его слуге Захара и описывает их быт. Любимое занятие Обломова – это лежать на диване и размышлять о жизни. В описываемое утро

В данном стихотворении рассказывается о юноше, который бежал с поля боя, где пали его отец и братья. Гонимый страхом он идет в родной аул, где его все отвергают.

Одна из очень необычных и интересных книг попадает в руки одного переводчика. Эта книга носила название «Записки отца Андсона из Мелька». Они попали в руки того человека ровно в Праге в 1968 году.

Привычное дело

Едет на дровнях мужик Иван Африканович Дрынов. Напился с трактористом Мишкой Петровым и теперь с мерином Пармёном беседует. Везёт из сельпо товар для магазина, а заехал спьяну не в ту деревню, значит, домой только — к утру. Дело привычное. А ночью по дороге нагоняет Ивана Африкановича все тот же Мишка. Ещё выпили. И тут решает Иван Африканович сосватать Мишке свою троюродную сестру, сорокалетнюю Нюшку-зоотехницу. Она, правда, с бельмом, зато если с левого боку глядеть, так и не видно. Нюшка прогоняет друзей ухватом, и ночевать им приходится в бане.

И как раз в это время у жены Ивана Африкановича Катерины родится девятый, Иван. А Катерина, хоть и запретила ей фельдшерица строго-настрого, после родов — сразу на работу, тяжело больная. И вспоминает Катерина, как в Петров день наблудил Иван с бойкой бабёнкой из их села Дашкой Путанкой и потом, когда Катерина простила его, на радостях обменял доставшуюся от деда Библию на «гармонью» — жену веселить. А сейчас Дашка не хочет ухаживать за телятами, так Катерине приходится работать и за неё (а иначе семью и не прокормишь). Измученная работой и болезнью, Катерина внезапно падает в обморок. Её увозят в больницу. Гипертония, удар. И только больше чем через две недели она возвращается домой.

А Иван Африканович тоже вспоминает про гармонь: не успел он научиться даже и на басах играть, как её отобрали за недоимки.

Приходит время сенокоса. Иван Африканович в лесу, тайком, за семь вёрст от деревни косит по ночам. Если трёх стогов не накосишь, корову кормить нечем: десяти процентов накошенного в колхозе сена хватает самое большее на месяц. В одну из ночей Иван Африканович берет с собой малолетнего сына Гришку, а тот потом по глупости рассказывает районному уполномоченному, что ходил с отцом ночью в лес косить. Ивану Африкановичу грозят судом: ведь он депутат сельсовета, а потом тот же уполномоченный требует «подсказать», кто ещё в лесу по ночам косит, написать список. За это он обещает «не обобществлять» личные стога Дрынова. Иван Африканович договаривается с соседским председателем и вместе с Катериной ходит в лес на чужую территорию косить по ночам.

В это время в их деревню приезжает из Мурманска без копейки денег Митька Поляков, брат Катерины. Недели не прошло, как он напоил всю деревню, начальство облаял, Мишке сосватал Дашку Путанку, да и корову сеном обеспечил. И все будто походя. Дашка Путанка поит Мишку приворотным зельем, и его потом долго рвёт, а через день по Митькиному наущению они едут в сельсовет и расписываются. Вскоре Дашка срывает с Мишкиного трактора репродукцию картины Рубенса «Союз земли и воды» (там изображена голая баба, по общему мнению, вылитая Нюшка) и сжигает «картинку» в печи из ревности. Мишка в ответ чуть не сбрасывает трактором Дашку, моющуюся в бане, вместе с баней прямо в речку. В результате — трактор повреждён, а на чердаке бани обнаружено незаконно скошенное сено. Сено заодно начинают искать у всех в деревне, доходит очередь и до Ивана Африкановича. Дело привычное.

Митьку вызывают в милицию, в район (за соучастие в порче трактора и за сено), но по ошибке пятнадцать суток дают не ему, а другому Полякову, тоже из Сосновки (там полдеревни Поляковы). Мишка же свои пятнадцать суток отбывает прямо в своей деревне, без отрыва от производства, по вечерам напиваясь с приставленным к нему сержантом.

После того как у Ивана Африкановича отбирают все накошенное тайком сено, Митька убеждает его бросить деревню и уехать в Заполярье на заработки. Не хочет Дрынов покидать родные места, да ведь если Митьку послушать, то другого выхода-то и нет. И Иван Африканович решается. Председатель не хочет давать ему справку, по которой можно получить паспорт, но Дрынов в отчаянии угрожает ему кочергой, и председатель вдруг сникает: «Хоть все разбегитесь. »

Теперь Иван Африканович — вольный казак. Он прощается с Катериной и вдруг весь сжимается от боли, жалости и любви к ней. И, ничего не говоря, отталкивает её, словно с берега в омут.

А Катерине после его отъезда приходится косить одной. Там-то, во время косьбы, и настигает её второй удар. Еле живую, её привозят домой. И в больницу в таком состоянии нельзя — умрёт, не довезут.

А Иван Африканович возвращается в родную деревню. Наездился. И рассказывает он чуть знакомому парню из дальней заозёрной деревни, как поехали было с Митькой, да он лук продавал и вовремя в поезд вскочить не успел, а билеты-то все у него и остались. Высадили Ивана Африкановича и потребовали, чтобы он в течение трёх часов уехал назад, в деревню, а штраф, мол, в колхоз пришлют, да только как ехать, если не на что, — не сказали. И вдруг — поезд подошёл и с него слез Митька. Так тут Иван Африканович и взмолился: «Не надо мне ничего, отпусти ты меня только домой». Продали они лук, купили обратный билет, и поехал, наконец, Дрынов домой.

А парень в ответ на рассказ сообщает новость: в деревне Ивана Африкановича баба померла, ребятишек много осталось. Парень уходит, а Дрынов вдруг падает на дорогу, зажимает руками голову и перекатывается в придорожную канаву. Бухает кулаком в луговину, грызёт землю.

Рогуля, корова Ивана Африкановича, вспоминает свою жизнь, будто удивляясь ей, косматому солнцу, теплу. Она всегда была равнодушна к себе, и очень редко нарушалась её вневременная необъятная созерцательность. Приходит мать Катерины Евстолья, плачет над своей ведёрницей и велит всем детям обнять Рогулю, проститься. Дрынов просит Мишку зарезать корову, сам не может. Мясо обещают принять в столовую. Иван Африканович перебирает Рогулины потроха, и на его окровавленные пальцы капают слезы.

Детей Ивана Африкановича, Митьку и Ваську, отдают в приют,

Антошку — в училище. Митька пишет, чтобы посылали Катюшку к нему в Мурманск, только больно мала-то. Остаются Гришка с Марусей да два младенца. И то трудно: Евстолья стара, руки стали худые. Она вспоминает, как Катерина перед смертью, уже без памяти, звала мужа: «Иван, ветрено, ой, Иван, ветрено как!»

После смерти жены Иван Африканович не хочет жить. Ходит обросший, страшный да курит горький сельповский табак. А Нюшка берет на себя заботу о его детях.

Иван Африканович идёт в лес (ищет осину для новой лодки) и вдруг видит на ветке платок Катерины. Глотая слезы, вдыхает горький, родимый запах её волос. Надо идти. Идти. Постепенно он понимает, что заблудился. А без хлеба в лесу каюк. Он много думает о смерти, все больше слабеет и лишь на третий день, когда уже на карачках ползёт, вдруг слышит тракторный гул. А спасший своего друга Мишка поначалу думает, что Иван Африканович пьян, да так ничего и не понимает. Дело привычное.

. Через два дня, на сороковой день после Катерининой смерти, Иван Африканович, сидя на могиле жены, рассказывает ей о детях, говорит, что худо ему без неё, что будет ходить к ней. И просит ждать. «Милая, светлая моя. вон рябины тебе принёс. »

Он весь дрожит. Горе пластает его на похолодевшей, не обросшей травой земле. И никто этого не видит.

Василий Иванович Белов, Лад: краткое содержание по главам

Немного об авторе

Творчество Василия Белова

Книги

«Лад»: часть первая

«Спутник женской судьбы»

«Лад»: часть вторая

Жизненный круг

Часть третья

«Начало всех начал»

Главные герои

Источники:

http://chitatelskij-dnevnik.ru/kratkoe-soderzhanie/belov/lad
http://briefly.ru/belov/privychnoe_delo/
http://autogear.ru/article/288/491/vasiliy-belov-lad-kratkoe-soderjanie/

Василий Белов «Лад» – анализ А. Солженицына

«Лад» (1979-81). – Это – уникальная книга, и жанр её нелегко определить. Формально бы – этнографические очерки (даже – энциклопедия) о жизни русского, преимущественно – северного, то есть самого исконного, крестьянства в охвате веков и каким оно дошло до советского времени, отчасти – и до Второй Мировой войны. Но Белов и сам предупреждает, что он «никак не претендует на академичность», хотя очень продуманное, стройное изложение и богатство фактического материала дозволяет книге служить и обширным, и местами незаменимым, справочным пособием. Мало сказать, что это очень серьёзная, размыслительная книга, но она вся пропитана поэтичным (Белов – в своей родной стихии!), любовным и умиряющим духом. Она содержит и цитаты, эпиграфы из поэтов, из фольклора, высказывания русских мыслителей, художников, изрядную долю и личного опыта автора, показательные случаи из жизни, – в книге разные слои, и они перемешиваются. Немало авторских комментариев от светлой души, – и они с интересом и легко читаются.

Книга составлена из последовательных разделов: «Круглый год» (сезонные чередования крестьянской работы и жизни). – «Подмастерья и мастера». – Работы и рукоделья женские. – «Родное гнездо» (жильё и что его окружает). – «Жизненный круг» (от младенчества и до смерти, шаг за шагом прослеживая переливы возрастных признаков; и от рожденья до похорон, черезо все бытовые обряды, игры, гулянья, праздники, сходы; но – примечательно для Белова: обряды церковные и вообще церковность, и церковный дух простонародья – вовсе не охвачены этой обильной книгою). – Еда и одежда. – Искусство народного слова (и виды его: разговор, предание, бывальщина, сказка, пословица, песня, причитание, частушка, загадка, прозвища; тут и – природные свойства сказочников, роль импровизации; и судьба всех этих жанров в послереволюционное время). – Наконец деревянное зодчество и народная скульптура. «Деревянные северные храмы поражали не размерами, а соразмерностью». Орнамент деревянных сооружений, птицы и кони в архитектуре. Шемогодская резьба по берёсте и холмогорская резьба по кости. Резная посуда, резные игрушки (и лаконизм игрушек глиняных). – Всё это и сгущено в названии «Лад», лад жизни – в контраст с разладом её.

Василий Иванович Белов

Роль ритма в жизни и труде. Ритмичность в ежегодном повторе работ. Работы погоняют и перекрывают друг друга, бывает тесно одной работе от другой. «Такое состояние, когда человек не знает, чем ему заняться, совершенно исключено в крестьянском быту». Детская игра переходит в труд. Многообразие, многослойность и внутренняя гармоничность крестьянского хозяйства. Эта гармония придаёт сельскому труду красоту. Кто умеет красиво косить или плотничать – накосит и наплотничает больше и лучше.

Память и меткость в приметах погоды, их полугодовой пересчёт. Почти однодневная угадка момента посева. «Тот или иной обычай так естественен, так древен, что выглядит произведением самой природы». Молитва при начале важных работ, особенно сева. Взаимопонимание и сотрудничество с лошадью при каждой работе (а у женщины – с коровой). Да душевные отношения со всеми домашними животными – и отзывчивость тех.

То и дело вклиняются расширительные размышления автора, весьма уместные, много – психологических. Стихийное ощущение родного гнезда не зависит от красоты местности. С возрастом и до возмужалости – расширяющиеся круги этого ощущения, «своя душа в каждой волости». (Но показательны и его замечания о сходстве гоголевских миргородских сюжетов и персонажей – с северными.) «Трудолюбивые добрые люди были в чести у мира». Широкая взаимовыручка, особенно к сиротам и вдовам. Роль стариков в многодетных семьях (где теперь и те, и другие?), их душевное равновесие в ожидании смерти. «Русская печь остывала только с гибелью семьи или дома».

Немало и метких размышлений о народном художественном творчестве. Слияние предметов народного искусства с предметами быта и труда. Народная эстетика вытекает из жизненной психологии. Роль мастерства в крестьянской жизни. Красота в труде как отстаивание своей личности. Искусство может жить в любом труде, даже у дровосека. «Общенародная тяга к созидающему труду. Всё начинается с неудержимого и неизъяснимого желания трудиться». Мастерство – та же почва, из которой вырастают художники. «Потребность таланта теплится в каждом из нас, только вырастает в разной мере». «Высокий восторг и вдохновение возможны в любом труде». И при том: большие мастера своего дела не гнались за мирской известностью, «даже видели в ней нечто постыдное, мешающее их художеству».

Весьма познавателен, подробен и интересен весь раздел о мастерах. Особенное внимание и понимание у Белова – к плотницкому делу, в котором он и сам много потрудился. «Плотницкое дело – извечный и неизбежный спутник земледелия», «топор у каждого плотника – продолжение рук»; «чувство дерева». (Тут – и все виды древесных материалов, и: крыши изб крылись без единого гвоздя, да так, что никакой ветер их не сорвёт.) Но со вниманием и пониманием вникает автор в работу печников, кузнецов, гончаров («рождение образа из глины и огня»), столяров, бондарей, швецов (портных), сапожников, скорняков (кожевников), шорников, колесников, лудильщиков, дегтярей, смолокуров, пастухов, даже копателей колодцев (как угадывают «водяную жилу», где копать, и по росе, и по растущей траве, и по толчее мошки), помянет и слесаря-односельчанина, который сладил железный протез обезножевшему фронтовику, и катальщиков валенок – для каждой профессии находит автор любовные слова и разъясняет тонкости мастерства. Услеживает и безвозвратно погибшие виды художественных промыслов и гибель художественности от поточности производства. И, конечно, о кормильцах-мельниках, и о тех, кто пошёл по торговой линии, и тут важное психологическое замечание: сами торговцы считали увеличение своей торговли – грехом (как и вообще «в старину многие люди считали Божьим наказанием не бедность, а богатство»).

Да, почти всё это – ушло невозвратимо, никогда уже не вернётся – но тем дороже, что так любовно схвачено при своём иссякании. У Белова – множество метких замечаний по творчеству всех видов, и как оно связано с терпением, трудолюбием и пониманием традиции. («Почти все умельцы становились подмастерьями, но только часть из них – мастерами», однако было и: «мастерство, передаваемое по наследству или по волостному соседству».)

И отдельно: целая поэма – о женских рукоделиях. «Лён – был женский удел, как лес – мужской». Сложные перипетии выращивания и неоднократной обработки льна, с какой точностью надо успевать за сменами погоды. Прослеживает всю неповторимую технологию обработки неповторимого же по качествам и многолетне служащего льна (так и не восполненного никакими новейшими тканями). И как эта обработка погоняла к неутомному труду, но и вписывалась в быт, в супрядки-«беседы» с их игровыми элементами. Дальше – виды тканья, виды шитья, вязанье, кружево, плетение – и сочетание рукоделий с песнями. (И как краски труда изгасли в колхозных условиях.)

С большим знанием дела и смысла – много устройственных подробностей – памятник уходящей цивилизации. Примечательные особенности крестьянских сходов (впрочем – и живописность иных колхозных собраний). Многочисленные обряды (ритуальные потчевания и отказы от них, воздержание; гостьба и отгащивание; свадебные обряды, начиная от сватовства). Перерождение гуляний в советское время, снижение хорового искусства и плясок. «Народная музыкальная эстетика немыслима без слияния со звуками и шумами природы». А «после войны художественная организованность народного быта ещё намного снизилась». – Чувство меры в одежде – между щегольством и убожеством. («От сословной спеси национальные традиции в одежде стали считаться признаком косности».) Сочетание добротности и удобства, особенно в одежде повседневной. И бережливость к одежде, донашивание её в поколениях. «Выбрасывать – считалось грехом, как и покупать лишнее». «Неустойчивый быт 20 – 30-х годов свёл на нет резкую границу между выходным одеянием и будничным». – Наконец – и разные, многие виды крестьянской пищи, теперь тоже невозвратно ушедшие (та же выпечка ржаных караваев, которых нам уже никогда не есть).

На фоне огромного бытового материала порой не минует Белов и соображений о глубокой дали русской истории. Украшает книгу и его высокая чуткость к русскому словообразованию. Нашлось в книге и место оспорить мнение, будто северная русская природа «неяркая, неброская»: не говоря уже о переменах, связанных с временами года, – «смена пейзажных настроений происходит порою буквально в считанные секунды. Лесное озеро из густо-синего моментально может преобразиться в серебристо-сиреневое, стоит подуть из леса лёгкому шуточному ветерку. Ржаное поле и берёзовый лес, речное лоно и луговая трава меняют свои цвета в зависимости от силы и направления ветра. А ещё же – небо, солнце, луна, тепло и холод… Зелень льна меняется с его ростом, зелень трав – бесконечно, а луга после косьбы снова ярко зелены, и до зимы зеленеет озимь. Вода в озёрах и реках то стальная, то голубая, то – до чернильной густоты…»

Книга «Лад» – драгоценность в русской печатности.

Отрывок очерка о Василии Белове из «Литературной коллекции», написанной Александром Солженицыным. Читайте также отзывы Солженицына о других книгах Василия Белова: «Привычное дело», «Плотницкие рассказы», «Кануны», «Всё впереди».

Василий Белов — ЛАД читать онлайн

Василий Иванович Белов

ЛАД

Белов В. И.

Б 43 Лад: Очерки о народной эстетике. — М.: Мол. гвардия, 1982. 293 с., ил.

7 р. 50 к. 50000 экз.

Издание предназначено для широкого круга читателей.

4904000000-232 078(02)-82

058-81

ББК 84Р7+63.5(2) Р2+902.7

Фотосъемка проведена в Вологодской и Архангельской областях в 1979–1981 годах.

Архивные фотографии получены из фондов Вологодского краеведческого музея.

ИБ № 2826

Василий Иванович Белов

ЛАД

В неутолимой жажде познания главное свойство науки — ее величие и бессилие. Но для всех народов Земли жажда прекрасного не менее традиционна. Как не похожи друг на друга две эти человеческие потребности, одинаковые по своему могуществу и происхождению! И если мир состоит действительно лишь из времени и пространства, то, думается, наука взаимодействует больше с пространством, а искусство со временем…

Народная жизнь в ее идеальном, всеобъемлющем смысле и знать не знала подобного или какого-либо другого разделения. Мир для человека был единое целое. Столетия гранили и шлифовали жизненный уклад, сформированный еще в пору язычества. Все, что было лишним, или громоздким, или не подходящим здравому смыслу, национальному характеру, климатическим условиям, — все это отсеивалось временем. А то, чего недоставало в этом всегда стремившемся к совершенству укладе, частью постепенно рождалось в глубинах народной жизни, частью заимствовалось у других народов и довольно быстро утверждалось по всему государству.

Ритм — одно из условий жизни. И жизнь моих предков, северных русских крестьян, в основе своей и в частностях была ритмичной. Любое нарушение этого ритма — война, мор, неурожай — лихорадило весь народ, все государство. Перебои в ритме семейной жизни (болезнь или преждевременная смерть, пожар, супружеская измена, развод, кража, арест члена семьи, гибель коня, рекрутство) не только разрушали семью, но сказывались на жизни и всей деревни.

