Афанасий Никитин — сообщение доклад (5 класс География)
- Энциклопедия
- Люди
- Никитин Афанасий
Одним из известнейших русских путешественников можно считать Афанасия Никитина, посетившего множество арабских и азиатских стран.
А. Никитин родился в крестьянской семье в 1442 г. Его отца звали Никита, поэтому фамилия путешественника, по сути, является его отчеством, так как собственных фамилий крестьяне в то время не имели. Он довольно рано начал путешествовать и торговать, для чего ездил в Византийскую империю, Литву, Крым и множество других регионов. Торговые экспедиции принесли ему хорошую прибыль, что позволило ему направить свои усилия на исследование новых территорий.
В 1468 г. из Клязьмы по воде он отправился на юг, где в районе современной Казани его караван ограбили татары. А возвращение домой без прибыли и товара привело бы к долговой яме для купцов, поэтому они отправились в Персию. Это стало началом великого путешествия Никитина, описанного им в книге «Хождение за три моря».
После Индии, Никитин отправился на восток Африки, где его еще раз чуть не ограбили. Пытаясь возвратиться домой, он прошел весь Иран и был арестован турками, которые обобрали его до нитки. Они оставили путешественнику только его дневник с записями его приключений. Никитин смог добраться в город Кафу (современная Феодосия) в 1474 г., откуда уже отправился в Россию. Он намеревался добраться в свой родной город Тверь, но умер по дороге туда – в Смоленске. Дневники Никитина были доставлены в Москву и переданы советнику русского царя.
Русский купец А. Никитин посетил Индию раньше европейцев, прибывших туда через африканский континент.
«Хождение за три моря» А. Никитина стало первым русским произведением, описывающим путешествия в иные земли и особенности проживающих там народностей.
Вариант 2
Афанасий Никитин – русский путешественник. О его жизни данных практически нет. Известно, что он родился в семье крестьянина. В молодости посещал Литву и Византию с торговыми визитами.
Прославился путешествиями в Персию, Индию и в Турецкое государство. Он написал книгу «Хождение за три моря». В ней описано путешествие с коммерческой точки зрения. Расписаны политические устройства государств. Их экономика. Культура.
Начало путешествия было положено из города Тверь. Далее произошла встреча посла Хасан-бека в городе Нижний Новгород.
И они вместе отправились вниз по течению Волги. В Астраханских землях они попали под разбой местных татар. Обратно вернуться не было возможности. И уже на 2-х суднах направились в сторону Дербента. Одно из судов разбилось, экипаж был взят в плен местными жителями. Афанасию Никитину с большим трудом удалось высвободить команду. Но вот просьбу о дополнительном финансирование, но получил отказ.
Далее путешествие продолжил в сторону Баку. В своей книге, Никитин очень искусно описывает красоту природы тех мест. Богатства местных жителей. Роскошность дворцов. В книге очень много употреблялась арабская лексика. Это ставило под сомнение, не принял ли Афанасий Никитин ислам. Ученые склоняются в большей степени, что нет. Так как в этом случае он бы не вернулся на родину. За перемену веры его могли бы казнить.
Обратный путь домой был проложен через Персию по Черному морю в сторону Индии. К сожалению вернуться на родину он не смог. По пути домой он умер. Это произошло под Смоленском. Точная причина была не известна, вероятнее всего за годы путешествия здоровье сильно ухудшилось.
Все рукописи сохранились, благодаря московским купцам, которые его сопровождали на обратном пути.
Афанасий Никитин один из немногих европейцев, который поделился своими знаниями о далекой Индии. Всего его путешествие в общем сроке составило около 3-з лет. Он рассказал об обычаях жителей, о их нравах. Его произведение «Хождение за три моря» считается памятником русской литературы. Его перевели на несколько языков мира. Подобное произведение было первым в русской литературе. В нем не было официальности и цензуры. Неповторимое звучание придавало то, что описывалось абсолютно все сферы жизни путешественника.
На родине путешественника, в городе Тверь, установлен памятник отважному Афанасию Никитину. Еще один находится в Феодосии. Но не только в России есть памятники. Совсем недавно был установлен в Индии. Афанасия Никитина чтят за смелось и упорство в изучение новых земель.
Путешествия
Афанасий Никитин — русский купец и один из первых европейцев, который отправился в поездку в Индию.