Все было взаимосвязано, и ничто не могло жить отдельно или друг без друга, всему предназначалось свое место и время. Ничто не могло существовать вне целого или появиться вне очереди. При этом единство и цельность вовсе не противоречили красоте и многообразию. Красоту нельзя было отделить от пользы, пользу — от красоты. Мастер назывался художником, художник — мастером. Иными словами, красота находилась в растворенном, а не в кристаллическом, как теперь, состоянии.

Молодежь во все времена несет на своих плечах главную тяжесть социального развития общества. Современные юноши и девушки не исключение из этого правила. Но где бы ни тратили они свою неуемную энергию: на таежной ли стройке, в полях ли Нечерноземья, в заводских ли цехах — повсюду молодому человеку необходимы прежде всего высокие нравственные критерии… Физическая закалка, уровень академических знаний и высокое профессиональное мастерство сами по себе, без этих нравственных критериев, еще ничего не значат.

Но нельзя воспитать в себе эти высокие нравственные начала, не зная того, что было до нас. Ведь даже современные технические достижения не появились из ничего, а многие трудовые процессы ничуть не изменились по своей сути. Например, выращивание и обработка льна сохранили все древнейшие производственно-эстетические элементы так называемого льняного цикла. Все лишь ускорено и механизировано, но лен надо так же трепать, прясть и ткать, как это делалось в новгородских селах и десять веков назад.

Так же точь-в-точь и будущие поколения не смогут обойтись без ныне живущих, то есть без нас с вами. Им так же будет необходим наш нравственный и культурный опыт, как нам необходим сейчас опыт людей, которые жили до нас.

Книга не случайно называется «Лад» и рассказывает о ладе, а не о разладе крестьянской жизни. Она была задумана как сборник зарисовок о северном быте и народной эстетике. При этом я старался рассказывать лишь о том, что знаю, пережил или видел сам либо знали и пережили близкие мне люди. Добрая половина материалов записана со слов моей матери Анфисы Ивановны Беловой. Воспоминаний, а также впечатлений сегодняшнего дня оказалось слишком много. Волей-неволей мне пришлось систематизировать материал, придавая рассказу какой-то, пусть и относительный, порядок, чем и продиктовано композиционное построение книги.

Весна.

12 марта — Прокоп — увяз в сугроб.

13 марта — Василий-капельник.

14 марта — Евдокия — замочи подол.

Белов лад краткое содержание

ЛАД

Download link: Белов лад краткое содержание

А ночью по дороге нагоняет Ивана Африкановича все тот же Мишка. Она, правда, с бельмом, зато если с левого боку глядеть, так и не видно… Да и сам труд отдельно как бы не существует, он не заметен в быту, жизнь едина.

Именно на этой стороне быта останавливает автор свое внимание. Про Астафьева, несмотря на они каким-то шестым чувством понимали что он перебежит к ним в итоге. Щи из такой баранины приобретали совершенно другой вкус. Но для всех народов Земли жажда прекрасного не менее традиционна.

Краткое содержание Белов Лад — Долга наша зима, многое можно успеть. Вначале набивают снопами кузов повозки, вдоль до краев, потом кладут их рядами поперек, внутрь колосьями.

Картина жизни представляется весьма обычной, для такого рода поселения. Много деревьев, но больше — открытой местности. Вот виднеется мужичонка, который едет на телеге, и, причем он очень пьян. Это Иван Дрынов, который был уже навеселе, так как повстречал своего друга, которого звали Михаил. Этот Мишка успел напиться также, как и Иван. И довел его до такого, что Иван уже забыл, каким маршрутом ему нужно ехать назад в своей поселок. Ведь приехал сюда он лишь для того, чтобы забрать продукты для местного их магазин. А тут вдруг друг повстречался. И просто грех было — не выпить с ним, как он считал. Когда же он немного протрезвел, собрался домой ехать, и даже вроде бы дорогу уже вспомнил. И даже телегу поворотил в нужную сторону. Но тут снова появился его дружок, Мишка, и пришлось снова выпивать спиртное, потому что на дорожку — тоже важно выпить. Когда он снова стал пьян вместе со своим другом, он решил, что стоило бы сосватать свою знакомую ему женщину, а вернее — двоюродную сестру, своему другу — Мишке. Именно потому, на пьяную голову, они поехали у ней. И она жила в том селе. Но она отказалась от их предложения, хоть была женщина одинокая. Положила спать их в бане, так как мужики пьяные, да почти неизвестные — опасность для одинокой женщины. Можете использовать этот текст для читательского дневника Белов. Некрасова «Дедушка Мазай и зайцы», по праву считается одним из его лучших и знаменитых произведений. Эта девушка очень умна и рациональна и она также достаточно спокойна. Она умеет держать секреты, а потому ее взял на работу один хирург, которому нужны были помощники. Это был профессор Керн. Ермолай пообедал и прилёг на кровать. С горечью в голосе он сообщил, что закончилась дробь. Захотелось ему двор организовать, чтоб было так, как в старину жили.

«Мой голос живой». Василий Иванович Белов 09.05.2017

Тарасова Стихия народной жизни необъятна и ни с чем не соизмерима. Только у не имеющих призвания к рыбной ловле либо у боящихся воды не было своей лодки. Извечное стремление русского крестьянина не оказаться последним, не стать посмешищем прекрасно было использовано в первые колхозные годы. Народная жизнь в ее идеальном, всеобъемлющем смысле и знать не знала подобного или какого-либо другого разделения. Выкидает семена в холодную землю — глядишь, уже с осени ребятишки пошли по миру. Чай, по-видимому, сильно потеснил в русском быту сбитень, а также плодовые и ягодные напитки, хотя с квасом ему было трудно тягаться. Он как бы дополнял в доме два важнейших средоточия: очаг и передний угол, огонь хозяйственный и тепло духовное, внутреннее. Хозяйка намек сделала: наломать бы сосновых лапок на помело. В поле, в лесу, на гумне, в доме, в хлеву — везде ежедневно появляется что-нибудь новое, присущее одной лишь весне и забытое за год.

белов лада прочитать аннотацию. V

Василий Белов. Хорошо. Очерки народной эстетики

В. И. Белов

B 43 Lad: Очерки народной эстетики. — М .: Мол. охранник, 1982. 293 с., ил.

7 стр. 50 к. 50 000 экз.

Знаменитый советский писатель рассказывает об эстетике крестьянского труда, фольклоре, быте, художественных промыслах. В книге использованы этнографические материалы из Вологодской, Архангельской, Кировской областей.

Издание предназначено для широкого круга читателей.

0000-232 078 (02) -82

BBK 84R7 + 63.5 (2) P2 + 902.7

Фотосъемка проводилась в Вологодской и Архангельской областях в 1979-1981 гг.

Архивные фотографии получены из фондов Вологодского краеведческого музея.

Василий Иванович Белов

Редактор 3.Костюшина Художественный редактор Сахарова С. Технический редактор Э. Брауде Корректоры Авдеева В., Тарасова И.

Стихия жизни людей огромна и ни с чем не сравнима. Никто не смог полностью осознать это и, надеюсь, никогда не поймет.

В неутолимой жажде знаний главное свойство науки — ее величие и бессилие. Но для всех народов Земли тяга к красоте не менее традиционна.Как различны эти две человеческие потребности, одинаковые по своей силе и происхождению! И если мир действительно состоит только из времени и пространства, то, я думаю, наука больше взаимодействует с пространством, а искусство — со временем …

Жизнь людей в ее идеальном, всеобъемлющем смысле и благородстве не знала ни того, ни другого. разделение. Мир для человека был единым целым. На протяжении веков они шлифовали и шлифовали образ жизни, сложившийся во времена язычества. Все лишнее, громоздкое, не подходящее по здравому смыслу, национальному характеру, климатическим условиям — все это время устранило.И то, чего не хватало в этом образе жизни, всегда стремлении к совершенству, частично постепенно зарождалось в недрах жизни людей, частично заимствовалось у других народов и быстро утвердилось во всем государстве.

Такую упорядоченность и устойчивость можно смело назвать статичностью, неподвижностью, чем занимаются некоторые «исследователи» народного быта. При этом они сознательно игнорируют ритм и цикличность, исключая повседневную статичность и неподвижность.

Ритм — одно из условий жизни.И жизнь моих предков, северных русских крестьян, была в основном и особенно ритмичной. Любое нарушение этого ритма — война, эпидемия, неурожай — лихорадило весь народ, все государство. Нарушения ритма семейной жизни (болезнь или преждевременная смерть, пожар, супружеская измена, развод, кража, арест члена семьи, смерть лошади, вербовка) не только разрушали семью, но и сказывались на жизни всего села.

Ритм проявился во всем, образуя цикличность.Мы можем говорить о дневном цикле и о недельном, для отдельного человека и для всей семьи, о летнем или весеннем цикле, о годовом цикле, наконец, обо всей жизни: от зачатия до могильной травы …

Все было взаимосвязано, и ничто не могло жить отдельно и друг без друга, всему было свое место и время. Ничто не могло существовать вне целого или появиться не по порядку. При этом единство и цельность нисколько не противоречили красоте и разнообразию.Красоту нельзя отделить от полезности, выгоду от красоты. Мастера называли художником, художника — мастером. Другими словами, красота была в растворенном состоянии, а не в кристаллическом состоянии, как сейчас.

Меня могут спросить: зачем такое пристальное внимание к старому, во многом исчезнувшему образу жизни людей? По моему глубокому убеждению, знание того, что было до нас, не только желательно, но и необходимо.

Молодые люди всегда несут на своих плечах основную ношу социального развития общества.Современные мальчики и девочки не исключение из этого правила. Но куда бы они ни тратили свою неуемную энергию: на таежной стройке, на полях Нечерноземья или в заводских цехах, везде молодому человеку нужны высокие нравственные нормы, прежде всего … Физическая подготовка, уровень академических знаний и высокие профессиональные навыки сами по себе, без этих моральных критериев, еще ничего не значат.

Но нельзя культивировать в себе эти высокие моральные принципы, не зная, что было до нас.Ведь даже современные технические достижения возникли не на пустом месте, а многие трудовые процессы вообще не изменились по своей сути. Например, при выращивании и переработке льна сохранились все древнейшие производственные и эстетические элементы так называемого льняного цикла. Все только ускоряется и механизируется, а лен надо взъерошивать, прядать и ткать так же, как это делали в новгородских деревнях десять веков назад.

Культура и народная жизнь также имеют глубокую преемственность.Сделать шаг вперед можно только тогда, когда нога от чего-то отталкивается, движение из ничего или из ничего невозможно. Поэтому нашу молодежь так интересует, что волновало дедов и прадедов.

Точно так же и будущие поколения не смогут обойтись без живых, то есть без вас и меня. Им также понадобится наш моральный и культурный опыт, поскольку нам нужен опыт людей, которые жили до нас сейчас.

Книга не случайно называется «Лад» и рассказывает о гармонии, а не о разладе крестьянской жизни.Он задуман как сборник очерков о северном быте и народной эстетике. При этом я старался говорить только о том, что знаю, пережил или видел сам, или о близких мне людях, которые знали и пережили. Добрая половина материалов записана со слов моей мамы Анфисы Ивановны Беловой. Было слишком много воспоминаний, как и впечатлений от сегодняшнего дня. Волей-неволей пришлось систематизировать материал, придать рассказу некоторый, хотя и относительный порядок, который диктовал композиционную структуру книги.

Чтобы сэкономить место, мне пришлось постоянно сокращать или даже удалять живой фактический материал, довольствуясь общими размышлениями.

КРУГЛЫЙ ГОД

Весна. Когда-то весной все в России начиналось. Даже под Новый год. Христианские святые легко уживались с приметами языческого календаря, почти каждый день существовала пословица: 6 марта — Тимофей-весна.

Говорили, что если Евдокия поила цыпленка, то Никола (22 мая) корову покормит *.Знаки, рожденные многовековым опытом общения с природой, всегда определенны и лишены какой-либо мистики. Например, если прилетели ласточки, не раздумывая сеять горох.

Границы между четырьмя сезонами на нашем Севере нечеткие, расплывчатые. Но нигде нет такого контраста, такой разницы между зимой и летом, как у нас.

Весна произошла в году между первой каплей и первым громом.

После Масленицы в крестьянском труде нет перерывов.Одно следует из другого, просто успевают перевернуться. (Может, поэтому и говорят: круглый год.) И все же весной люди приходят к своим особенным радостям. В поле, в лесу, на гумне, в доме, в конюшне — каждый день появляется что-то новое, присущее только весне и забытое через год. А как приятно познакомиться со старыми добрыми знакомыми! Подошла легкая талая вода к самой бане — вылезайте из лодки, прогрейте ароматную густую смолу. Заодно отшлифуете сапоги и замените на утомленные зимой тяжелые сапоги.Вот и прибыла первая ладья, изо дня в день ждут скворцов. Никуда не денешься, нужно поставить скворечник —

Финики в новом стиле. Подробнее о народном календаре см. Книгу Ива. Полуянов «Месяцы». Архангельск, 1979.

ники — это детская радость. И вдруг в саду растаяла варежка, потерявшаяся зимой … И вспомнишь декабрьскую зимнюю дорогу, по которой ехали с гребнями для новой бани.

Кстати, не думайте о том, что произошло.Да прошло. До того, как дорога обвалится, необходимо вынести из леса последнее сено и иголки для подстилки скота и дрова для сухих лесов, а по пути собирать ловушки, катаясь на лыжах по большой и малой тропинкам.

А вот конь, фыркает, трусы утром из села. На тележке с полдюжины заголовков, чтоб не таскать потом натодально. (Скоро начнется нерест щуки: необходимо вывести из озера и установить ловушки.) Назад — с тележкой с сеном или хвоей. Пока лошадь отдыхает и хрустит зеленым мешком, пока солнце не растопит синюю корку, успейте зайти в чащу, чтобы присмотреть и пометить деревья для рубки на сок. Еще достаньте сосновую смолу — бабушка попросила приготовить лекарство. Хозяйка намекнула: сломать сосновые ножки для метлы. Это тоже необходимо. Сколько? Это дело минуты, но помнить об этом приятно, да и срубить хижину по дороге тоже нужно: тетерева просто тыкают… Также нарубите березовые ветки на гуманные метелки. И только потом, когда лошадь идет к дому и буксиры скрипят, можно вздремнуть на телеге или затянуть песню про какого-нибудь ключника Ваньку …

Весной старушки и бабы белят полотна на корочка. Вытаскивают из погребов и перебирают семенной и съедобный картофель, заодно угощают детей репой и морковью сочными, как будто только что с грядки.

Они проветривают шубы и любую одежду, вешая их на горячие точки, потому что моль боится солнца.Девочки продолжают вертеться в разговорах, мужчины и мальчики много работают в столярных мастерских. Ремонтируют бытовую технику: обвязку, тележки, бороны. Они наматывают веревки, сбрасывают снег с крыш.

В ход идут тысячи вечных знамений, люди задаются вопросом, какой будет весна и чего ждать от лета.

К этому времени уже отелилось много коров. Другие ждут час за часом. Хозяйка большого театра даже ночью ходит в амбар. Детям тоже не терпится, им уже надоело не пить молока.И вдруг однажды утром в избе за печкой он появился, стуча копытами. Большие глаза, влажные губы. Шерсть шелковая. Все идут гладить по очереди. Первые дни молоко, а точнее молозиво, только теленка, затем, если пост уже закончился, все пьют. Крестьянские семьи не пили молоко, как сейчас, а пили по ложке, с кусочком хлеба или с киселем, овсянкой и ягодами.

Скот, после долгой зимы простояв в душном темном сарае, по-человечески радуется весне.Просит воздуха, солнца. А когда коров на короткое время выпускают во двор, от радости прыгает другая.

Между тем стало довольно тепло, дороги упали. Поля и луга начали избавляться от снега. Старики смотрят на небо, прислушиваются к себе: что такое весна? Затяжной и холодный или короткий и теплый? Не пропускать посевной период. Тот, кто расстался с трехполкой и вводит культурный севооборот, уже утром рассыпал клевер по осколку льда.

С тревогой в душе люди идут посмотреть на зиму: не промокла ли она, как преодолела зиму? Ведь матушка рожь, как гласит пословица, всех полностью кормит. И скот, и птица, и крестьянская семья.

Все в порядке, а когда сеять? Еще одна поспешность, прежде чем он успел выбраться, он пошел пахать. Обрадовался, погоню насвистывает. В холодную землю кидает семена — ведь с осени дети разъезжают по свету.Другой не успел подготовиться: либо семя не было зарыблено, либо лошади оторвало плечо. Это тоже неурожай.

В хорошей деревне таких чудаков мало …

Все готово, а когда уезжать?

Шутя или серьезно, не поймешь, но в народе говорили: «Иди в поле и сядь на землю голой задницей. Вы сразу узнаете, пора ли сеять или нужно подождать. «

А здесь самый опытный, самый старательный фермер тянул плуг и запрягал кобылу утром.И все бросились в поле как по команде …

Буксиры пахли гудроном, сошники скрипели мелкой галькой. В небе над полем льются жаворонки. Пахари свистят, приказывают лошадям: «Прямо! Прямо! »Или на повороте:« А что, забыли зимой, где правая, где левая? »

И конь, смущенно виляя хвостом, поворачивает в нужное место.

Вообще в посеве у пахаря и лошади должно быть полное взаимопонимание.Если начнут скандалы, ничего не получится. Хороший мужик без погони пашет, лошадь

не ругается, не ругает ее. Действует на нее с любовью, уговорами и иногда стыдит ее как личность. Беспокойная лошадь не годится для пашни.

И борозда следует за тобой и идет, и грачи тотчас же садятся в нее, спотыкаясь носами в родную землю *.

Это она, земля, которая кормит и пьет, одевает и нежить. Голуби в свое время с цветами, веют прохладой, сливают с тебя пот усталости.Она возьмет тебя в себя, обнимет и навсегда отдохнет, когда наступит твой дедлайн … А тем временем черная борозда уходит и уходит, как полоска. Слой за слоем попадает на поле. И ваш отец, или сын, или жена, или сестра уже запрягают другую лошадь, чтобы боронить, выравнивать эту весеннюю землю.

А дедушка или бабушка уже насыпает в корзину белый крупнозернистый овес. Здесь вечный сеятель медленно идет полосой, размахивая рукой из стороны в сторону. Шаг второй — и из пригоршни летит золотой дождь.Отскочив от корзины, зерна попадают на свежую почву. Сеятель бормочет себе какое-то вечное заклинание: либо поет, либо молится.

В соседнем сосновом лесу дети зажгли костер. Девочки, собирая сморчков-подснежников, поют «Веснянку». Земля подсыхает, нужно сразу же боронить семена.

Обычно после овса сеяли лен — одну, максимум две полосы, потом горох и ячмень.

Была такая примета: нужно стоять под березой и смотреть на солнышко.Если уже можно смотреть сквозь крону, не прищурившись, то продолжать посев бесполезно. Вы только зря выбрасываете семена. Если листва не больше копейки и солнце легко пробивается сквозь нее, то день-два еще можно сеять.

После посева баню необходимо утеплить. На этой неделе и люди, и лошади получили: мужик парится, лошадь защищается.

А вот и первая травка.

Первый выпас скота на пастбище — не худшее событие, чем другие.Пастух в этот день крестный отец короля …

Трава быстро растет. В живых. В лесу, если день теплый, к вечеру некоторые стебли выдвигаются на дюйм от земли.

Глядишь, пора огороды сажать … В питомники плюют семенами овощей. Женщина положит в рот заранее замоченные семена капусты или брюквы и скажет, что есть силы. Семена равномерно разбросаны по питомнику. Ночью детскую застилают брезентовым постельным бельем или даже шубами, если старики обещали мороз и если кошка прижалась к теплой лоскуте.

Огородить огород — тоже очень важное дело; без огорода скот за лето все разъест. У хороших хозяев можжевельник, осиновый столб, еловый столб — живая изгородь не изношена. У ленивого есть то, что придется, а потому каждую весну приходится фехтовать.

Весна заканчивается первым тёплым дождём и первым раскатистым громом. Услышав гром, девушки должны кувыркаться через голову, чтобы не болела поясница во время сбора урожая.И мы должны успеть сделать сальто, пока не утихнет гром. Будь то в луже, хоть на лугу, хоть в повседневном сарафане, хоть в праздничном, все равно кувыркается. Смех, возгласы и восторженные девичьи визги не утихают с грозой.

Лето. Так устроен мир: если вы вспахали, значит, сеять надо, а если посеять, то поднимется, что бы ни взошло, оно будет расти и приносить плоды, и, нравится вам это или нет, вы будете делать то, что задумано провидением.Почему ты не хочешь? Даже ленивому человеку приятно пахать и сеять, приятно видеть, как из ничего рождаются сила и жизнь. Великий

Автор считает своим долгом не только упомянуть имена некоторых людей, откликнувшихся на публикацию журнала «Зарисовки» («Наш современник», 1979, № 10, 12; 1980, № 3; 1981, No. 1, 5, 6, 7), но также приведем здесь, хотя и фрагментарно, их высказывания по интересующей нас теме. Алексей Михайлович Кренделев из Харькова пишет, например, что «главным рычагом, который поднимает человека на его человеческое место, всегда был труд.Так что труд крестьянина в этом отношении был особенно полезным. Ведь крестьянский труд и крестьянская жизнь настолько переплетены, так тесно слиты, что зачастую невозможно их разделить. В такой среде, насыщенной рабочей силой, человеческая гниль не могла прорасти: она была либо изгнана, либо изолирована настолько, что не могла дать вредных побегов. Так произошло самосовершенствование крестьянских масс. Жизнь крестьян русской деревни, особенно дореволюционная, наша литература, в том числе художественная, иногда изображалась примитивно, бессмысленно: мол, крестьяне — тупые, тупые создания.Но в моем представлении — а я помню дореволюционную деревню — жители деревни выглядят совершенно иначе. Конечно, везде глупые люди, у них даже есть дипломы. Но я убежден, что глупые и глупые среди крестьян встречались не чаще, чем в любом другом классе. В крестьянах моего детства было много наивности, а значит, правдивости. У них была житейская мудрость, но мало мирской хитрости, свойственной коммерческому и бюрократическому классу.Я не знаю другого примера, когда бы работа выполнялась с таким усердием и любовью, как работа крестьянина в поле. Пашня, посев, сбор урожая — все превратилось в какой-то священный обряд ».

Тайна рождения и увядания сопровождает крестьянина каждый год с весны до осени. Тяжесть родов — если ты сильный и не больной — тоже приятно, ее просто нет. А сам труд отдельно не существует, в быту не заметен, жизнь едина.И труд, и отдых, и будни, и праздники настолько естественны и поэтому не могут существовать друг без друга, настолько естественны в своей последовательности, что бремя крестьянского труда было скрыто. Кроме того, люди знали, как о себе позаботиться.

Люди всегда относились к ленивым с улыбкой, а иногда и с сочувствием, переходящим в жалость. Но высмеивали и тех, кто не щадил себя и своих близких в труде, считая их несчастными. Не дай бог перетрясти в лесу или пашне! Вы сами будете потрудиться и позволите своей семье путешествовать по миру.(Интересно, что разорванный человек всю жизнь потом с совестью трудился, мол, проглядел, ошибся.)

Если ребенок сломается, он не вырастет. Женщина надорвется — не рожать. Поэтому оплошностей боялись, как пожара. Особенно охраняли детей, а сами старики были опытными.

Тяжесть родов с годами постепенно увеличивалась.

Слишком горячие подростки на работе, которые красовались перед сверстниками, были расстроены, им не давали разогнаться.Слишком ленивых поощряли разными способами. Работа из осознанной потребности быстро превратилась в нечто приятное и естественное, а потому и незамеченное.

Суровость его усугублялась разнообразием, быстрой сменой домашних и полевых дел. В этом произведении не было ничего, не говоря уже о однообразии. Сегодня ноги устали, завтра ноги отдыхают, а руки, грубо говоря, устали. Ничего не было прежним, несмотря на традиции и кажущееся единообразие. Пахари перестали работать, чтобы накормить лошадей, косилки — для того, чтобы сломать метлы или вышибить корь *.

Лето — пик года, время оттока рабочей силы. «Придет осень и все попросит», — говорят летом. Белые северные ночи удваивают световой день в июне, зелень быстро растет как в поле, так и в саду. Если тысячи крестьянских дел кажутся замененными силой нагрузки и по существу, то в основных устает все: и руки, и ноги, и каждая вена. (Конечно, это, в первую очередь, работа с лесом, вспашка и сенокошение.) Вот они действительно и серьезно отдыхают. Работают часа за два-три до завтрака — почему не текущая зарядка? Завтрак обычно сытный, с щами. Режим нужно строго поддерживать, это быстро входит в привычку.

Летом обедают после чая. «Выпей еще чашку, тебе лучше что-нибудь съесть!» — лечит большую женщину — женщину, которая управляет всем домом. После обеда обязателен двухчасовой отдых. Перед ужином еще одно большое рабочее упражнение. День получается очень продуктивным

Корень слова «отдых» связан с дыханием.Отдых означает перевод дыхания, успокаивающий сердце и мышцы. Иными словами, понятие «отдых» для крестьянина относится только к тяжелому физическому, а если не тяжелому, то однообразному, продолжительному труду наподобие женского рукоделия. Покоя в смысле полного бездействия никогда не было, если говорить не о сне, а о состоянии бодрствования. Тысячи людей, лежащих на пляже, с точки зрения даже современного пожилого крестьянина — это ужасающий абсурд. И не потому, что люди лежат голыми, а потому, что они просто лежат, то есть бездельничают.

направляющая. (Даже «бурлаки», то есть в отпуске на работе с подрядчиком, очень редкий хозяин заставлял его работать после обеда.)

Спрятаться — самая тяжелая работа в лесу, и только мужчины, и сильнейшие. , сделал это. Древнейший дохристианский метод подсечно-огневого земледелия отзывается в наши дни лишь далеким эхом: спрятаться — значит выкорчевать выжженную тайгу, подготовить землю для посева льна или ячменя *. Во-первых, они сожгли обширный лесной массив, перед этим вырубив древесину.На второй год они начали прятаться. Убрана огромная головня, выкорчеваны пригоревшие пни. Чтобы вырвать такой пень из земли, нужно обрубить корни, закопать под ним со всех сторон, а затем раскачать рычагом. Вы можете себе представить, как выглядел человек, когда работал день-два в выжженной тайге! Белыми остались только глаза и зубы. Скрытие давно исчезло, оставив в наследство только слово «сжечь». На выгоревших участках в наших краях до сих пор растет много ягод, смородины и малины.

Остановиться — любимое занятие многих, особенно молодежи. Представьте себе первое свежее лето, когда пахнет молодой листвой и хвоей, когда растут сморчки и цветут ландыши. Где-то в лесу на веселом холме собирается большая банда молодых людей, стариков, подростков, женщин, а иногда и серьезных мужчин. У всех есть топорики, у всех есть еда. Осины, тонкие длинные березы, сухие деревья рубят и выдергивают по линии болота.Затем забивают еловые колья крест-накрест и на них укладывают новые леса, также не обрубая с них веток. Получается очень прочный забор с колючкой. Хорошая остановка — это полдела для пастыря. Только не поленитесь, вбейте в барабан и постелите солнечные ванны — проходы и живые изгороди из жердей.

В такой день тоже рождается праздничное настроение. На длительных остановках вы наслушаетесь всего, смешного и страшного, до вечера произойдет столько всего, что прогулка до остановки запомнится на всю жизнь.Отныне молодые люди ждут этого дня, хотя этот день никогда не наступит …

Тот же праздник исходит от силосования, которого раньше не было. В деревне эта работа появилась только вместе с колхозами, артельский характер очень похож на остановку. Главные женские силы косят *** молодую, забрызганную соком траву и складывают ее в кучу. (Важно, чтобы эта трава не засохла и не засохла.) Подростки несут траву на тележках к ямам силосов, быстро прижимают ее.Когда яма наполовину заполнена, в нее заталкивается какая-то почти говорящая кобыла. Именно на нем горделивый трамбовщик шестилетнего возраста целый день разъезжает по яме. Для этого в отцовской книге на его имя написано полдня. Конский помет выбрасывают вилами, кобылу поливают, опуская ведро с водой. Когда ямка засыпана и утрамбована, трава приятно пахнет — внутри уже началось брожение. Его засыпают землей и засыпают глиной — дождитесь зимы.

В жаркую погоду появляются оводы. Ночью здесь траву таскать, ведь ни одной, даже самой добродушной, кобылой на оводах нельзя есть. Ночью к ночным работникам приставает мерзкая — самая маленькая мошка. Ее возят везде. (Мышей еще называют мерзкими, если их много.) Ночью на Севере вывозили навоз из-за множества оводов. Разложили навоз вилами на тележке. Слои отрываются с большим трудом.Водитель загоняет тележку в поле — полосами и через равные промежутки времени тянет ее по люльке кривыми вилками. Утром эти тележки разбрасываются полосами и начинают пахать. После плуга снова ходит либо старик, либо маленький мальчик, засовывая навоз в борозду своим любимцем, чтобы он засыпался землей ****.

Часто случалось, что сенокошение еще не закончилось, а урожай уже был, примерно в то же время, когда сеяли озимые и собирали лен.А погода никогда не даст расслабиться или заскучать. Когда на вилах красивое ароматное сено, а вдали гремит, руки

* Читатель, конечно, вправе дополнить каждый раздел сочинения известными ему примерами, деталями, локальными вариантами, приемами, сюжетами и названиями. .

* * Поскотина — огороженное лесное пастбище.

*** Николай Петрович Борисов пишет, что на его родине (бывший Сольвычетодский район) женщины «… никогда не косили, это мужское занятие.Но с другой стороны, мужчины так и не пожали. Бабов пощадили, они понимали, что нужны кому-то другому. **** Подробнее об этом рассказывается в рассказе Вл. Солоухина «Капля росы».

сами ходят быстрее, грабли только мерцают. А если вот-вот ударит гроза, начинают бить самые неуклюжие бегать по полю, но главное, конечно, то, что штабель сметал раньше соседей, хлеб убирали под крышу и перетирали первым, а лен затирался не последним.

Извечное желание русского крестьянина не быть последним, не стать посмешищем, прекрасно использовалось в первые колхозные годы. И стахановское движение было основано именно на этом свойстве. В одной притче крестьянин, умирая, приказал своему маленькому сыну: «Ешь хлеб и мед, прежде не здоровайся». Только трудолюбивые сыновья признавали настоящий вкус хлеба (как у меда), а те, кто работает в поле, например, косилкой, только кивали, приветствуя проходящих мимо.Так получилось, что первыми встречают всегда любители поспать …

Урожай — это не меньше, чем сенокос, время волнующее. Хлеб — венец всех стремлений — уже ощущается реальным, весомым, и не только в мыслях. Даже небольшая горсть стеблей ржи, срезанных серпом, — хороший кусок хлеба, а сколько таких срезов в снопе?

Зажинкок — один из множества трудовых обрядов — был особенно приятным, радостным и святым. Лучший жнец в семье взял серп и срезал первые пригоршни.

В центре повествования — деревня с ее обычным укладом жизни. Эти поселения мало чем отличаются друг от друга. Здесь преобладают открытые пространства, чем наличие деревьев. На горизонте на телеге появляется крестьянин, с трудом удерживающий поводья из-за безудержного опьянения. Иван Дрынов был навеселе с раннего утра, уже успев распить спиртное по случаю встречи со своим другом Михаилом.

Медведь тоже в веселом настроении, и он довел своего друга до того состояния, что тот почти не помнит обратный путь в деревню.Он поехал в соседнюю деревню исключительно для того, чтобы собрать продукты для местного магазина. Ведь герой пожалел бы, если бы не отметил произошедшее беседой со старым знакомым.

Немного протрезвев и вспомнив дорогу домой, поворачивая телегу в нужном направлении, мой друг снова бросается в глаза. Не отказывая другу, придется снова выпить на трассе.

Совершенно опьяненный, он внезапно приходит к мысли, что неплохо было бы жениться на Мишане за двоюродного брата.На пьяной голове друзья едут к живущей в этом месте родственнице Ивана. В одиночестве она отказывается от их предложения, помещая на ночь нежданных гостей в баню, опасаясь, что в доме будут два изрядно пьяных мужика.

История наглядно изображает привычный образ жизни русской деревни, для жителей которой принято находиться в состоянии алкогольного опьянения и совершенно забывать о возложенных на нее обязанностях.

Рисунок или рисунок Lad

Другие пересказы для дневника читателя

Краткое содержание Господа Головлева Салтыков-Щедрин
В своем произведении автор показал, к чему приводит «головлевщина».Несмотря на трагедию развязки романа, Салтыков-Щедрин дает понять, что в самом заброшенном, лживом и сумасшедшем человеке возможно пробуждение совести.
Краткое содержание Утраченные усилия Шекспира
Король Наваррский Фердинанд со своими тремя соратниками клянется провести три года в непрерывном изучении научных работ. Во имя науки монарх клянется ограничить себя во сне и пище
Краткое содержание Носовских огурцов
Главные герои — парни по имени Павлик и Котка.Однажды ребята собрались на рыбалку, но совершенно неудачно. Мальчику не повезло, они ничего не смогли поймать. Тогда ребята решили вернуться домой.
Краткое содержание Одоевского «Русские ночи»
Девять мистических сюжетов Одоевского, наполненных глубокими философскими размышлениями, описывают проблемы современного общества.
Краткое содержание «Чеховские цветы запоздало»
Княгиня с дочерью упрекают Егорушку. Мать советуется с ним с сыном бывшего крепостного, который стал мужчиной и стал врачом.Сестра сочувствует, полагая, что брат пьет от безответной любви. Устали от лекций

Василий Иванович Белов

Белов В.И.

B 43 Lad: Очерки народной эстетики. — М .: Мол. охранник, 1982. 293 с., ил.

7 стр. 50 к. 50 000 экз.

Издание предназначено для широкого круга читателей.

0000-232 078 (02) -82

BBK 84R7 + 63.5 (2) P2 + 902.7

Фотосъемка проводилась в Вологодской и Архангельской областях в 1979-1981 гг.

Архивные фотографии получены из фондов Вологодского краеведческого музея.

Василий Иванович Белов

Редактор 3. Костюшина Художественный редактор С. Сахарова Технический редактор Э. Брауде Корректоры В.Авдеева, И. Тарасова

Стихия жизни людей необъятна и ни с чем не сравнима. Никто не смог полностью осознать это и, надеюсь, никогда не поймет.

В неутолимой жажде знаний главное свойство науки — ее величие и бессилие. Но для всех народов Земли тяга к красоте не менее традиционна. Как различны эти две человеческие потребности, одинаковые по своей силе и происхождению! И если мир на самом деле состоит только из времени и пространства, тогда, я думаю, наука больше взаимодействует с пространством, а искусство — со временем…

Народная жизнь в ее идеальном, всеобъемлющем смысле и благородстве не знала ни того, ни другого разделения. Мир для человека был единым целым. На протяжении веков они шлифовали и шлифовали образ жизни, сложившийся во времена язычества. Все лишнее, громоздкое, не подходящее по здравому смыслу, национальному характеру, климатическим условиям — все это время устранило. И то, чего не хватало в этом образе жизни, всегда стремлении к совершенству, частично постепенно зарождалось в недрах жизни людей, частично заимствовалось у других народов и быстро утвердилось во всем государстве.

Ритм — одно из условий жизни. И жизнь моих предков, северных русских крестьян, была в основном и особенно ритмичной. Любое нарушение этого ритма — война, эпидемия, неурожай — лихорадило весь народ, все государство.Нарушения ритма семейной жизни (болезнь или преждевременная смерть, пожар, супружеская измена, развод, кража, арест члена семьи, смерть лошади, вербовка) не только разрушали семью, но и сказывались на жизни всего села.

Ритм проявился во всем, образуя цикличность. Можно говорить о дневном цикле и о недельном, для отдельного человека и для всей семьи, о летнем или весеннем цикле, о годовом цикле, наконец, обо всей жизни: от зачатия до могильной травы…

Все было взаимосвязано, и ничто не могло жить отдельно или друг без друга, всему было свое место и время. Ничто не могло существовать вне целого или появиться не по порядку. При этом единство и цельность нисколько не противоречили красоте и разнообразию. Красоту нельзя отделить от полезности, выгоду от красоты. Мастера называли художником, художника — мастером. Другими словами, красота была в растворенном состоянии, а не в кристаллическом состоянии, как сейчас.

Молодые люди всегда несут на своих плечах основную ношу социального развития общества. Современные мальчики и девочки не исключение из этого правила. Но куда бы они ни тратили свою неуемную энергию: на таежной стройке, на полях Нечерноземья или в заводских цехах, везде молодому человеку нужны прежде всего высокие моральные критерии… эти моральные критерии еще ничего не значат.

Но нельзя культивировать в себе эти высокие моральные принципы, не зная, что было до нас. Ведь даже современные технические достижения возникли не на пустом месте, а многие трудовые процессы вообще не изменились по своей сути. Например, при выращивании и переработке льна сохранились все древнейшие производственные и эстетические элементы так называемого льняного цикла. Все только ускоряется и механизируется, а лен надо взъерошивать, прядать и ткать так же, как это делали в новгородских деревнях десять веков назад.

Василий Иванович Белов

Белов В.И.

B 43 Lad: Очерки народной эстетики. — М .: Мол. охранник, 1982. 293 с., ил.

7 стр. 50 к. 50,000 копий

Знаменитый советский писатель рассказывает об эстетике крестьянского труда, фольклоре, быте и художественных промыслах. В книге использованы этнографические материалы из Вологодской, Архангельской, Кировской областей.

Издание предназначено для широкого круга читателей.

0000-232 078 (02) -82

ББК 84R7 + 63.5 (2) P2 + 902,7

Фотосъемка производилась в Вологодской и Архангельской областях в 1979-1981 гг.

Архивные фотографии получены из фондов Вологодского краеведческого музея.

Василий Иванович Белов

Стихия жизни людей безмерна и ни с чем не сравнима. Никто не смог полностью осознать это и, надеюсь, никогда не поймет.

В неутолимой жажде знаний главное свойство науки — ее величие и бессилие. Но для всех народов Земли тяга к красоте не менее традиционна. Как различны эти две человеческие потребности, одинаковые по своей силе и происхождению! И если мир действительно состоит только из времени и пространства, то, я думаю, наука больше взаимодействует с пространством, а искусство — со временем …

Народная жизнь в ее идеальном, всеобъемлющем смысле и благородстве не знала ни того, ни другого разделения.Мир для человека был единым целым. На протяжении веков они шлифовали и шлифовали образ жизни, сложившийся во времена язычества. Все лишнее, громоздкое, не подходящее по здравому смыслу, национальному характеру, климатическим условиям — все это время устранило. И то, чего не хватало в этом образе жизни, всегда стремлении к совершенству, частично постепенно зарождалось в недрах жизни людей, частично заимствовалось у других народов и быстро утвердилось во всем государстве.