Он описал сой путь в повествовании, известном как «Путешествие за три моря».
Прославленный русский купец и автобиограф; на сегодняшний день точные даты рождения и смерти не установлены.
Афанасий Никитин русский вёл дневник своего путешествия, в частности в Иран и Индию на протяжении 4 лет между 1466 и 1475 годами. Собственный счет Афанасия остается загадочным явлением его истории и цели долгого путешествия. поездка. Под заголовком «Путешествие за пределы трех морей » послужной список Афанасия представляет собой документ, представляющий большой интерес как для историков, изучающих взаимодействие средневековых русских, так и в целом как один из первых автобиографических описаний в литературе. Он неоднократно публиковался на русском языке с аннотациями и переводился на многие языки.
Из города Твери в Индию
Никитин провел в Индии более двух лет, путешествовал по разным городам, знакомился различными людьми и подробно описывая все, что видел вокруг себя. Записки купца были составлены в форме дневника путешествия, которое больше похоже на журнал путешественника. В этой работе подробно описывается политическая ситуации Индии и её традиции, образ жизни и обычаи.
Его сочинения дают редкий отчет об Индии в то время, когда единственные существующие летописи были написаны сикофантами, стремящимися произвести впечатление на своих мусульманских правителей. Султанат Бахмани под руководством Мухаммеда III начал неудачные кампании против империи Виджаянагара и в конечном итоге распался на более мелкие королевства.
Повествование Никитина также помогло создать определенную романтическую атмосферу в России, когда дело дошло до Индии. Впоследствии в стране сложились богатые традиции индологии, прокладывающие путь к прекрасным отношениям между правительствами и народами.
Спустя некоторое время купец начал испытывать ностальгию. В 1471 году (по другой версии — в 1474 году) Никитин планировал вернуться домой, но не получилось. Здоровье Никитина было очень ослаблено из-за большой нагрузки. В 1472 (1475) он умер под городом Смоленском.
Понадобилось несколько лет, чтобы произведения были перенесены в Москву, где они были сохранены и переписаны.
В 1955 году в городе Тверь, на родине Афанасия Никитина, был установлен памятник в его честь.
5, 7 класс География
Никитин Афанасий
Интересные темы
Никитин Афанасий Никитич
Никитин Афанасий Никитич — тверской купец пятнадцатого века, писатель-путешественник. Дата рождения Никитина в точности не известно. Никитин – первый русский исследователь, сведения о путешествии которого сохранились до наших дней.
В 1466 году, когда посол владетеля Шемахи, ширван-шаха Форус-Есара, именем Асан-бег, бывший у великого князя Иоанна Третьего, собрался в обратный путь в Шемаху вслед за русским послом Василием Папиным, Никитин, проведавший о московском посольстве в Шемаху, решил вместе с ним отправиться туда для распространения русских товаров. Он с товарищами снарядил два судна, получил проезжую грамоту от тверского князя Михаила Борисовича и посадника Бориса Захарьича и с благословения владыки Геннадия, помолившись в соборе Спаса Золотоверхого, поплыл вниз по Волге.
В Костроме Никитин получил от великого князя Александра Васильевича великокняжескую проезжую грамоту за границу и с ней поехал в Нижний Новгород, где думал сойтись с послом московским Папиным, но не успел его захватить. Дождавшись приезда шемахинского посла Асан-бега, он вместе с ним поплыл рекой Волгой далее, благополучно опустился к рукаву Волги – Бузану, но подле Астрахани был ограблен татарами.
Татары отпустили из устья Волги только два судна, но одно из них разбилось во время бури о берег, и бывшие на нем русские люди захвачены в плен горцами – кайтанами. Никитину, однако, удалось добраться до Дербента, где он застал московского посла Василия Папина, которого стал просить позаботиться об освобождении захваченных кайтанами русских. Русские были освобождены и вместе с Никитиным представлены в Кайтуне ширван-шаху, который принял их очень ласково, но на просьбу помочь возвратиться на родину отвечал отказом, ссылаясь на то, что их слишком много.
Пришлось русским людям расходиться в разные стороны, причем Никитин, по его собственным словам, «пошел к Дербенту, из Дербента к Баке, где горит огонь неугасимый, а потом за море». Свое путешествие Никитин впоследствии назвал «хождением за три моря» — Каспийское, Индейское и Черное. «Хождение» Никитина можно разделить на четыре части:
- Путешествие от Твери до южных берегов Каспийского моря;
- Первое путешествие по Персии;
- Путешествие по Индии;
- Обратное путешествие чрез Персию на Русь.