Ритм — одно из условий жизни. И жизнь моих предков, северных русских крестьян, была в основном и особенно ритмичной. Любое нарушение этого ритма — война, эпидемия, неурожай — лихорадило весь народ, все государство.Нарушения ритма семейной жизни (болезнь или преждевременная смерть, пожар, супружеская измена, развод, кража, арест члена семьи, смерть лошади, вербовка) не только разрушали семью, но и сказывались на жизни всего села.

Все было взаимосвязано, и ничто не могло жить отдельно и друг без друга, всему было свое место и время. Ничто не могло существовать вне целого или появиться не по порядку. При этом единство и цельность нисколько не противоречили красоте и разнообразию. Красоту нельзя отделить от полезности, выгоду от красоты. Мастера называли художником, художника — мастером. Другими словами, красота была в растворенном состоянии, а не в кристаллическом состоянии, как сейчас.

Молодые люди во все времена несут на своих плечах основную ношу социального развития общества. Современные мальчики и девочки не исключение из этого правила. Но куда бы они ни тратили свою неуемную энергию: на таежной стройке, на полях Нечерноземья или в заводских цехах, везде молодому человеку нужны прежде всего высокие моральные критерии… эти моральные критерии еще ничего не значат.

Но нельзя культивировать в себе эти высокие моральные принципы, не зная, что было до нас. Ведь даже современные технические достижения возникли не на пустом месте, а многие трудовые процессы вообще не изменились по своей сути. Например, при выращивании и переработке льна сохранились все древнейшие производственные и эстетические элементы так называемого льняного цикла. Все только ускоряется и механизируется, а лен надо взъерошивать, прядать и ткать так же, как это делали в новгородских деревнях десять веков назад.

Культура и народная жизнь также имеют глубокую преемственность. Сделать шаг вперед можно только тогда, когда нога от чего-то отталкивается, движение из ничего или из ничего невозможно. Поэтому нашу молодежь так интересует, что волновало дедов и прадедов.

Точно так же и будущие поколения не смогут обойтись без живых, то есть без тебя и меня. Им также понадобится наш моральный и культурный опыт, поскольку нам нужен опыт людей, которые жили до нас сейчас.

Неслучайно книга называется «Парень» и рассказывает о гармонии, а не о разладе крестьянской жизни. Он задуман как сборник очерков о северном быте и народной эстетике. При этом я старался говорить только о том, что знаю, пережил или видел сам, или о близких мне людях, которые знали и пережили. Добрая половина материалов записана со слов моей мамы Анфисы Ивановны Беловой. Было слишком много воспоминаний, как и впечатлений от сегодняшнего дня.Волей-неволей пришлось систематизировать материал, придать рассказу некоторый, хотя и относительный порядок, который диктовал композиционную структуру книги.

Чтобы сэкономить место, мне приходилось постоянно сокращать или даже удалять живой фактический материал, довольствуясь общими размышлениями.

КРУГЛЫЙ ГОД

Весна.

Когда-то в России все начиналось весной. Даже под Новый год. Христианские святые легко уживались с приметами языческого календаря, почти каждый день существовала пословица: 6 марта — Тимофей-весна.

Говорили, что если Евдокия напоит курицу, Никола (22 мая) накормит корову. Знаки, рожденные многовековым опытом общения с природой, всегда определенны и лишены какой-либо мистики. Например, если прилетели ласточки, не раздумывая сеять горох.

Культура и народная жизнь также имеют глубокую преемственность. Сделать шаг вперед можно только тогда, когда нога от чего-то отталкивается, движение из ничего или из ничего невозможно. Поэтому нашу молодежь так интересует, что волновало дедов и прадедов.

Неслучайно книга называется «Парень» и рассказывает о гармонии, а не о разладе крестьянской жизни. Он задуман как сборник очерков о северном быте и народной эстетике. При этом я старался говорить только о том, что знаю, пережил или видел сам, или о близких мне людях, которые знали и пережили.Добрая половина материалов записана со слов моей мамы Анфисы Ивановны Беловой. Было слишком много воспоминаний, как и впечатлений от сегодняшнего дня. Волей-неволей пришлось систематизировать материал, придать рассказу некоторый, хотя и относительный порядок, который диктовал композиционную структуру книги.

КРУГЛЫЙ ГОД

Когда-то весной все в России начиналось.Даже под Новый год. Христианские святые легко уживались с приметами языческого календаря, почти каждый день существовала пословица: 6 марта — Тимофей-весна.

Границы между четырьмя временами года на нашем Севере нечеткие, расплывчатые.Но нигде нет такого контраста, такой разницы между зимой и летом, как у нас.

Весна произошла в году между первой каплей и первым громом.

После Масленицы в крестьянском труде нет перерывов. Одно следует из другого, просто успевают перевернуться. (Может, поэтому и говорят: круглый год.) И все же весной люди приходят к своим особенным радостям. В поле, в лесу, на гумне, в доме, в конюшне — каждый день везде появляется что-то новое, присущее только весне и забытое через год.А как приятно познакомиться со старыми добрыми знакомыми! Подошла легкая талая вода к самой бане — вылезайте из лодки, прогрейте ароматную густую смолу. Заодно отшлифуете сапоги и замените на утомленные зимой тяжелые сапоги. Вот и прибыла первая ладья, изо дня в день ждут скворцов. Никуда не денешься, надо скворечники поставить — детская радость. А потом вдруг в саду растаяла варежка, потерявшаяся зимой … А вы вспомните декабрьскую зимнюю дорогу, по которой я ехал с гребнями для новой бани.

Кстати, не думайте о том, что случилось. Да прошло. До того, как дорога обвалится, необходимо вынести из леса последнее сено и иголки для подстилки скота и дрова для сухих лесов, а по пути собирать ловушки, катаясь на лыжах по большой и малой тропинкам.

А вот конь, фыркает, трусы утром из села. На тележке с полдюжины заголовков, чтоб не таскать потом натодально. (Скоро начнется нерест щуки: необходимо вывести из озера и установить ловушки.) Назад — с тележкой с сеном или хвоей. Пока лошадь отдыхает и хрустит зеленым мешком, пока солнце не растопит синюю корку, успейте зайти в чащу, чтобы присмотреть и пометить деревья для рубки на сок. Еще достаньте сосновую смолу — бабушка попросила приготовить лекарство. Хозяйка намекнула: сломать сосновые ножки для метлы. Это тоже необходимо. Сколько? Это дело минуты, но помнить об этом приятно, да и срубить хижину по дороге тоже нужно: тетерева просто тыкают… Также нарубите березовые ветки на гуманные метелки. И только потом, когда конь идет к дому и буксиры скрипят, можно вздремнуть на телеге или затянуть песню про какого-нибудь ключника Ваньку …

Василий Белов, «Лад»: краткое содержание

Писать о людях и их традициях несложно. Сложно писать так, чтобы захватить дух, чтобы в голове возникали красочные образы, звучали мелодии и дул теплый летний ветерок. Вот сколько людей, называющих себя писателями, умеют писать.Сегодня мы поговорим о выдающемся человеке, наделенном писательским талантом — Василий Белово. Более подробно рассмотрим одну из его книг, которая называется «Лад». Он посвящен изучению повседневной жизни русского народа, а другое его название выглядит так: «Очерки народной эстетики». Белов «Лад» (краткое содержание которого мы рассмотрим в статье) писал под влиянием музы, в этом вы сами убедитесь.

Немного об авторе

Василий Белов — известный русский писатель, один из самых ярких представителей так называемой «деревенской прозы».«Его перо принадлежит к произведениям, которые можно читать не только для удовольствия, но и для пополнения своих знаний об образе жизни и обычаях наших предков. Язык Белова точен, лаконичен и красочен, из-за чего в моей Голова, ведущая к пониманию русской души.За свои работы Белов неоднократно удостаивался государственных наград.Его книги — своеобразный путеводитель по исконно русскому миру, который предстает перед внутренним взором читателя во всем своем величии и разнообразии.

Творчество Василия Белова

Хотите узнать краткое содержание Белова («Парня»)? Для дневника читателей он будет приведен чуть ниже, а теперь поговорим о творчестве писателя, его карьерной жизни. Всего автором написано 12 книг, каждая из которых является своей жемчужиной. Настоящие талантливые писатели никогда не пишут слишком часто. Много работы только для тех, кто работает на публику и хочет получать больше прибыли. Истинные писатели пишут только тогда, когда нельзя молчать, когда они полны вдохновения и не могут больше сдерживать в себе творческий поток.Произведения Белова написаны с 1961 по 2000 год. На сегодняшний день автор больше не занимается писательством, но его произведений достаточно, чтобы окунуться в тайну русской души и оценить талант Белова. Известность к писателю пришла после того, как он начал публиковать в разных журналах свои этнографические очерки. Они были слишком короткими, и читателю хотелось все больше и больше. Это и заставило Василия Белова задуматься о написании первой книги, а потом уже.

Книги

Как уже было сказано, автором написано 12 книг.Его первые очерки были задуманы как незамысловатые очерки северной жизни русских людей. В своих произведениях он рассказывает о жителях Вологодской, Кировской и Архангельской областей России. Откуда он это знает? Всю свою сознательную жизнь он посвятил сбору народных устных песен, пословиц, бывальчин, предметов быта и культуры, изучению архивных данных по бессонным ночам в бессонные ночи.

Многое записал Белов из уст Мамы, которая привила ему любовь ко всему народному.Это была настоящая русская женщина, всю жизнь прожившая по традиции. «Очерки народной эстетики» — очень ценный и интересный источник для изучения этнографии России, который нам всем подарил талантливый писатель Белов. «Парень», краткое содержание которого вы увидите ниже, был написан в 1982 году. Считается, что это одно из лучших произведений писателя.

ЛАД: Часть первая

Книга «Лад» разделена на три части. Каждый из них посвящен обзору материала определенной темы.Мы рассмотрим все части книги, а также по одной главе в каждой из них. Глава выбиралась по степени насыщенности информацией и ее важности в тексте. Главы первой части называются: «Круглый год», «Подмастерья и мастера», «Спутник женской судьбы», «Рукодельницы» и «Остановившиеся моменты». Что по этому поводу говорит Белов («Лад»)? Краткое содержание дневника читателя будет содержать основные моменты из каждой главы.

В разделе «Круглый год» речь идет о четырех временах года.Автор очень подробно описывает каждую из них, рассказывая, какой образ жизни люди вели в разных погодных условиях. В этом случае описываются не сухие факты — материал представлен в виде красочного рассказа. Также в тексте можно найти старинные русские пословицы. Каждый временной период отличается тем, что помимо описания быта можно встретить рассказы о настроении народа, культурных особенностях и традициях празднования великих праздников.

В разделе «Подмастерье и волшебники» мы говорим о разных видах деятельности, которые были распространены в России.Есть описания даже целителей и нищих. Кроме того, автор описывает работу и быт пастухов, сапожников, кузнецов, плотников, торговцев, мельников и т. Д. После прочтения этой главы кажется, что он побывал сразу в нескольких ролях — так точно и ярко Белов описывает каждую профессию. .

В разделе «Рукодельницы» речь идет о таких женских уроках, как шитье, ткачество и вязание. В этой главе автор рассказывает не только о работе, но и о том, чем женщины развлекались во время работы: пением, придумыванием песен, частушек, танцами.Кроме того, Василий Белов подчеркивает, что, несмотря на то, что эта работа считается женской, она требует много сил и усидчивости.

В главе «Остановившиеся мгновения» рассказывается о красоте: резьба по кости, бересте, серебрение и кружево. Большое внимание уделяется мастерству, умению делать свою работу. Такое название глава получила потому, что мастера делали это, когда к ним приходило вдохновение, и время останавливалось, пока шедевр не был создан.

«Спутник женской судьбы»

Эта глава первой части книги не отдельно случайно.Во-первых, он самый объемный, во-вторых, здесь рассмотрены все виды женского труда. Автор описывает произведение с большой точностью, что заставляет читателя действительно окунуться в эпоху. Также большое внимание уделяется мистическому значению женского труда. Например, Лен издавна считалась спутницей женской жизни. Согласно поверьям, когда женщина работает с льном, она сама решает свою судьбу. Занятный факт: девушки в России начали готовить приданое с 7-8 лет.Другими словами, уже в этом возрасте они умели работать с льном.

Очень интересно сочетать факты с народными поверьями. Каждый этап любого рабочего процесса сопровождался определенными обычаями. Дар Белова как раз и заключается в том, чтобы незаметно переходить от актуального к художественному, создавая интересную литературу. Помимо индивидуальных работ, были и общие женские работы. Например, каждый год наступал день усов веревки. Посреди улицы был разбит лес, и каждый мог крутить ручку, чтобы крутить веревки.Это было своеобразное народное развлечение, которое любили и дети, и старики.

«ЛАД»: часть вторая

Вторая часть книги знакомит нас с такими главами: «Миряне», «Круг жизни», «Родное гнездо», «Будни и праздники», «Застольщина», «Одежда», «Игры». Как видно из глав, эта часть книги посвящена повседневной жизни людей. Здесь, в отличие от первого раздела, культуре, традициям и обычаям уделяется не частичное, а полное внимание.

В главе «Миряне» рассказывается об устройстве жизни от края до отдельной семьи. Учитывается быт в провинции, селе, волости, подворье и в семье. «Родное гнездо» приведет к дому сельчанина. Читатель посетит двор, дом, сарай, хижину и сеновал. Раздел «Будни и праздники» посвящен рассказам о том, как люди делили дни недели и насколько каждый из них был особенным. В разделе «Одежда» автор рассказывает об одежде людей для разных случаев, а раздел «Игры» расскажет о народных поблажках, веселье, играх и частушках.

Жизненный круг

Глава «Жизненный круг» расскажет о жизни от младенчества до старости, расскажет о этапах, которые прошел каждый россиянин. Здесь подробно все, что встречает мужчина на своем пути. Жизнь — это определенный ритм, которому нужно подчиняться, чтобы получилась красивая мелодия. Это ритм, которому подчинена вся жизнь русского народа. У всего своя продолжительность, свое время: есть игры на разное время года, праздники, сезонные работы, развлечения и т. Д.Переход от одного возрастного этапа к другому происходил постепенно, резких границ не было, потому что каждый почувствовал прелести своего времени.

Часть третья

Что подготовлено в последней части своей книги Василий Белов? «ЛАД», краткое содержание которой подходит к концу, завершается философской главой. Здесь читатель узнает о праздниках в России. Эта глава расскажет «Долго в жизни». О том, как строились дома, мельницы, храмы и часовни, мы узнаем из главы «Древесный камень».Белов также выделяет религиозные аспекты в части «Ни одним словом». В этом разделе также рассказывается о народной скульптуре, философских вопросах культуры и жизни человека.

«Начало всех начал»

Что раскроет Белов в этой главе? «ЛАД», краткое содержание которого здесь очень емко обсуждается, в этой главе расскажет о народных заговорах, загадках, сказках, частушках, причитаниях и т. Д. Все вышеперечисленное составляет основу жизни народа, на что опирается в трудные времена.Краткое содержание Белова («Лад») лишь в небольшой пропорции передает всю информативность и художественную насыщенность. Поэтому эту самую яркую работу следует читать полностью.

главных героев

Откуда информация, Василий Белов? «Парень», главные герои которого безличны, — описывает простых людей, с которыми он общался на протяжении всей своей жизни. Герои создавались как прототипы известных ему людей: матери, родственников, односельчан и т. Д. Каждый образ лаконичен, но закончен именно потому, что не является вымышленным.Важные черты, которые отличают каждого героя, — это жизнь и трудолюбие, доброта и простодушие.

Дал ключи от старинной чудесной двери — вот что сделал Белов. «ЛАД», краткое изложение которого мы рассмотрели, — очень ценный и значительный труд по этнографии севера России. Прочитать это произведение — значит окунуться в чудесный мир наших предков и получить лечение с их мудростью. «ЛАД» (Василий Белов), отзывы о котором сложно найти в Интернете, не самая читаемая книга.Можно долго думать, в чем причина, но все кроется в нежелании людей знать о своем прошлом.

p >>

Наноразмерное уплотнение хроматина в живых клетках, визуализированное с помощью скорректированного соотношения акцепторов и доноров с поправкой на резонансный перенос энергии Фёрстера между красителями ДНК

Дж Биофотоника. 2019 Dec; 12 (12): e201

, ^1
, ², ^1
, ² и ¹

Симоне Пеличчи

¹ Центр наноскопии и визуализации Nikon, Итальянский институт технологий, Генуя Италия,

² Кафедра физики, Генуэзский университет, Генуя Италия,

Альберто Диаспро

¹ Центр наноскопии и визуализации Nikon, Итальянский институт технологий, Генуя Италия,

² Кафедра физики, Генуэзский университет, Генуя Италия,

Лука Лансано

¹ Центр наноскопии и визуализации Nikon, Итальянский институт технологий, Генуя Италия,

² Кафедра физики, Генуэзский университет, Генуя Италия,

Автор, ответственный за переписку.

Поступило 30.04.2019 г .; Пересмотрено 14 июля 2019 г .; Принято 29 июля 2019 г.

Авторские права © 2019 Авторы. Journal of Biophotonics , опубликованный WILEY ‐ VCH Verlag GmbH & Co. KGaA, Weinheim Это статья в открытом доступе в соответствии с условиями http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/ лицензии, которая разрешает использование и распространение на любом носителе при условии, что оригинальная работа правильно процитирована, использование не является коммерческим и не производится никаких модификаций или адаптаций. Эта статья цитируется в других статьях PMC.

Abstract

Наноразмерная архитектура хроматина в живых клетках может быть изучена с помощью резонансного переноса энергии Фёрстера (FRET) между флуоресцентно меченными компонентами хроматина, такими как гистоны. Более высокая степень наноразмерного уплотнения определяется как более высокий уровень FRET, поскольку это соответствует более высокой степени близости между молекулами донора и акцептора. Однако в такой системе стехиометрия доноров и акцепторов, участвующих в процессе FRET, четко не определена и, в принципе, вариации FRET могут быть вызваны скорее вариациями в соотношении акцептор-донор, чем расстоянием.Здесь, чтобы получить уровень FRET, независимый от соотношения акцептор-донор, мы комбинируем обнаружение FRET с помощью визуализации времени жизни флуоресценции с нормализацией уровня FRET для пиксельной оценки отношения акцептор-донор. Мы используем этот метод для изучения FRET между двумя ДНК-связывающими красителями, окрашивающими ядра живых клеток. Мы показываем, что это скорректированное соотношение акцепторов и доноров FRET-изображение выявляет вариации наноразмерного уплотнения в различных средах хроматина. В качестве приложения мы отслеживаем перестройку хроматина в ответ на лазерно-индуцированное микрооблучение и обнаруживаем, что ДНК быстро разуплотняется в наномасштабе в ответ на индукцию повреждения ДНК.

Ключевые слова: ДНК-красители, FLIM, FRET, наноразмерная организация хроматина, фазоры

Abstract

Флуоресцентная визуализация времени жизни (FLIM), детектирование резонансного переноса энергии Фёрстера (FRET), может быть использовано для измерения наноразмерного уплотнения хроматина в живых клетках. Однако на измеренный уровень FRET может влиять относительное количество акцепторных и донорных молекул. В этой работе представлен новый метод коррекции уровня FRET с учетом вариаций соотношения акцептор-донор.Результаты показывают последовательные пространственные карты наноразмерного уплотнения хроматина в живых клетках.