Первое путешествие Афанасия Никитина через Персидские земли, от южных берегов Каспийского моря до берегов Персидского залива, продолжалось более года, с зимы 1467 до весны 1469 года. Он проехал через «Чебокар, Сару, Амиль, Димовант, Рей, Кашан, Каин, Езд, Сырчан, Таром, Лар, Бендер, Гурмыз». В его заметках об этом путешествии имеется лишь указание пути посредством обозначения местностей и некоторых расстояний и упоминание о смутном состоянии, в котором тогда находилась Персия.
Переправившись из Дагестана по Каспийскому морю в Мазандеран, Никитин полгода провел в Чапакуре, затем перешел в Сари, где оставался месяц. Отсюда направился в Амоль, из которого поднялся в горы, и за Демавендом спустился к Тегерану, или точнее, к Рею, так как Тегеран был в то время незначительным городом в окрестностях Рея. Затем, из Тарома Никитин повернул на запад к Лару, а из Лара опять на восток в Бендер-Абаси. Такой характер путешествия Никитина объясняется его торговыми интересами; он посещал все видные торговые места и даже по месяцу оставался в них. Из Персии Никитин отправился в Индию.
Путешествие его по Индии продолжалось почти три года: от весны 1469 года до января или февраля 1472 года. Описание этого путешествия занимает большую часть дневника Никитина. Он отправился из Ормуза на Фоминой неделе 9-го или 10-го апреля 1469 года и в двадцатых числах апреля подошел к Индийскому берегу в Диу, затем имел остановку у Камбои по пути к Чювилю, куда прибыл через шесть недель.
Продолжая свое путешествие через горы Гатские до Пали, Умри и далее к Чюнейру, Никитин не забывал своего торгового дела и, по-видимому, умел и на чужбине извлекать из него выгоду. Из Чюнейра, где он чуть не лишился свободы за отказ переменить веру, Никитин отправился через Кулонгер и Кольберг в Великий Бедерь, где оставался несколько месяцев.
С наступлением 1471 г. Никитин задумал вернуться на родину, что осуществить было нелегко вследствие происходивших в то время на Индостане войн. За месяц до байрама он вышел из Бедеря и чрез Кельберг, Кулури, город, знаменитый драгоценными камнями, особенно сердоликом, Алянд, куда он прибыл, вероятно, во второй половине октября 1471 года, Камендрию, Кынаряс, Сур, в начале 1472 года добрался до Дабыля. Таким образом, во время своего путешествия по Индии Никитин объехал значительную часть западного полуострова, между реками Кистной и Годавери, то есть области Аурунгабад, Бедерь, Гейдерабад и Беджапур.
Вместе с описаниями местностей, которые он посетил, он занес в свои записки и замечания о природе страны и ее произведениях, о народе, его нравах, верованиях и обычаях, о народном управлении, войске. Его заметки о народном управлении, несмотря на свою сбивчивость, любопытны тем, что их нет в рассказах других современников.
Припоминая свой отъезд, он отметил, что Дабыль – город очень большой, что туда съезжается все поморье Индейское и Ефиопское. Там Никитин сел в судно, плывущее до Ормуза. Однако ветры занесли корабль в сторону и после месячного плавания он пристал к берегу в виду Ефиопских гор, где подвергся нападению туземцев. Через пять дней корабль продолжал плавание, а через двенадцать Никитин высадился в Мошкате. Здесь он отпраздновал шестую за время своего странствования Пасху и после девятидневного плавания прибыл в Ормуз, откуда по знакомым местам добрался до расположенного близ Тавриза стана знаменитого завоевателя Западной Азии – Асан-бега, где провел десять дней, чтобы разведать, каким путем можно пробраться на север.
В сентябре 1472 года он через Арцингам направился в Трапезонт. Здесь Никитин подвергся обыску, причем у него «все, что мелочь добренькая, они выграбили все». С большим трудом, вследствие частых бурь на Черном море, удалось мореплавателю добраться до Балаклавы, а оттуда к Кафе, где он облегченно воскликнул: «милостию Божиею преидох три моря». Неизвестно, какой дорогой воротился Никитин на Русь, но можно думать, что возвращался он через Крым и Литву.
Умер Афанасий Никитич, не доехав до Твери, — в Смоленске. Лучшая характеристика Афанасия Никитина и его дневника, внесенного в полном виде в «Софийский временник» под 1475 годом под заглавием «Написание Офонаса тверитина купца, что был в Индеи четыри года, а ходил, сказывают, с Васильем Папиным», — дано академиком И. И. Срезневским. «Как ни кратки записки, оставленные Никитиным, — говорит он, — все же и по ним можно судить о нем как о замечательном русском человеке пятнадцатого века. И в них он рисуется, как православный христианин, как патриот, как человек не только бывалый, но и начитанный, а вместе с тем и как любознательный наблюдатель, как путешественник-писатель, по времени очень замечательный, не хуже своих собратьев иностранных торговцев пятнадцатого века.
(PPTX) Лаборатория Никитина Презентация 4.15.16
Презентация Лаборатории Никитина: Нокаут Crispr Rb1
Лаборатория Никитина Презентация: Нокаут Crispr Rb1Candace Chien4.15.2016
Введение
Рисунок 1: Десять ведущих типов рака по расчетным показателям смертности в 2010 г. (1) Рак яичников является пятой по значимости причиной смерти среди женщин, вызывая около 5% смертей от рака у женщин. анализа в 2010 году будет диагностироваться более 21 000 женщин в год, примерно 13 850 человек погибли. Рак яичников длится 5 лет. вероятность выживания всего 37% (1).
Краткая информация о раке яичников и почему важно
исследование: Рак яичников является пятой по значимости причиной смерти среди
женщин, вызвав около 5% всех смертей от рака среди женщин в 2010 году. Рак яичников имеет довольно низкую 5-летнюю выживаемость, всего
37%.2
Распределение по стадиям (%)
Распределение по стадиям при диагностике яичников, пищевода, Рак желудка и простаты (1) Большинство случаев рака яичников Диагноз ставится на поздней стадии, когда рак уже распространение за пределы первичной опухоли. Более 70% смертей происходит в пациенты с поздней стадией, выраженной серозной болезнью яичников рак (2).
Рисунок 2. Статистика рака за 2010 г. (1)
По сравнению с другими видами рака у нас есть цифры для рак пищевода, предстательной железы и желудка, большая часть диагноз рака яичников ставится на поздних стадиях, после рака метастазировала или распространилась за пределы первичной опухоли. Его Важно, что около 60% случаев рака яичников диагностируются на поздних стадиях. стадии, поскольку более 70% смертей приходится на пациентов с запущенная стадия, серозный рак яичников высокой степени злокачественности.
*Это требует лучшего понимания рака яичников. патогенез, чтобы мы могли лучше прогнозировать и обнаруживать рак яичников
до его прогрессирования 3
Генетические мутации в серозном эпителиальном яичнике высокой степени злокачественности Исследование «Атлас генома рака» (2) у пациентов с высоким уровнем SEOC выявлено:Мутации р53 не менее чем в 96% опухолейМутации в BRCA1 и BRCA2 в 22% опухолей. Нарушение регуляции пути Rb1 в 67% опухолей. случаи ~ Общая выживаемость при ЭРЯ с нормальным путем Rb (77,3%) намного выше, чем у пациентов с измененным путем Rb (50,0%) (3)
Серозный рак яичников высокой степени злокачественности составляет 70-80% смертность от рака (Bowtrell et al, 2015). За последние несколько десятилетия общая выживаемость существенно не изменилась, а Патогенез высокозлокачественного серозно-эпителиального рака яичников еще не очень понял.
Исследование атласа генома рака пациентов с HGSEOC в 2011 г.
выявили генетические мутации, характерные для HGSEOC: 96% опухолей имели
мутации в p53, 22% опухолей имели мутации в BRCA1 и BRCA 2,
и 67% случаев показали нарушение регуляции пути Rb1. общая выживаемость при эпителиальном раке яичников с нормальным
Путь Rb1 значительно выше, чем у пациентов с измененным Rb
путь (77% против 50%)4
Rb1 является негативным регулятором клеточного цикла.
Rb1 играет важную роль в переходе G0-G1, а также G1-S переход. Фосфорилирование pRB с помощью Cdk3 способствует переходу от От G0 до G1. Активные, гипофосфорилированные секвестры pRb E2F факторы транскрипции, препятствующие вступлению в S-фазу (4). Рисунок 3. STEM Academy, Google Images
Так что же Rb1, белок ретинобластомы, делает в клетке? Rb1
является важным негативным регулятором клеточного цикла.