1. ВВЕДЕНИЕ

Основная функция хроматина — организация и уплотнение длинной геномной ДНК в ограниченном пространстве эукариотического ядра. Наноразмерная архитектура хроматина, а именно организация гистонов в структуры более высокого порядка с разным уровнем уплотнения, играет важную роль в регуляции многих геномных процессов. Напр., Модуляция активности генов, которая включает упаковку генома в транскрипционно активные и неактивные сайты, зависит от морфологической организации хроматина 1, 2.Другой пример — перестройки хроматина, которые происходят во время ответа на повреждение ДНК (DDR), чтобы облегчить доступ к специфическим белкам, участвующим в различных путях репарации ДНК и поддержанию стабильности генома 3, 4, 5. Как такие структуры образуются и ведут себя в различных клеточных процессах остается неясным, и как геномы структурированы на наноуровне, особенно в живых клетках, остается неизвестным.

Исторически разные состояния уплотнения хроматина широко разделялись на гетерохроматин и эухроматин из-за их ассоциации с плотностью их появления при оптической световой микроскопии или электронной микроскопии (EM) 6,7.Гетерохроматин был впервые определен как фракция хроматина, которая остается конденсированной после митоза, в то время как эухроматин был описан как относительно декомпактный хроматин низкой плотности, который включает в себя в основном активные области, богатые генами и регуляторными последовательностями 8. Недавнее развитие так называемых супер- методы разрешающей флуоресцентной микроскопии (SRM), включая микроскопию с истощением стимулированного излучения (STED) 9, микроскопию со структурированным освещением (SIM) 10 и микроскопию локализации, такую как фотоактивированная локализационная микроскопия (PALM) 11 и микроскопия стохастической оптической реконструкции (STORM) 12, 13 , расширили предельную разрешающую способность оптической микроскопии далеко за пределы дифракционного предела, облегчая доступ к организации хроматина на наномасштабе с помощью оптических средств 14, 15, 16, 17, 18, 19.Например, STORM был использован для визуализации организации хроматина более высокого порядка в ядрах отдельных клеток, обнаружив, что и нуклеосомы, и ДНК связаны в гетерогенные нанодомены 16, 20 и что разные эпигенетические состояния имеют разную архитектуру хроматина на нанометровом уровне 15, 21. Примечательно, что PALM был использован для визуализации динамики структур хроматина более высокого порядка в живых клетках 17.

Альтернативная стратегия получения информации о наноразмерной среде хроматина без помощи SRM основана на использовании методов флуоресцентной спектроскопии.Например, такие методы, как восстановление флуоресценции после фотообесцвечивания и флуоресцентная корреляционная спектроскопия (FCS), широко используются для измерения молекулярной диффузии в ядре живых клеток 22. Даже если они ограничены дифракцией, эти методы обнаруживают различия в диффузии зондов нанометрового размера. и может быть использован для косвенного заключения о свойствах наноразмерной архитектуры хроматина 23, 24, 25, 26, 27. FCS в конечном итоге может быть соединен с STED для исследования диффузии на субдифракционных пространственных масштабах 28, 29.Другими примерами являются микроскопия с визуализацией времени жизни флуоресценции (FLIM) и визуализация флуоресцентной анизотропии, которые использовались для отслеживания изменений в локальной среде флуоресцентного зонда и соотнесения их с состоянием конденсации хроматина 30, 31, 32, 33. Но, вероятно, Наиболее ярким примером достижения наномасштаба с помощью флуоресцентной спектроскопии является резонансная передача энергии Фёрстера (FRET), процесс, который может происходить между возбужденным донором и молекулой акцептора, когда два флуорофоров находятся на расстоянии ~ 10 нм 34.Из-за этого свойства FRET часто считают «спектроскопическим нанорулером» и методом выбора для обнаружения белок-белковых взаимодействий в живых клетках 35, 36, 37.

Чувствительность к нанометровым расстояниям делает FRET особенно интересным в контекст высокоупакованной среды хроматина. Количественный подход FRET к анализу наноразмерного уплотнения хроматина был первоначально разработан Llères et al. 38. Этот анализ определяет наноразмерную близость между нуклеосомами, измеряемую посредством обнаружения FRET на основе FLIM между стабильно встроенными гистонами GFP-h3B и mCherry-h3B.Этот анализ FRET использовался для выявления различных доменов и количественного различения различных уровней уплотнения хроматина в наномасштабе в живых клетках HeLa 38 и в живых клетках Caenorhabditis elegans в качестве модельной системы 39. Совсем недавно тот же анализ FRET был применен для измерения хроматина. организации в живых клетках в сочетании с фазорным анализом FLIM 40, 41. Сочетание этой технологии с лазерным микрооблучением позволило идентифицировать DDR-зависимые архитектурные изменения хроматина, которые происходят в ответ на двухцепочечные разрывы ДНК (DSBs) 41.Все эти работы ясно показывают, что FRET может быть мощным инструментом для картирования наноразмерного уплотнения хроматина in vivo.

Тем не менее, есть некоторые ограничения в описанных анализах FRET уплотнения хроматина. Во-первых, использование флуоресцентных белков обычно подразумевает более длительное время для подготовки образцов, необходимое для индукции временной экспрессии белков или создания стабильной клеточной линии. Кроме того, индукция временной или стабильной экспрессии флуоресцентного белка может быть затруднена в некоторых конкретных клеточных линиях, что ограничивает применимость метода.Второе важное соображение заключается в том, что в анализе FRET хроматина эффективное количество доноров и акцепторов, участвующих во взаимодействии FRET, точно не определено. Это сильно отличается от FRET-обнаружения белок-белковых взаимодействий, при котором стехиометрия предполагаемых белковых кластеров часто предсказуема, по крайней мере, до некоторой степени. В частности, в случае флуоресцентных гистонов недавно сообщалось о 20-кратных вариациях относительного уровня акцепторно-донорной экспрессии 42.Высокая вариабельность количества донорных и акцепторных молекул может сама по себе генерировать дополнительные вариации FRET, не обязательно связанные с вариациями среднего донорно-акцепторного расстояния 43, 44, 45, 46, 47. Если это так, измеренный FRET уровень должен быть скорректирован с учетом относительного количества акцепторов-доноров.

Здесь мы представляем новый анализ FRET, который обеспечивает уровень FRET независимо от соотношения акцептор-донор. Анализ основан на FRET между двумя ДНК-связывающими красителями, а именно Hoechst 33342 (донор) и Syto 13 (акцептор), а не между флуоресцентно меченными гистонами.Чтобы обеспечить точный уровень FRET, мы отслеживаем вариации продолжительности жизни донора с помощью FLIM в частотной области и нормализуем эффективность FRET по относительному количеству акцепторов и доноров. Мы показываем, что благодаря этой коррекции, метод обеспечивает последовательные пространственные карты наноразмерного уплотнения хроматина независимо от локальных концентраций донора и акцептора. Мы проверяем этот метод путем количественной оценки различных степеней уплотнения хроматина в живых интерфазных ядрах, различая различные паттерны плотности как в физиологической, так и в гиперосмолярной среде.В качестве приложения мы изучаем изменения в наноразмерной архитектуре хроматина во время DDR, вызванные стимуляцией с помощью лазерного УФ-микрооблучения внутри ядерно-определяемых областей.

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1. Культура клеток и обработки

Клетки HeLa культивировали в колбе в среде Игла, модифицированной Дульбекко (DMEM) с добавлением 10% FBS, 2 мМ L-глутамина и 1% пенициллина / стрептомицина, в увлажненном инкубаторе при 37 ° C с 5% CO. ₂. Впоследствии клетки высевали на 8-луночную камеру Ibidì μ-slide и давали расти в течение ночи.Клетки промывали физиологическим раствором фосфатного буфера (PBS 1 ×, pH 7,4; Thermo Fisher Scientific) и окрашивали 2 мкМ Hoechst 33342 (Thermo Fisher Scientific) (только донорский образец) или 2 мкМ Hoechst 33342 и 2 мкМ Syto 13 (Thermo Fisher Scientific) (донорно-акцепторный образец) и оставили инкубировать в течение 25 минут при 37 ° C. Для измерений FRET клетки наблюдали без какой-либо стадии промывки, то есть оставляя флуорофор разбавленным в DMEM.

Для гиперосмолярного эксперимента клетки HeLa промывали 1 × PBS и индуцировали образование гиперкомпактного хроматина путем инкубации клеток HeLa в гиперосмолярной среде при осмолярности ~ 570 мОсм в течение 25 минут при 37 ° C с 5% CO ₂.После этого клетки окрашивали 2 мкМ Hoechst 33342 (только донор) или 2 мкМ Hoechst 33342 и 2 мкМ Syto 13 (донорно-акцепторный образец) и оставляли инкубироваться в течение 20 минут при 37 ° C в гиперосмолярном растворе. В качестве стандартного протокола 1 мл 20 × PBS (2,8 M NaCl, 54 мМ KCl, 130 мМ Na ₂ HPO ₄, 30 мМ KH ₂ PO ₄ в H ₂ O, pH с регулировкой HCl до 7,4) разбавляли 19 мл стандартной культуральной среды (290 мОсм), чтобы получить осмолярность 570 мОсм 48.

Для мониторинга DDR клетки временно трансфицировали (поли- [ADP-рибоза] полимераза 1) PARP1-хромо-TagRFP (ChromoTek) в соответствии с протоколом QIAGEN Effectene и визуализировали через 24 часа после трансфекции.

2.2. Микроскопия FLIM-FRET

Данные FLIM-FRET были получены с помощью конфокального и многофотонного микроскопа Nikon A1R MP, подключенного к блоку FastFLIM с частотной областью ISS A320 для сбора данных о сроке службы. Для всех измерений использовался объектив Nikon Plan Apo VC 100x Oil DIC N2, NA 1,45.Донорный флуорофор возбуждали на длине волны 405 нм. Эта длина волны вызывала также прямое возбуждение акцептора. Сигнал флуоресценции разделялся между двумя гибридными фотодетекторами со следующими полосовыми фильтрами излучения перед каждым: 450/50 (Hoechst 33342) и 585/40 (Syto 13) соответственно. Мы одновременно получили данные об интенсивности и сроке службы путем сканирования импульсным лазерным лучом 80 МГц (405 нм, PDL 800 ‐ D, PicoQuant). Размер кадра был установлен 512 × 512 пикселей с размером пикселя 0,05 мкм.Время ожидания пикселя сканирования было установлено на уровне 12,1 мкс / пиксель. Каждое изображение FLIM было получено путем интегрирования сигнала из 20 кадров, что соответствует времени получения 1 минута.

Сбор данных FLIM осуществлялся с помощью программного обеспечения ISS VistaVision. В частотной области FLIM время жизни определяется из фазовой задержки и демодуляции флуоресцентного излучения по отношению к модулированному сигналу возбуждения 49. Для каждого пикселя система FLIM записывает значение фазы ( φ ) и модуляции ( M ) на нескольких частотах по отношению к сигналу возбуждения.Все данные анализировались на частоте 80 МГц. Необработанные данные FLIM были визуализированы на векторном графике, где g = M cos ( φ ) и s = M sin ( φ ) 40. Калибровка системы проводилась путем измерения флуоресцеина в 1 M NaOH (pH 9,0), который имеет известное экспоненциальное время жизни 4,1 нс. Перед каждым экспериментом мы калибровали донорный канал, используя раствор Alexa Fluor 405 (Thermo Fisher), который возбуждается на той же длине волны возбуждения, что и донор (Hoechst 33342).Мы определили, что Alexa Fluor 405 в ДМСО имеет экспоненциальный срок службы 3,5 нс (рисунок S4, вспомогательная информация). Для каждого измерения были экспортированы следующие четыре изображения для дальнейшей обработки на ImageJ 50: интенсивность в донорном канале I ₁ ( x , y ), интенсивность в акцепторном канале I ₂ ( x , y ), координата вектора g ( x , y ) в донорском канале и координаты вектора s ( x , y ) в доноре канал.

2.3. Лазерное микрооблучение

Для индукции повреждения ДНК лазерным микрооблучением мы использовали лазерный луч 405 нм конфокального и многофотонного микроскопа Nikon A1R MP. Мощность лазера была установлена на 80%, и лазерный луч был сфокусирован на выбранной интересующей области (ROI) ядра (15 мкм × 6 мкм) в течение общего времени микрооблучения 40 секунд. Для мониторинга реакции PARP-1 на индукцию повреждения ДНК был записан видеоролик с интервальной съемкой длительностью 65 секунд (256 × 256 пикселей, 9.5 мкс / пиксель, 634 кадра). Микроскопию FLIM-FRET выполняли параллельно с использованием описанных выше настроек микроскопа и сбора данных. Сборы FLIM-FRET регистрировались сразу после лазерного микрооблучения.

Для клеток, проанализированных с помощью иммуноокрашивания, индукцию повреждения ДНК устанавливали с мощностью лазера на уровне 100% для выбранной области интереса размером 3 мкм × 3 мкм для общего времени микрооблучения 20 секунд. Микрооблученные клетки фиксировали в течение ~ 5 минут после микрооблучения.

2.4. Фиксация клеток и иммуноокрашивание

Клетки фиксировали 4% формальдегидом в PBS 1 × в течение 15 минут и несколько раз промывали 1 × PBS. После фиксации клетки HeLa были пермеабилизированы и инкубированы в блокирующем буферном растворе (5% вес / об альбумин бычьей сыворотки, 0,1% (об / об) Тритон X-100 в PBS) в течение 1 часа при комнатной температуре.

Для обнаружения PARP-1 клетки инкубировали в течение ночи при 4 ° C с первичным антителом мыши против PARP1 (sc-8007; Santa Cruz Biotechnology) в блокирующем буфере (разведение 1/50) с последующими несколькими этапами отмывки.Затем клетки инкубировали с антимышиным вторичным антителом, конъюгированным с Alexa 488 (A28175; Thermo Fisher Scientific), в PBS (разведение 1/600) в течение 1 часа при комнатной температуре и промывали PBS.

Клетки окрашивали йодидом TO-PRO-3 (T3605; Thermo Fisher Scientific) (разведение 1: 2000) в PBS и оставляли инкубироваться на 25 минут при комнатной температуре, а затем несколько раз промывали ультрачистой водой.

Конфокальные изображения иммуноокрашенных образцов получали на микроскопе Leica TCS SP5 с использованием HCX PL APO × 100 100/1.Объектив с масляной иммерсией 40 / 0,70 (Leica Microsystems, Мангейм, Германия). Источником возбуждения служил белый лазер с желаемой длиной волны, начиная с 470 нм. Alexa 488 возбуждали на длине волны 488 нм, а его флуоресцентное излучение детектировали на длине волны от 500 до 560 нм. Возбуждение TO-PRO-3 иодидом осуществляли на длине волны 633 нм, а его излучение собиралось в полосе от 645 до 710 нм.

2,5. Обработка изображений и вычисление FRET

Все следующие операции с изображениями были реализованы в ImageJ.

Для каждого измерения изображение времени жизни фазы τ ( x, y ) было получено из векторных изображений g ( x, y ) и s ( x, y ) с использованием формула:

, где f = 80 МГц. Для донорно-акцепторных образцов изображение эффективности FRET E ( x , y ) было получено как:

, где τ _DA ( x , y ) — изображение времени жизни фазы донорно-акцепторного образца и τ _D представляет собой фазовое время жизни непогашенного донора.Время жизни непогашенного донора определяли в каждом эксперименте из изображений времени жизни только донорского образца, приготовленного в тех же условиях, что и донорно-акцепторный образец. Значение τ _D был установлен как среднее значение, полученное по меньшей мере из трех разных ячеек.

Уровень FRET A ( x, y ) был затем получен как:

Для донорно-акцепторных образцов изображение отношения акцептор-донор определялось по изображениям интенсивности в донорном и акцепторном каналах.Во-первых, вклад донорного просачивания был удален из акцепторного канала:

IAx, y = I2x, y − kBTI1x, y,

(4)

, где константа k _BT был определен на основе только донорской пробы как среднее значение I ₂ ( x , y ) / I ₁ ( x , y ) как минимум из трех разных ячеек. Скорректированная интенсивность I _A ( x , y ) представляет собой всю эмиссию флуоресценции, обнаруженную Syto 13, включая флуоресценцию, возникающую в результате прямого возбуждения Syto 13 на 405 нм и сигнал FRET.Предположим, что вклад сигнала FRET в I _A ( x , y ) незначительно по сравнению с вкладом из-за прямого возбуждения. На интенсивность в донорном канале не влияли спектральные перекрестные помехи, поэтому мы установили I _D ( x , y ) = I ₁ ( x , y ) .Для донорского канала I _D ( x , y ) = β _D N _D ( x , y ) ( τ _DA ( x , y ) / τ _D), где β _D — яркость (количество импульсов на молекулу за время интеграции) непогашенного донора в донорном канале, N _D ( x , y ) — количество молекул-доноров в данном пикселе и коэффициент τ _DA/ τ _D учитывает уменьшение квантового выхода (QY) донора из-за FRET 51.Для приемного канала I _A ( x , y ) = β _A N _A ( x , y ), где β _A — яркость акцептора в акцепторном канале и N _A ( x , y ) — количество молекул акцептора в данном пикселе. Мы рассчитали изображение экспериментального отношения акцептор-донор как:

nAD * x, y = IAx, yIDx, yτDAx, yτD.

(5)

Величина n * ( x , y ) пропорциональна абсолютному значению отношения акцептор-донор N _A ( x , y ) / N _D ( x , y ):

n * x, y = βAβDNAx, yNDx, y.

(6)

Значение n * ( x , y ) было использовано для корректировки измеренного уровня FRET A ( x , y ) для вариантов акцептор-донор передаточное отношение:

Кол-во А ₀ * ( x , y ) пропорционально уровню FRET A ₀ ( x , y ), что соответствует соотношению акцептор-донор 1:

A0 * x, y = βDβAAx, yNAx, y / NDx, y = βDβAA0x, y.

(8)

Оценить значение константы β _A/ β _D, мы сначала определили соотношение яркости флуоресцеина в акцепторном канале ( β ₂) и яркость Alexa 405 в донорском канале ( β ₁). Это соотношение было определено путем измерения интенсивности флуоресценции I ₁ и I ₂ из различных растворов с известной концентрацией C ₁ и C ₂ двух красителей при одинаковом уровне мощности возбуждения 405 нм.

Затем мы оценили значение β _A/ β _D как:

βAβD = β2β1εAQYAηAε1QY1η1εDQYDηDε2QY2η2,

(10)

, где значения QY и коэффициента экстинкции ( S 905 нм, указанные в литературе производителей и данные по 405 нм для каждого производителя) были оценены для 405 красок. ). Параметр η представляет собой процент спектра излучения каждого флуорофора, который улавливается его конкретным полосовым фильтром.

2.6. Смоделированные данные

Смоделированные данные были сгенерированы в Matlab (MathWorks). Мы смоделировали смесь доноров НА, подвергнутых FRET, с переменным номером N _А приемников. Время жизни незажитого донора было установлено равным τ ₀ = 2,7 нс. Эффективность FRET донора, взаимодействующего с одиночным акцептором, была установлена равной E ₀. Эффективность FRET донора, взаимодействующего с целым числом n _{Для приемников} было установлено значение E _n, где E _n = 1 / (1 + 1/ A _n), A _n = n _A A ₀ и A ₀ = E ₀ / (1 — E ₀) 43.Для любого заданного значения N _A/ N _D смесь задавалась следующим образом: для n _A — 1 < N _A/ N _D < n _A, значение КПД E _n отнесено к доле доноров, равной N _A/ N _D — n _A, тогда как значение КПД E _n — 1 был присвоен всем остальным донорам.Затем временной спад, соответствующий этой смеси, был проанализирован в частотной области с помощью алгоритма быстрого преобразования Фурье. Значение фазы φ , соответствующее на частоте f = 80 МГц, использовалось для расчета значения времени жизни фазы τφ = tan φ / (2 πf ). Наконец, КПД E был рассчитан как E = 1 — τφ / τ 0, а значение A было рассчитано как A = E / (1 — E ).

3. РЕЗУЛЬТАТЫ

3.1. Анализ FRET с поправкой на вариации в соотношении акцептор-донор

Для измерения уплотнения хроматина на наноразмерном уровне в живых клетках мы исследовали возможность использования FRET, возникающего между красителями, связывающими нуклеиновые кислоты, с перекрывающимися спектрами излучения / возбуждения. Пример такой пары FRET представлен Hoechst 33342 и Syto 13 (Рисунок S1). Hoechst 33342 представляет собой бисбензимидазольный краситель, связывающийся с малой бороздкой ДНК с предпочтительной специфичностью АТ-последовательности.Syto 13 маркирует ДНК как в ядре, так и в митохондриях, а также РНК в цитоплазме и ядрышках 52. Мы предполагаем, что более высокое наноразмерное уплотнение хроматина соответствует, в среднем, более короткому расстоянию между флуорофорами и, таким образом, увеличению эффективности FRET (рисунок) . Это основание для использования FRET в качестве количественной меры наноразмерного уплотнения хроматина. С другой стороны, увеличение количества акцепторов-доноров может само по себе приводить к увеличению эффективности FRET, не обязательно связанного с наноразмерным уровнем уплотнения хроматина (рисунок).По этой причине важно извлечь значение эффективности FRET, связанное только со средним расстоянием между флуорофорами, но не с их относительной численностью.

Схематическое изображение анализа резонансного переноса энергии Фёрстера (FRET) для наноразмерного уплотнения хроматина. Донорные (голубые) и акцепторные (желтые) молекулы связаны с ядерным хроматином (серый). Вариации измеренного уровня FRET могут быть связаны как с изменениями плотности хроматина (черная сплошная стрелка), так и / или с изменениями относительного содержания акцепторов и доноров (красная пунктирная стрелка)

С этой целью мы разработали протокол для измерения FRET в каждом пикселе изображения и нормализация уровня FRET к относительному содержанию акцепторов и доноров (рисунок).Мы измерили FRET между Hoechst 33342 и Syto 13, отслеживая уменьшение времени жизни донора с помощью FLIM в частотной области. Когда происходит FRET, время жизни донора (Hoechst 33342) сокращается из-за передачи энергии акцепторному флуорофору (Syto 13). Одним из преимуществ FLIM является то, что он обеспечивает значение эффективности FRET без поправок (например, перекрестных помех между каналами, оценка относительной концентрации флуорофоров), необходимых для методов, основанных на интенсивности 53. Уменьшение количества донора, вызванное FRET. Срок службы был обнаружен с помощью FLIM в частотной области как уменьшение значения фазы, измеренной на заданной частоте (рисунок A).На векторном графике на фиг. B клетка, окрашенная только Hoechst 33342 (фиг. C), сравнивается с двумя клетками, окрашенными как Hoechst 33342, так и Syto 13 (фиг. D, E). Более низкое значение фазы, измеренное в образцах донор-акцептор по сравнению с образцом только донора, указывает на наличие FRET между Hoechst 33342 и Syto 13 (Рисунок B-E). Кроме того, мы наблюдали, что более высокое содержание акцептора-донора соответствовало более сильному уменьшению времени жизни донора (Рисунок D, E). Например, на репрезентативных изображениях, показанных на рисунке 2, средний срок службы Hoechst 33342 изменился с τ . _D ~ 2.7 нс (только образец донора) до τ _DA ~ 1.9 нс (рисунок 2D) и τ _DA ~ 1,7 нс (рисунок E) соответственно, из-за FRET с Syto 13, что приводит к различным уровням эффективности FRET E , определяемому как E = 1 — τ _DA/ τ _D (Рисунок H, I).

Анализ FRET с поправкой на соотношение акцептор-донор. (A) Схематическое изображение частотного анализа данных FLIM-FRET (визуализация времени жизни флуоресценции).Вызванное FRET уменьшение срока службы донора с τD до τDA детектируется как уменьшение значения фазы (с φD до φDA ), измеренного на данной частоте. (B) Фазорный анализ FLIM-FRET Hoechst 33342 и Syto 13 в живых клетках HeLa. Три кластера соответствуют репрезентативным образцам, указанным в C-E. (C) Репрезентативное изображение клетки, помеченной только донором. Показаны интенсивность в донорском канале и время жизни донора.(D, E) Репрезентативные изображения двух клеток в донорно-акцепторном образце с разными уровнями соотношения акцептор-донор. Показаны интенсивность в донорном канале, интенсивность в акцепторном канале и время жизни донора. Указано среднее значение акцепторно-донорного отношения n *. (F) График эффективности FRET E и уровня FRET A в зависимости от соотношения акцептор-донор для смоделированных данных. Цифры указывают на смоделированное расстояние акцептор-донор, выраженное в радиусе Ферстера ( R ₀) шт.Сплошные линии представляют собой линейные аппроксимации данных через начало координат. (G) Экспериментальные значения E и A по сравнению с n *. Каждая точка представляет собой среднее значение ± стандартное отклонение E (синие треугольники) и A (синие квадраты) для каждой отдельной ячейки выборочной совокупности. Сплошные линии представляют собой линейные аппроксимации данных через начало координат. (H, I) Уровень FRET до и после коррекции для образцов, указанных в (D, E). Показаны карта эффективности FRET E , карта уровня FRET A и карта скорректированного уровня FRET A ₀ *.(J, K) Гистограммы значений пикселей уровня FRET до (параметр A , серый штрих) и после (параметр A ₀ *, сплошной синий) коррекция. Вертикальными пунктирными линиями отмечены положения пиков гистограмм FRET. Масштабная линейка: 5 мкм

Для более количественного исследования зависимости уровня FRET от относительного содержания акцепторов и доноров удобно использовать величину A = E / (1- E ) 43.Смоделированные данные действительно показали, что уровень FRET A приблизительно линейно зависит от относительного количества акцепторов и доноров N _A/ N _D, тогда как эффективность FRET E — нет (Рисунок F). Уклон A против N _A/ N График _D — величина, зависящая только от расстояния акцептор-донор (Рисунок F и Рисунок S2).Моделирование также показало, что очень разные комбинации значений параметров E ₀ (а именно эффективность донора, связанного с одним акцептором) и N _A/ N _D может генерировать идентичные значения уровня FRET A. Другими словами, чтобы определить абсолютное значение E ₀ из измеренного уровня FRET A необходимо знать абсолютное значение отношения N _A/ N _Д.

По нашим экспериментальным данным измерить отношение было непросто N _A/ N _Д. Таким образом, мы количественно определили относительную распространенность акцепторов и доноров величиной, пропорциональной относительной концентрации двух флуорофоров, n * = ( I _A/ I _D) ( τ _DA/ τ _D) N _A/ N _D (см. Раздел 2), где I _A и I _D — интенсивность в донорном и акцепторном каналах соответственно, а фактор τ _DA/ τ _D учитывает уменьшение QY донора за счет FRET 51.Экспериментальная зависимость эффективности FRET E и уровня FRET A от экспериментального отношения акцептор-донор n * представлена на рисунке G для всех различных клеток, измеренных в одном эксперименте. Эти графики показывают, что наблюдаемые вариации FRET между Hoechst 33342 и Syto 13 связаны с вариациями относительного соотношения акцептор-донор, встречающимися в природе на данном образце. Эти вариации, вероятно, были связаны с внутренней вариабельностью интернализации красителей в хроматин, даже если клетки были окрашены одинаковым количеством двух красителей.Наконец, мы использовали величину n *, чтобы нормализовать уровень FRET A к относительному соотношению акцепторов и доноров и получить скорректированное значение уровня FRET A ₀ * = A / n * в каждом пикселе изображения (Рисунок H, I). В принципе исправленный уровень FRET A ₀ * связано только со средним расстоянием между донорами и акцепторами, но не с их относительной численностью.

3.2. Области с разной плотностью хроматина демонстрируют разную компакцию хроматина в наномасштабе

Чтобы проверить наш метод, мы сначала сравнили значения FRET, измеренные на участках хроматина с разной плотностью ДНК.На каждой клетке были идентифицированы области с низкой и высокой плотностью на основе интенсивности флуоресценции Hoechst 33342 (Рисунок A, B). Области, соответствующие более высокому сигналу Hoechst 33342, обычно включали периферический и перинуклеолярный гетерохроматин из-за более высокой концентрации ДНК в этих областях, а также из-за преимущественного сродства красителя к AT-богатым последовательностям 54. Средний уровень FRET A, измеренный в о двух областях для каждой клетки сообщалось как о функции относительного содержания акцепторов к донорам n * (Рисунок C, E).Различный наклон двух наборов данных показал, что области с высоким сигналом Hoechst (области гетерохроматина) имеют более высокий уровень наноразмерной компактации по сравнению с областями с низким сигналом Hoechst (области эухроматина). Аналогично карты исправлены FRET level A ₀ * (рис. D, F) показали, что наноразмерное уплотнение было выше у гетерохроматина ( A ₀ * = 1,09 ± 0,025, среднее ± SEM, n = 10 клеток), чем в эухроматине ( A ₀ * = 0.90 ± 0,025, n = 10 ячеек) ( P <0,001, парный тест t , n = 10 ячеек).

Скорректированный анализ FRET показывает различные уровни уплотнения хроматина в наномасштабе. (A-F) FRET-анализ областей с различной плотностью хроматина в ядрах живых клеток HeLa. (A) Изображения интенсивности донорного и акцепторного каналов. (B) Маски, созданные из сигнала интенсивности Hoechst, чтобы различать области с высокой плотностью (гетерохроматин) и с низкой плотностью (эухроматин).(C) Цветные карты FRET уровня A в регионах с низкой (слева) и высокой плотностью (справа). (D) Цветные карты исправленного уровня FRET A ₀ *. (E) График зависимости A от относительного содержания акцепторов к донорам n *. Каждая экспериментальная точка представляет собой среднее значение ± стандартное отклонение A , вычисленное в области высокой (серые квадраты) или низкой (красные ромбы) плотности. Сплошные линии представляют собой линейные аппроксимации данных через начало координат (высокая плотность: наклон = 1,07; низкая плотность: наклон = 0,81).(F) Сравнение среднего значения A ₀ * гетерохроматина (высокая плотность) и эухроматина (низкая плотность). Данные представляют собой среднее значение ± стандартное отклонение ( n = 10 ячеек) средних значений A ₀ * рассчитано по каждой ячейке. (G-J) FRET-анализ гиперосмотических ядер. (G, H) Типичные изображения ядра контрольной клетки и ядра после гиперосмолярной обработки. Показаны интенсивность в донорном и акцепторном каналах, уровень FRET A и скорректированный уровень FRET A ₀ *. А ₀ * цветные карты показывают и более высокое наноразмерное уплотнение в гиперосмотическом ядре по сравнению с контролем. (i) График A в зависимости от относительного содержания акцепторов к донорам n *. Каждая экспериментальная точка представляет собой среднее значение ± стандартное отклонение A , рассчитанное для контрольных (серые ромбы) или гиперосмотических (синие квадраты) ядер. Сплошные линии представляют собой линейные аппроксимации данных через начало координат (контроль: наклон = 0,92; гиперосмотический: наклон = 1,52) (J) Сравнение среднего значения A ₀ * контрольных и гиперосмотических ядер.Данные представляют собой среднее значение ± стандартное отклонение (контроль: n = 8 клеток; гиперосмотический: n = 11 клеток) средних значений A ₀ * рассчитано по каждой ячейке. Шкала: 5 мкм

Чтобы проверить чувствительность к изменениям архитектуры хроматина высшего порядка, мы применили подход, использованный Albiez et al. 48. Он заключается в модуляции уплотнения хроматина в живых клетках от нормально конденсированного хроматина до гиперконденсированного хроматина путем увеличения осмолярности культуральной среды с 290 мОсм (стандартная осмолярность нормальной ростовой среды) до 570 мОсм.Эта процедура привела к увеличению конденсации хроматина (Рисунок G, H). Клетки HeLa показали плотные участки хроматина по всему ядру с последующим уменьшением размера ядра. Сообщается, что средний уровень FRET A является функцией относительного содержания акцепторов к донорам n * (Рисунок I). Большее значение наклона указывает на то, что обработка гиперосмолярным раствором вызвала увеличение наноразмерного уплотнения, измеренного с помощью FRET. Аналогично карты исправлены FRET level A ₀ * показал, что уплотнение в наномасштабе было выше ( P <.001, t тест) в гиперконденсированном хроматине ( A ₀ * = 1,57 ± 0,025, среднее ± SEM, n = 11 клеток) по сравнению с контрольными ядрами ( A ₀ * = 0,92 ± 0,025, среднее ± SEM, n = 8 клеток) (Рисунок J).

3.3. Хроматин разуплотняется на наноуровне в ответ на повреждение ДНК

Реорганизация хроматина во время DDR — сложный процесс. В частности, ранее сообщалось, что после локальной индукции повреждения ДНК хроматин претерпевает быстрое временное (<5 минут) расширение, за которым следует более медленная фаза уплотнения 55,56.Быстрая деконденсация хроматина на ранней стадии DDR является необходимым шагом, чтобы позволить механизму репарации ДНК получить доступ к поврежденной области, тем самым облегчая репарацию повреждений ДНК 4. Здесь, в качестве применения нашего метода FRET, мы проверили, был ли хроматин локально разуплотняется на наноуровне в ответ на индукцию повреждения ДНК.

С этой целью мы генерировали повреждение ДНК в выбранной субрегионе ядер с помощью 405 нм-лазерного микрооблучения и сенсибилизации с помощью Hoechst 33342, как сообщалось ранее 57.Чтобы убедиться, что микрооблучение с помощью лазера с длиной волны 405 нм вызывает локальное повреждение ДНК в ядрах клеток HeLa, окрашенных Hoechst 33342, используемым в качестве сенсибилизатора, мы отслеживали экспрессию маркера DDR PARP-1, специфического белка, который быстро накапливается в участках генома, где один- имели место разрывы цепей или DSB 3, 58. Экспрессию PARP-1 контролировали в клетках, фиксированных сразу после микрооблучения, и в живых клетках (рисунок).

Скорректированный анализ FRET показывает разложение хроматина в наномасштабе в ответ на повреждение ДНК.(A) Повреждение ДНК индуцируется УФ-микрооблучением в интересующей области (ROI) в ядре живых клеток HeLa, меченных Hoechst. (B, C) Конфокальные изображения, показывающие окрашивание ДНК с помощью TO-PRO-3 и иммунодетекцию PARP-1 в той же клетке HeLa, фиксированной в 4% PFA сразу после микрооблучения (B) и в контрольной клетке (C). Профиль линии показывает распределение интенсивности сигналов TO ‐ PRO ‐ 3 (красный) и PARP ‐ 1 (зеленый) в облучаемой области. (D) Типичные изображения ядра живой клетки HeLa, окрашенного Hoechst и экспрессирующего PARP1-chromobody-TagRFP.После локального УФ-микрооблучения в облучаемой области происходит накопление PARP-1. (E-H) FRET-анализ живых клеток HeLa, окрашенных Hoechst и Syto 13 после местного УФ-микрооблучения. (E) изображения интенсивности донорного и акцепторного каналов. (F) Цветные карты скорректированного уровня FRET ( A ₀ *) в выбранных масках, представляющих область интереса, облученную УФ-излучением, и область за пределами области. (G) График зависимости A от относительного содержания акцепторов к донорам n *. Каждая экспериментальная точка представляет собой среднее значение ± стандартное отклонение A , вычисленное в области интереса, облученной УФ-излучением (синие кружки) или вне области интереса (красные квадраты) внутри ядер.Сплошные линии представляют собой линейные аппроксимации данных через начало координат (ROI для УФ-излучения: наклон = 0,82; вне области ROI: наклон = 1,1) (H) Сравнение среднего значения A ₀ * УФ-облученных и внешних областей интереса внутри ядер. Данные представляют собой среднее ± стандартное отклонение ( n = 6 ячеек) средних значений A ₀ * рассчитано по каждой ячейке. Масштабная линейка: 5 мкм

В фиксированных клетках мы наблюдали накопление PARP-1 в облученной области (рисунок A-C, рисунок S5). Постфиксационная маркировка ДНК красителем TO-PRO-3 59, как и ожидалось, выявила локальную деконденсацию ДНК в месте облучения (Рисунок B).В живых клетках мы также наблюдали фотообесцвечивание Hoechst 33342 и накопление PARP-1 в облученной области (Рисунок D). Накопление PARP-1 было более заметным по направлению к центру ядра (Рисунок D и Рисунок S3). Одно из возможных объяснений этого эффекта заключается в том, что больше повреждений ДНК генерируется по направлению к центру ядра, где толщина больше. В этом отношении стоит отметить, что в режиме однофотонного возбуждения поглощение света и последующая генерация повреждений ДНК не ограничиваются фокальной плоскостью, а распространяются на весь экспонированный объем 60.

Затем мы измерили уровень FRET на клетках HeLa, окрашенных Hoechst 33342 и Syto 13, сразу после того, как область ядра подверглась лазерному микрооблучению (Рисунок E-H и Рисунок S6). Измерения FRET были выполнены сразу после облучения (в течение нескольких минут), чтобы сосредоточиться только на наномасштабной перестройке хроматина, происходящей во время первой фазы расширения. Карты исправленного уровня FRET A ₀ * показал, что наноразмерное уплотнение было ниже в открытой области ядра ( A ₀ * = 0.87 ± 0,05, среднее ± SEM, n = 6 клеток) по сравнению с необлученной областью ( A ₀ * = 1,14 ± 0,05, среднее ± SEM, n = 6 клеток) (Рисунок F-H, P <0,005, парный тест t ). Более низкое значение скорректированного FRET указывает на то, что хроматин локально декомпактирован на наноуровне в ответ на индукцию повреждения ДНК, вероятно, для обеспечения доступа к механизму репарации ДНК, необходимому для репарации повреждений ДНК, в соответствии с описанными моделями хроматина. организация 4.

4. ОБСУЖДЕНИЕ

В этой работе мы показали, что пара ДНК-связывающих красителей, обычно используемых в качестве ядерных контрастных красителей, может использоваться в качестве системы FRET для картирования уплотнения хроматина в ядрах живых клеток. Мы определили успешную стратегию, позволяющую отличать вариации FRET, связанные с расстоянием от донора до акцептора, от вариаций FRET, связанных с количеством от акцептора к донору. Эта стратегия основана на сочетании измерения времени жизни и интенсивности флуоресценции.Уровень FRET количественно оценивается по уменьшению времени жизни донора, которое обнаруживается с помощью FLIM, а затем нормализуется к относительному соотношению акцептор-донор, которое оценивается по значениям интенсивности в акцепторном и донорном каналах. Чтобы проверить эту стратегию, мы измерили уровень FRET в областях с высокой и низкой плотностью ДНК, что определяется относительным количеством сигнала Hoechst, и обнаружили, что области гетерохроматина имеют более высокий уровень FRET по сравнению с областями эухроматина. Мы также показали, что ядра клеток, обработанных гиперосмолярной средой, имели более высокий уровень FRET по сравнению с контрольными ядрами.Наконец, мы применили наш метод FRET для мониторинга реорганизации хроматина в наномасштабе во время реакции на повреждение ДНК: мы обнаружили, что хроматин локально декомпактируется в наномасштабе в ответ на индукцию повреждения ДНК, вероятно, для обеспечения доступа к молекулярному механизму, необходимому для ДНК. ремонт повреждений.

Эти результаты показывают, что, благодаря этапу нормализации, представленный анализ FRET может использоваться для исследования организации хроматина в живых клетках и является действительной альтернативой ранее описанным системам FRET на основе гистонов.Главный недостаток по сравнению с анализом FRET на основе гистонов состоит в том, что непросто интерпретировать наши данные с точки зрения организации хроматина-ДНК более высокого порядка. В самом деле, в то время как межнуклеосомное расстояние является параметром, непосредственно связанным с организацией хроматина высшего порядка, здесь точное пространственное распределение двух флуорофоров на макромолекуле ДНК определяется плохо. Мы можем только сделать несколько простых предположений о распределении двух связывающих красителей на ДНК и попытаться оценить их среднее расстояние по измеренным значениям эффективности FRET.

FRET — это процесс, чувствительный к нанометровым расстояниям между флуорофорами. Однако средняя эффективность FRET, измеренная для данного пикселя, зависит также от того, сколько доноров и акцепторов задействовано во взаимодействии FRET. Например, при межбелковых взаимодействиях данные FRET обычно описываются в терминах смеси двух видов: фракции непотушенных доноров и части доноров, подвергнутых FRET с акцептором 35. Здесь мы не можем сделать никаких предварительных гипотез. от стехиометрии взаимодействия FRET.Чтобы преобразовать измеренные значения эффективности FRET в нанометровые значения, необходимо знать абсолютное значение отношения N _A/ N _Д. Связь между N _A/ N _D и наш экспериментальный параметр n * равен N _A/ N _D = ( β _D/ β _A) × n *, где β _A и β _D — яркость акцептора и незагашенного донора в акцепторном и донорном каналах соответственно.Самый простой способ оценить отношение β _D / β _A будет использовать образец со стехиометрией 1: 1 двух флуорофоров 61. Это особенно сложно в нашей системе, поскольку яркость красителя, связанного с ДНК, намного выше, чем яркость свободного красителя и эффективная концентрация красителя, связанного с ДНК, может сильно отличаться от концентрации окрашивающего раствора. Используя растворы органических красителей известной концентрации с аналогичными спектрами излучения, мы косвенно оценили, что в нашей системе βD / βA ~ 2.5, что дает абсолютные значения отношения акцептор-донор N _A/ N _D в пределах от ~ 0,4 до ~ 2 в наших экспериментах. Если эта оценка верна, мы можем вычислить уровень FRET, соответствующий донорно-акцепторной паре, как A ₀ = А ₀ * / ( β _D/ β _А). Для контрольных образцов это значение порядка A ₀ ~ 0.4, что соответствует эффективности FRET порядка E ₀ ~ 0,3 и средние донорно-акцепторные расстояния порядка ~ 1,2 радиуса Ферстера. Если принять радиус Ферстера ~ 5 нм, это соответствует ~ 6 нм. Согласно недавним ЭМ наблюдениям, хроматин можно описать как неупорядоченную цепочку диаметром от 5 до 24 нм, упакованную вместе при различных плотностях концентрации в межфазных ядрах 62. Мы можем предположить, что вариации в локальной плотности этой цепи определяют вариации среднего акцептора. -Донорское расстояние и, следовательно, вариации обнаруженного FRET.В этих рамках вариация А ₀ от 0,36 до 0,44, подобное тому, которое наблюдается между эухроматином и гетерохроматином (рисунок), будет соответствовать изменению среднего расстояния акцептор-донор от ~ 1,2 до всего лишь ~ 1,1 радиуса Фёрстера. Это изменение расстояния может показаться относительно небольшим по сравнению с предполагаемой разницей в 2,6 раза общей плотности ДНК между двумя компартментами 20. Однако это неудивительно, учитывая неоднородность размера нанодоменов, недавно наблюдаемую для ДНК и структур нуклеосом более высокого порядка. 16, 20, 62.Наша оценка среднего расстояния взаимодействия может быть неточной, поскольку она не зависит от надежного протокола калибровки. В этом отношении мы полагаем, что было бы интересно провести аналогичный анализ на гистоновых анализах FRET 38, 39, 41, где использование флуоресцентных белков позволило бы более надежную калибровку с конструкциями известной стехиометрии 61 и прямую оценку среднее нанометровое расстояние между мечеными гистонами.

FRET имеет множество применений в биологии.Однако в большинстве экспериментов FRET используются не пары ДНК-красителей, а более традиционные пары FRET, такие как CFP-YFP или Cy3-Cy5. Таким образом, будет важно проверить общую применимость нашего метода к системам FRET на основе обычных флуорофоров. Еще одна интересная перспектива — это комбинация нашего метода FRET с микроскопией сверхвысокого разрешения. Например, измерения FLIM-FRET со сверхвысоким разрешением могут быть выполнены благодаря недавней интеграции FLIM со сканирующей микроскопией изображений 63, методики, аналогичной SIM, которая не требует использования специальных флуорофоров.Наконец, мы считаем, что наш метод может быть дополнительно улучшен с использованием новых флуорогенных красителей, недавно разработанных для более эффективного окрашивания хроматина 64. В то же время совместимость этих новых красителей с микроскопией сверхвысокого разрешения STED открывает интригующую возможность использования одного и того же флуорофора для визуализации хроматина в разных наноразмерных окнах: от дифракционного предела до десятков нанометров с помощью STED и в нанометровом диапазоне с помощью FRET.

ВЗНОС АВТОРА

L.Л. и А.Д. разработали исследование. Л.Л. и С.П. проводили эксперименты, писали программное обеспечение и анализировали данные. Рукопись написана при участии всех авторов.

Дополнительная информация

Данные S1. Вспомогательная информация

БЛАГОДАРНОСТИ

LL было поддержано Fondazione Cariplo и Associazione Italiana per la Ricerca sul Cancro (AIRC) через грант Trideo (Трансформация идей в онкологических исследованиях) № 17215. Авторы выражают благодарность Микеле Бьянчини, Паоло Марко Скотто (Istituto Italiano di Tecnologia) и Ulas Coskun (ISS) за техническую поддержку.Авторы выражают благодарность Паоле Барборо (Ospedale Policlinico San Martino-IRCCS) за полезные обсуждения.

Банкноты

Pelicci S, Diaspro A, Lanzanò L. Наноразмерное уплотнение хроматина в живых клетках, визуализированное с помощью соотношения акцепторов и доноров, скорректированное по Фёрстеровскому резонансному переносу энергии между красителями ДНК. J. Биофотоника. 2019; 12: e201

4 10.1002 / jbio.201

4 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

Информация о финансировании Istituto Italiano di Tecnologia; Итальянская ассоциация по рисованию суль Канкро; Fondazione Cariplo

ССЫЛКИ

2.Секстон Т., Шобер Х., Фрейзер П., Гассер С. М., Nat. Struct. Мол. Биол. 2007, 14, 1049. [PubMed] [Google Scholar] 6. Имаи Р., Нодзаки Т., Тани Т., Кайзу К., Хибино К., Иде С., Тамура С., Такахаши К., Шрибак М., Маешима К., Мол. Биол. Клетка 2017, 28, 3349. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 8. Гревал С. И., Элгин С. С. Р., Curr. Opin. Genet. Dev. 2002, 12, 178. [PubMed] [Google Scholar] 11. Бетциг Э., Паттерсон Г. Х., Суграт Р., Линдвассер О. В., Оленич С., Бонифачино Дж. С., Дэвидсон М.У., Липпинкотт-Шварц Дж., Гесс Х. Ф., Science 2006, 313, 1642. [PubMed] [Google Scholar] 13. van de Linde S., Löschberger A., Klein T., Heidbreder M., Wolter S., Heilemann M., Sauer M., Nat. Protoc. 2011, 6, 991. [PubMed] [Google Scholar] 15. Боеттигер А. Н., Бинту Б., Моффит Дж. Р., Ван С., Беливо Б. Дж., Фуденберг Г., Имакаев М., Мирный Л. А., Ву К. Т., Чжуан Х., Nature 2016, 529, 418. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 16. Риччи М. А., Манзо К., Лакадамьяли М., Косма М. П., Cell 2015, 160, 1145.[PubMed] [Google Scholar] 17. Нодзаки Т., Имаи Р., Танбо М., Нагашима Р., Тамура С., Тани Т., Мол. Клетка 2017, 67, 282. [PubMed] [Google Scholar] 18. Шермеллех Л., Карлтон П. М., Хаасе С., Шао Л., Кнер П., Берк Б., Кардосо М. К., Агард Д. А., Матс Г. Л., Леонхардт Х., Седат Дж. У., Science 2010, 320, 1332. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 19. Сарменто М. Дж., Онето М., Пеличчи С., Пеше Л., Сципиони Л., Фаретта М., Фурия Л., Деллино Г. И., Пеличчи П. Г., Бьянкини П., Диаспро А., Ланзано Л., Nat. Commun. 2018, 9, 1. [Google Scholar] 20. Фанг К., Чен Х., Ли Х., Шен Й., Сунь Дж., Чайковский Д. М., Шао З., ACS Nano 2018, 12, 4909. [PubMed] [Google Scholar] 23. Сципиони Л., Ди Бона М., Вичидомини Г., Лансано Л., Commun. Биол. 2018, 1, 1. [Google Scholar] 24. Баум М., Эрдель Ф., Ваксмут М., Риппе К., Nat. Commun. 2014, 5, 1. [Google Scholar] 28. Эггелинг К., Рингеманн К., Медда Р., Шварцманн Г., Сандхофф К., Полякова С., Белов В. Н., Хайн Б., фон Миддендорф К., Шенле А., Хелл С.W., Природа 2008, 457, 1159. [PubMed] [Google Scholar] 29. Lanzanò L., Scipioni L., Di Bona M., Bianchini P., Bizzarri R., Cardarelli F., Diaspro A., Vicidomini G., Nat. Commun. 2017, 8, 65. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 32. Абдоллахи Э., Таучер-Шольц Г., Якоб Б., Int. J. Mol. Sci. 2018, 19, 2399. [Google Scholar] 35. Гирал Х., Крэнстон Д. А., Ланцано Л., Калдас Ю., Сазерленд Э., Рэйчельсон Дж., Добринских Э., Вайнман Э. Дж., Доктор Р. Б., Граттон Э., Леви М., Биол Дж., Хим. 2012, 287, 35047.[Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 37. Гирал Х., Ланцано Л., Калдас Й., Блейн Дж., Верландер Дж. У., Лей Т., Граттон Э., Леви М., Биол Дж., Хим. 2011, 286, 15032. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 39. Ллер Д., Байи А. П., Перрен А., Норман Д. Г., Ксиродимас Д. П., Фейл Р., Cell Rep. 2017, 18, 1791. [PubMed] [Google Scholar] 41. Лу Дж., Сципиони Л., Райт Б. К., Бартолек Т. К., Чжан Дж., Масамсетти В. П., Гаус К., Граттон Э., Чезаре А. Дж., Хинде Э., Proc. Natl. Акад. Sci. U.S.A. 2019, 116, 7323. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 43. Fábián Á. И., Ренте Т., СёллоСи Дж., Матюс Л., Дженей А., ChemPhysChem 2010, 11, 3713. [PubMed] [Google Scholar] 45. Кушик С. В., Бланк П. С., Фогель С. С., PLoS One 2009, 4, 1. [Google Scholar] 48. Albiez H., Cremer M., Tiberi C., Vecchio L., Schermelleh L., Dittrich S., Küpper K., Joffe B., Thormeyer T., Von Hase J., Yang S., Rohr K., Leonhardt Х., Соловей И., Кремер К., Факан С., Кремер Т., Chromosome Res. 2006, 14, 707. [PubMed] [Google Scholar] 50.Schindelin J., Arganda ‐ Carreras I., Frize E., Kaynig V., Longair M., Pietzsch T., Preibisch S., Rueden C., Saalfeld S., Schmid B., Tinevez J.-Y., White DJ, Хартенштейн В., Элисейри К., Томанчак П., Кардона А., Nat. Методы 2012, 9, 676. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 51. Вамоси Г., Баудендистель Н., фон дер Лит К.-В., Салоки Н., Мочар Г., Мюллер Г., Бразда П., Вальдек В., Дамьянович С., Ланговски Дж., Тот К., Biophys . Дж. 2008, 94, 2859. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 52.Ван Зандворт М. А. М. Дж., Де Грау К. Дж., Герритсен Х. К., Броерс Дж. Л. В., Ауде Эгбринк М. Г. А., Рамаекерс Ф. С. С., Слааф Д. В., Цитометрия 2002, 47, 226. [PubMed] [Google Scholar] 54. Mascetti G., Vergani L., Diaspro A., Carrara S., Radicchi G., Nicolini C., Цитометрия 1996, 23, 110. [PubMed] [Google Scholar] 55. Kruhlak M. J., Celeste A., Dellaire G., Fernandez ‐ capetillo O., Müller W. G., Mcnally J. G., Bazett ‐ jones D. P., Nussenzweig A., J. Cell Biol. 2006, 172, 823. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 56.Берджесс Р. К., Берман Б., Крулак М. Дж., Мистели Т., Берджесс Р. К., Бурман Б., Крулак М. Дж., Мистели Т., CellReports 2014, 9, 1703. [Google Scholar] 57. Dinant C., De Jager M., Essers J., Van Cappellen W. A., Kanaar R., Houtsmuller A. B., Vermeulen W., J. Cell Sci. 2007, 120, 2731. [PubMed] [Google Scholar] 58. Барборо П., Феррари Н., Капайя М., Петретто А., Салви С., Боккардо С., Балби К., Int. J. Рак 2015, 137, 1574. [PubMed] [Google Scholar] 62. Оу Х. Д., Фан С., Диринк Т. Дж., Тор А., Эллисман М. Х., Ши К. С. О., Наука 2017, 357, 1. [Google Scholar] 63. Castello M., Tortarolo G., Buttafava M., Deguchi T., Villa F., Koho S., Pesce L., Oneto M., Pelicci S., Lanzanó L., Bianchini P., Sheppard CJR, Diaspro A. , Този А., Вичидомини Г., Nat. Методы 2019, 16, 175. [PubMed] [Google Scholar]

Произошла ошибка при настройке вашего пользовательского файла cookie

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности. Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.

Настройка вашего браузера для приема файлов cookie

Существует множество причин, по которым cookie не может быть установлен правильно. Ниже приведены наиболее частые причины:

В вашем браузере отключены файлы cookie. Вам необходимо сбросить настройки вашего браузера, чтобы он принимал файлы cookie, или чтобы спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
Ваш браузер спрашивает вас, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались. Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, нажмите кнопку «Назад» и примите файлы cookie.
Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Если вы подозреваете это, попробуйте другой браузер.
Дата на вашем компьютере в прошлом. Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г., браузер автоматически забудет файл cookie. Чтобы исправить это, установите правильное время и дату на своем компьютере.
Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie. Вы должны отключить приложение при входе в систему или проконсультироваться с системным администратором.

Почему этому сайту требуются файлы cookie?

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу. Чтобы предоставить доступ без файлов cookie потребует, чтобы сайт создавал новый сеанс для каждой посещаемой страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.

Что сохраняется в файле cookie?

Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в cookie; никакая другая информация не фиксируется.

Как правило, в файлах cookie может храниться только информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта. Например, сайт не может определить ваше имя электронной почты, пока вы не введете его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступа к остальной части вашего компьютера, и только сайт, который создал файл cookie, может его прочитать.

Наноразмерное уплотнение хроматина в живых клетках, визуализированное по скорректированному соотношению акцептор-донор FRET между ДНК-красителями

% PDF-1.5 % 1 0 объект > / Метаданные 381 0 R / Страницы 2 0 R / StructTreeRoot 3 0 R / Тип / Каталог >> эндобдж 381 0 объект > поток application / pdf

M. Bernardes Silva

Наноразмерное уплотнение хроматина в живых клетках, визуализированное по скорректированному соотношению акцептор-донор FRET между красителями ДНК

2019-06-14T14: 07: 38 + 02: 00Microsoft® Word 20162021-11-10T22: 28: 09-08: 002021-11-10T22: 28: 09-08: 00Microsoft® Word 2016uuid: 6bba7386-1dd2-11b2- 0a00-810827bd7700uuid: 6bba7389-1dd2-11b2-0a00-

0000000 конечный поток эндобдж 2 0 obj > эндобдж 3 0 obj > эндобдж 130 0 объект > эндобдж 131 0 объект > эндобдж 133 0 объект [167 0 R 168 0 R 355 0 R 356 0 R 357 0 R 358 0 R 359 0 R 360 0 R 361 0 R 362 0 R 170 0 R 171 0 R 172 0 R 172 0 R 172 0 R 172 0 R 173 0 R 174 0 R 363 0 R] эндобдж 134 0 объект > эндобдж 135 0 объект > эндобдж 136 0 объект [176 0 R 177 0 R] эндобдж 137 0 объект [178 0 R 178 0 R 178 0 R 178 0 R 178 0 R 178 0 R 178 0 R 178 0 R 179 0 R 180 0 R] эндобдж 138 0 объект [181 0 R 182 0 R 183 0 R] эндобдж 139 0 объект [184 0 R 185 0 186 0 R 187 0 R 188 0 R] эндобдж 140 0 объект [189 0 R 190 0 R 190 0 R 190 0 R 190 0 R 190 0 R 190 0 R 190 0 R 190 0 R 190 0 R 190 0 R 190 0 R 190 0 R 191 0 R 192 0 R 192 0 R 192 0 R 192 0 R 192 0 R 192 0 R 192 0 R 192 0 R 192 0 R 192 0 R 192 0 R 192 0 R 192 0 R 192 0 R 192 0 R 192 0 R 192 0 R 192 0 R 192 0 R 192 0 R 192 0 R 192 0 R 192 0 R 192 0 R 192 0 R 192 0 R 192 0 R 192 0 R 192 0 R 192 0 R 192 0 R 192 0 R 192 0 R 192 0 R 192 0 R 192 0 R 192 0 R 192 0 R 193 0 R 193 0 R 193 0 R 193 0 R 193 0 R 193 0 R 193 0 R 193 0 R 193 0 R 193 0 R 193 0 R 193 0 R 193 0 R 193 0 R 193 0 R 193 0 R 193 0 R 193 0 R 193 0 R 193 0 R 193 0 R 193 0 R 193 0 R 193 0 R 193 0 R 193 0 R 193 0 R 193 0 R 193 0 R 193 0 R 193 0 R 193 0 R 193 0 R 193 0 R 193 0 R] эндобдж 141 0 объект [194 0 R 195 0 R 196 0 R 197 0 R 198 0 R 199 0 R] эндобдж 142 0 объект [200 0 R 201 0 R 202 0 R 202 0 R 202 0 R 202 0 R 202 0 R 202 0 R 203 0 R 203 0 R 203 0 R 203 0 R 204 0 R 204 0 R 204 0 R 204 0 R 204 0 R 204 0 R 204 0 R 204 0 R 204 0 R 204 0 R 204 0 R 204 0 R 204 0 R 204 0 R 204 0 R 204 0 R 204 0 R 204 0 R 204 0 R 204 0 R 204 0 R 204 0 R 204 0 R 205 0 R 206 0 R 207 0 R 208 0 R 209 0 R 210 0 R] эндобдж 143 0 объект [211 0 R 212 0 R 213 0 R 214 0 R 215 0 R 216 0 R 217 0 R 218 0 R 219 0 R] эндобдж 144 0 объект [220 0 R 221 0 R 222 0 R 223 0 R 224 0 R 225 0 R 226 0 R 227 0 R 227 0 R 227 0 R 227 0 R 228 0 R 228 0 R 228 0 R 228 0 R 228 0 R 228 0 228 руб. 0 228 руб. 0 228 руб. 0 228 руб. 0 228 руб. 0 228 руб. 0 228 руб. 0 228 руб. 0 228 руб. 0 228 руб. 0 228 руб. 0 228 руб. 228 0 R 228 0 R 228 0 R 228 0 R 228 0 R 228 0 R 228 0 R 228 0 R 228 0 R 228 0 R 228 0 R 228 0 R 228 0 R 228 0 R 228 0 R 228 0 R 228 0 228 рандов 0 228 рандов 0 228 рандов 0 228 рандов 0 228 рандов 0 228 рандов 0 228 рандов 0 228 рандов 0 228 рандов 0 228 рандов 0 228 рандов 0 228 рандов 0 228 рандов 0 228 руб. 0 228 руб. 0 228 руб. 0 228 руб. 0 228 руб. 0 228 руб. 0 228 руб. 0 228 руб. 0 228 руб. 0 228 руб. 0 228 руб. 0 228 руб. 228 0 R 228 0 R 228 0 R 228 0 R] эндобдж 145 0 объект [229 0 R 229 0 R 229 0 R 229 0 R 229 0 R 229 0 R 229 0 R 229 0 R 229 0 R 229 0 R 229 0 R 229 0 R 229 0 R 229 0 R 229 0 R 229 0 R 229 0 229 р. 0 229 р. 0 229 р. 0 367 р. 0 368 0 р. 231 0 р. 232 0 р.] эндобдж 146 0 объект [233 0 R 234 0 R] эндобдж 147 0 объект [235 0 R 372 0 R 237 0 R 238 0 R] эндобдж 148 0 объект [239 0 R 375 0 R 375 0 R 375 0 R 375 0 R 375 0 R 375 0 R 241 0 R 241 0 R 241 0 R 241 0 R 241 0 R 241 0 R 241 0 R 241 0 R 241 0 R 241 0 R 241 0 R 241 0 R 241 0 R 241 0 R 241 0 R 241 0 R 241 0 R 241 0 R 241 0 R 241 0 R 242 0 R 242 0 R 242 0 R 242 0 R 242 0 R 242 0 R 242 0 R 242 0 R 242 0 R 242 0 R 242 0 R 242 0 R 242 0 R 242 0 R 242 0 R 242 0 R 242 0 R 242 0 R 242 0 R 242 0 R 242 0 R 242 0 R 242 0 R 242 0 R 242 0 R 242 0 R 242 0 R 242 0 R 242 0 R 242 0 R 242 0 R 242 0 R 242 0 R 242 0 R 242 0 R 242 0 R 242 0 R 242 0 R 242 0 R 242 0 R 243 0 R 243 0 R 243 0 R 243 0 R 243 0 R 243 0 R 243 0 R 243 0 R 243 0 R 243 0 R 243 0 R 243 0 R 243 0 R 243 0 R 243 0 R 243 0 R 243 0 R 243 0 R 243 0 R] эндобдж 149 0 объект [244 0 R 244 0 R 244 0 R 244 0 R 244 0 R 244 0 R 244 0 R 244 0 R 244 0 R 244 0 R 244 0 R 244 0 R 244 0 R 244 0 R 244 0 R 244 0 R 244 0 R 244 0 R 244 0 R 244 0 R 244 0 R 244 0 R 245 0 R 245 0 R 245 0 R 245 0 R 245 0 R 245 0 R 245 0 R 245 0 R 245 0 R 245 0 R 245 0 R 245 0 R 245 0 R 245 0 R 245 0 R 245 0 R 245 0 R 245 0 R 245 0 R 245 0 R 245 0 R 245 0 R 245 0 R 245 0 R 245 0 R 245 0 R 245 0 R 245 0 245 руб. 0 245 руб. 0 руб. 245 0 руб. 245 0 руб. 245 0 руб. 245 0 руб. 245 0 руб. 245 руб. 0 руб. 245 руб. 0 R 245 0 R 245 0 R 246 0 R 378 0 R 248 0 R 248 0 R 248 0 R 248 0 R 248 0 R 248 0 R 248 0 R 248 0 R 248 0 R 248 0 R 248 0 R 248 0 R 248 0 R 248 0 R] эндобдж 150 0 объект [249 0 R 249 0 R 249 0 R 249 0 R 249 0 R 249 0 R 249 0 R 249 0 R 249 0 R 249 0 R 249 0 R 249 0 R 249 0 R 249 0 R 249 0 R 249 0 R 249 0 R 249 0 R 249 0 R 249 0 R 249 0 R 249 0 R 250 0 R 250 0 R 250 0 R 250 0 R 250 0 R 250 0 R 250 0 R 250 0 R 250 0 R 250 0 R 250 0 R 250 0 R 250 0 R 250 0 R 250 0 R 250 0 R 250 0 R 250 0 R 250 0 R 250 0 R 250 0 R 250 0 R 250 0 R 250 0 R 250 0 R 251 0 R 251 0 R 251 0 251 0 R 251 0 R 251 0 R 251 0 R] эндобдж 151 0 объект [252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R 252 0 R] эндобдж 152 0 объект [253 0 R 253 0 R 253 0 R 253 0 R 253 0 R 253 0 R 253 0 R 253 0 R 253 0 R 253 0 R 253 0 R 253 0 R 253 0 R 253 0 R 253 0 R 253 0 R 253 0 R 253 0 R 253 0 R 253 0 R 253 0 R 253 0 R 253 0 R 253 0 R 253 0 R 253 0 R 253 0 R 253 0 R 253 0 R 253 0 R 253 0 R 253 0 R 253 0 R 253 0 R 253 0 R 253 0 R 253 0 R 253 0 R 253 0 R 253 0 R 253 0 R 253 0 R 253 0 R 253 0 R 253 0 R 253 0 R 253 0 R 253 0 R 253 0 R 253 0 253 руб. 0 253 руб. 0 руб. 253 0 руб. 253 0 руб. 253 0 руб. 254 0 руб. 255 0 руб. 256 0 руб.] эндобдж 153 0 объект [257 0 R 258 0 R 259 0 R 260 0 R 261 0 R 262 0 R 263 0 R 264 0 R 265 0 R 266 0 R 267 0 R 268 0 R 269 0 R 270 0 R] эндобдж 154 0 объект [271 0 R 272 0 R 273 0 R 274 0 R 275 0 R 276 0 R 277 0 R 278 0 R 279 0 R 279 0 R 279 0 R 279 0 R 279 0 R 279 0 R 279 0 R 279 0 R 279 0 280 руб. 0 281 руб.] эндобдж 155 0 объект [282 0 R 282 0 R 282 0 R 282 0 R 282 0 R 282 0 R 282 0 R 282 0 R 283 0 R 284 0 R 285 0 R 286 0 R 286 0 R 286 0 R 286 0 R 286 0 R 286 0 286 р. 286 0 р. 286 0 р. 287 0 р. 288 0 р. 289 0 р. 290 0 р. 290 0 р. 290 0 р. 290 0 р. 290 0 р. 290 0 р. 290 0 р. 290 0 р. 291 0 р. 292 0 р. 292 0 R 292 0 R 292 0 R 292 0 R 292 0 R] эндобдж 156 0 объект [293 0 R 294 0 R 295 0 R 296 0 R 297 0 R 298 0 R 298 0 R 298 0 R 298 0 R 298 0 R 298 0 R 298 0 R 298 0 R 299 0 R 300 0 R 301 0 R 302 0 R 303 0 R] эндобдж 157 0 объект [304 0 R 305 0 R 306 0 R 307 0 R 308 0 R 309 0 R 310 0 R 311 0 R 312 0 R 313 0 R 314 0 R 314 0 R 314 0 R 314 0 R 314 0 R 314 0 R 314 0 R] эндобдж 158 0 объект [315 0 R 316 0 R 317 0 R 318 0 R 319 0 R 320 0 R 321 0 R 322 0 R 323 0 R 324 0 R 325 0 R 325 0 R 325 0 R 325 0 R 325 0 R 325 0 R 325 0 R 325 0 R 326 0 R] эндобдж 159 0 объект [327 0 R 328 0 329 0 R 329 0 R] эндобдж 160 0 объект [330 0 R 331 0 R 331 0 R 333 0 R 333 0 R 333 0 R 333 0 R 333 0 R 333 0 R 333 0 R 333 0 R 333 0 R 333 0 R 333 0 R 333 0 R 333 0 R 333 0 333 руб. 0 333 руб. 0 334 руб. 0 334 руб. 0 332 руб.] эндобдж 161 0 объект [335 0 R 336 0 R 338 0 R 338 0 R 338 0 R 338 0 R 338 0 R 338 0 R 338 0 R 338 0 R 338 0 R 338 0 R 338 0 R 338 0 R 338 0 R 338 0 R 338 0 R 338 0 R 338 0 R 338 0 R 338 0 R 338 0 R 338 0 R 338 0 R 338 0 R 338 0 R 338 0 R 338 0 R 338 0 R 338 0 R 338 0 R 338 0 R 338 0 R 338 0 R 338 0 R 338 0 R 338 0 R 338 0 R 338 0 R 338 0 R 338 0 R 338 0 R 338 0 R 338 0 R 338 0 R 338 0 R 338 0 R 338 0 R 338 0 R 338 0 338 0 R 338 0 R 338 0 R 338 0 R 338 0 R 337 0 R] эндобдж 162 0 объект [339 0 R 339 0 R 339 0 R 339 0 R 339 0 R 339 0 R 339 0 R 339 0 R 339 0 R 339 0 R 339 0 R 339 0 R 340 0 R 340 0 R] эндобдж 163 0 объект [341 0 R 342 0 R 344 0 R 343 0 R] эндобдж 164 0 объект [345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 345 р. 345 0 р. 345 0 р. 345 0 р. 345 0 р. 345 0 р. 345 0 р. 345 0 р. 345 0 р. 345 0 р. 345 0 р. 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 345 0 R 346 0 R 346 0 R] эндобдж 165 0 объект [347 0 R 348 0 R 348 0 R 350 0 R 350 0 R 350 0 R 350 0 R 350 0 R 350 0 R 350 0 R 350 0 R 350 0 R 350 0 R 350 0 R 350 0 R 350 0 R 350 0 R 350 0 R 350 0 R 350 0 R 350 0 R 350 0 R 350 0 R 350 0 R 350 0 R 350 0 R 350 0 R 350 0 R 350 0 R 350 0 R 350 0 R 350 0 R 350 0 R 350 0 R 350 0 R 350 0 R 350 0 R 350 0 R 350 0 R 350 0 R 350 0 R 350 0 R 350 0 R 350 0 R 350 0 R 350 0 R 350 0 R 350 0 R 350 0 R 350 0 350 0 R 350 0 R 349 0 R] эндобдж 166 0 объект [351 0 R 351 0 R 351 0 R 351 0 R 351 0 R 351 0 R 351 0 R 351 0 R 351 0 R 351 0 R 351 0 R 351 0 R 351 0 R 351 0 R 351 0 R 351 0 R 351 0 R 351 0 R 351 0 R 351 0 R 351 0 R 351 0 R 351 0 R 351 0 R 351 0 R 351 0 R 351 0 R 351 0 R 351 0 R 351 0 R 351 0 R 351 0 R 351 0 R 351 0 R 351 0 R 351 0 R 351 0 R 351 0 R 351 0 R 351 0 R 351 0 R 351 0 R 351 0 R 351 0 R 351 0 R 351 0 R 351 0 R 351 0 R 351 0 R 351 0 351 0 R 351 0 R 352 0 R 353 0 R 354 0 R] эндобдж 351 0 объект > эндобдж 352 0 объект > эндобдж 353 0 объект > эндобдж 354 0 объект > эндобдж 132 0 объект > эндобдж 35 0 объект > / MediaBox [0 0 595.Θuōrd; {Mr; = X 善 $% p%> mI

% PDF-1.7 % 1 0 объект > / Метаданные 4 0 R / ViewerPreferences 5 0 R >> эндобдж 6 0 obj / CreationDate (D: 20181016143003 + 01’00 ‘) / ModDate (D: 20181016143003 + 01’00 ‘) /Режиссер >> эндобдж 2 0 obj > эндобдж 3 0 obj > эндобдж 4 0 obj > транслировать Microsoft® Word 2016

Roth, Diane

Microsoft® Word 20162018-10-16T14: 30: 03 + 01: 002018-10-16T14: 30: 03 + 01: 00uuid: 422B2F25-AEEF-49DC-8F37-3FB5E2534864uuid: 422B2F25- AEEF-49DC-8F37-3FB5E2534864 конечный поток эндобдж 5 0 obj > эндобдж 7 0 объект > / XObject> >> / Аннотации [43 0 R 44 0 R 45 0 R 46 0 R 47 0 R 48 0 R 49 0 R 50 0 R 51 0 R 52 0 R 53 0 R 54 0 R 55 0 R] / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 595 842] >> эндобдж 8 0 объект > / ExtGState> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / MediaBox [0 0 595.32 841,92] / Содержание 64 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 0 >> эндобдж 9 0 объект > / ExtGState> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / MediaBox [0 0 595,32 841,92] / Содержание 65 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 1 >> эндобдж 10 0 obj > / ExtGState> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / MediaBox [0 0 595,32 841,92] / Содержание 66 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 2 >> эндобдж 11 0 объект > / ExtGState> / XObject> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / MediaBox [0 0 595.32 841,92] / Содержание 69 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 3 >> эндобдж 12 0 объект > / ExtGState> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / MediaBox [0 0 595,32 841,92] / Содержание 70 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 4 >> эндобдж 13 0 объект > / ExtGState> / XObject> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / MediaBox [0 0 595,32 841,92] / Содержание 72 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 5 >> эндобдж 14 0 объект > / ExtGState> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / MediaBox [0 0 595.32 841,92] / Содержание 74 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 6 >> эндобдж 15 0 объект > / ExtGState> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / MediaBox [0 0 595,32 841,92] / Содержание 76 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 7 >> эндобдж 16 0 объект > / ExtGState> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / MediaBox [0 0 595,32 841,92] / Содержание 77 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 8 >> эндобдж 17 0 объект > / ExtGState> / XObject> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / MediaBox [0 0 595.32 841,92] / Содержание 79 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 9 >> эндобдж 18 0 объект > / ExtGState> / XObject> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / MediaBox [0 0 595,32 841,92] / Содержание 81 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 10 >> эндобдж 19 0 объект > / ExtGState> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / MediaBox [0 0 595,32 841,92] / Содержание 82 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 11 >> эндобдж 20 0 объект > / ExtGState> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / MediaBox [0 0 595.32 841,92] / Содержание 83 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 12 >> эндобдж 21 0 объект > / ExtGState> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / MediaBox [0 0 595,32 841,92] / Содержание 84 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 13 >> эндобдж 22 0 объект > / ExtGState> / XObject> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / MediaBox [0 0 595,32 841,92] / Содержание 86 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 14 >> эндобдж 23 0 объект > / ExtGState> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / MediaBox [0 0 595.32 841,92] / Содержание 87 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 15 >> эндобдж 24 0 объект > / ExtGState> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / MediaBox [0 0 595,32 841,92] / Содержание 88 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 16 >> эндобдж 25 0 объект > / ExtGState> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / MediaBox [0 0 595,32 841,92] / Содержание 90 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 17 >> эндобдж 26 0 объект > / ExtGState> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / MediaBox [0 0 595.32 841,92] / Содержание 91 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 18 >> эндобдж 27 0 объект > / ExtGState> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / MediaBox [0 0 595,32 841,92] / Содержание 92 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 19 >> эндобдж 28 0 объект > / ExtGState> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / MediaBox [0 0 595,32 841,92] / Содержание 93 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 20 >> эндобдж 29 0 объект > / ExtGState> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / MediaBox [0 0 595.32 841,92] / Содержание 94 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 21 >> эндобдж 30 0 объект > / ExtGState> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / Аннотации [95 0 R] / MediaBox [0 0 595,32 841,92] / Содержание 96 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 22 >> эндобдж 31 0 объект > / ExtGState> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / MediaBox [0 0 595,32 841,92] / Содержание 101 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 24 >> эндобдж 32 0 объект > / ExtGState> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / MediaBox [0 0 595.32 841,92] / Содержание 102 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 25 >> эндобдж 33 0 объект > / ExtGState> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / MediaBox [0 0 595,32 841,92] / Содержание 103 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 26 >> эндобдж 34 0 объект > / ExtGState> / XObject> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / MediaBox [0 0 595,32 841,92] / Содержание 106 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 27 >> эндобдж 35 0 объект > эндобдж 36 0 объект > эндобдж 37 0 объект > эндобдж 38 0 объект > транслировать xVMs6W 쩵 gd% GITq ~.\ O} XE8 ۭ nWv || xwƣmpa & o = p \ ‘ͯNW 7ԉ8y 㹾 7! * Rgr | p «, s5Fbzjjr,) iFPG | {7ehLyC! #`> 0 * JdRHM {fI \}> Y, ̆x: Í6 | 9D19n { 2òww)) + | .ӌzY) c / Rm / iq-4z / G * NxHS ԰ wW, K] P $

fZ ֧ c.p = ‘պ PWI $ # d2_} 9_

% PDF-1.4 % 152 0 объект > эндобдж xref 152 110 0000000016 00000 н. 0000002552 00000 н. 0000002786 00000 н. 0000002817 00000 н. 0000002885 00000 н. 0000003389 00000 н. 0000003968 00000 н. 0000004034 00000 н. 0000004260 00000 н. 0000004371 00000 н. 0000004476 00000 н. 0000004602 00000 н. 0000004745 00000 н. 0000004884 00000 н. 0000005027 00000 н. 0000005166 00000 п. 0000005309 00000 н. 0000005450 00000 н. 0000005586 00000 н. 0000005725 00000 н. 0000005864 00000 н. 0000006005 00000 н. 0000006142 00000 п. 0000006281 00000 п. 0000006420 00000 н. 0000006561 00000 н. 0000006700 00000 н. 0000006841 00000 н. 0000006982 00000 н. 0000007119 00000 н. 0000007258 00000 н. 0000007431 00000 н. 0000007573 00000 н. 0000007714 00000 н. 0000007854 00000 п. 0000007994 00000 н. 0000008134 00000 п. 0000008276 00000 н. 0000008415 00000 н. 0000008554 00000 н. 0000008692 00000 п. 0000008832 00000 н. 0000008972 00000 н. 0000009112 00000 н. 0000009300 00000 н. 0000009396 00000 п. 0000009492 00000 п. 0000009589 00000 н. 0000009685 00000 н. 0000009780 00000 н. 0000009874 00000 н. 0000009969 00000 н. 0000010063 00000 п. 0000010157 00000 п. 0000010250 00000 п. 0000010347 00000 п. 0000010621 00000 п. 0000010644 00000 п. 0000011803 00000 п. 0000011825 00000 п. 0000012759 00000 п. 0000012781 00000 п. 0000013724 00000 п. 0000013924 00000 п. 0000014469 00000 п. 0000015119 00000 п. 0000015381 00000 п. 0000015774 00000 п. 0000015797 00000 п. 0000016892 00000 п. 0000017012 00000 п. 0000018066 00000 п. 0000018386 00000 п. 0000018651 00000 п. 0000019089 00000 п. 0000019432 00000 п. 0000025052 00000 п. 0000025241 00000 п. 0000025473 00000 п. 0000025793 00000 п. 0000026087 00000 п. 0000026775 00000 п. 0000026845 00000 п. 0000027255 00000 п. 0000027830 00000 н. 0000027853 00000 п. 0000029007 00000 п. 0000029261 00000 п. 0000029928 00000 н. 0000030420 00000 п. 0000030609 00000 п. 0000030692 00000 п.