Фосфорилированный белок Rb способствует переходу от G0 к G1. Активный
гипофосфорилированный белок Rb секвестрирует факторы транскрипции E2F,
предотвращение входа в фазу S. Как это работает? В основном, активный pRb
подавляет транскрипционную активность этих транскрипционных
факторы, которые контролируют гены, кодирующие активность репликации ДНК
и многие из факторов инициации, которые собирают пререплицирующую
сложный.
При фосфорилировании CDK3 pRb способствует переходу от G0 к G1 Недофосфорилированная форма pRb взаимодействует с E2F1, подавляя его транскрипционная активность E2F контролирует гены, кодирующие ДНК репликационная активность и регуляторная активность клеточного цикла практически весь аппарат факторов инициации, которые собирают пререпликационный комплекс в начале репликации под контролем E2FE2F также управляет синтезом циклина E и cdk2 => киназы. активность, ответственная за активацию репликации5
Цели Ранее мы показали, что клетки ворот ворот мутируют по
p53 и Rb1 показали повышенную пролиферацию и не подверглись
старение в культуре клеток (Флескен-Никитин и др. Поверхность яичников
эпителий в области соединения содержит склонную к раку стволовую клетку
ниша. Nature 2013). Цель: Создать модель рака яичников путем
иммортализация первичных клеток посредством двойного нокаута CRISPR p53 и
Rb1. Шаг 1: Создайте конструкцию Crispr, чтобы выбить p53 (который мы
уже есть) и Rb1.
Итак, в этой лаборатории мы ранее показали, что клетки ворот ворот мутируют для p53 и Rb1 показали повышенную пролиферацию и не подверглись старение в культуре клеток. Наша цель — увековечить первичные клетки путем двойного нокаута CRISPR p53 и Rb1. 6
Гипотеза: нокаут CRISPR Rb1 приведет к увеличению распространение.
Комплекс Cas9-гРНК вызывает двухцепочечный разрыв гена-мишени последовательность в Rb1, что приводит к мутации сдвига рамки считывания и нокауту функция ген.
Повышенная пролиферация Рисунок 4. Руководство Addgene CRISPR (5)
Нокаут Rb1 Накопление факторов транскрипции E2F, инактивированный p53
Двухцепочечный разрыв с последующей репарацией путем негомологичного соединения концов путь (подвержен ошибкам) Часто приводит к образованию небольших нуклеотидов вставки/делеции в сайте DSB => мутации со сдвигом рамки считывания что приводит к преждевременной стоп-кодонов и инактивации гена-мишени E2F контролирует гены, которые кодируют активность репликации ДНК и клетки цикл регулирующей деятельности практически весь аппарат факторы инициации, которые собирают пререпликативный комплекс в происхождение репликации под контролем E2FE2F также направляет синтез циклина Е и cdk2 => активность киназы ответственна для активации репликации
7
CRISPR/Cas9
Сгруппированные Короткие палиндромные повторы с регулярными интервалами
II система возникла из бактериальной иммунной системы и была
использованы и модифицированы для крупномасштабной инженерии генома. Лентивирусный вектор используется для доставки системы CRISPR/Cas9 в
клетки млекопитающих. Вирусный вектор LentiCRISPR состоит из: 1) Cas9
эндонуклеаза2) каркас sgRNA3) ген устойчивости к пуромицину для
отбор
Направляющая последовательность РНК Ген устойчивости к пуромицину
Эндонуклеаза Cas9Рисунок 5. Источник (6)
Система Crispr/Cas 9 возникла из бактериального иммунного система и использовалась в качестве инструмента в молекулярной биологии с момента ее открытие в 2009 году. Чтобы доставить систему Crispr/cas9 в клетки млекопитающего мы используем лентивирусный вектор, который состоит из 1) Эндонуклеаза Cas9, которая вызывает двухцепочечный разрыв в ДНК, 2) каркас направляющей РНК, комплементарный целевой последовательности в гене, который вы хотите сбить, выбить или переделать, и 3) ген устойчивости к пуромицину. Если бы вирус смог заразить клеток млекопитающих, мы ожидаем, что они будут экспрессировать пуромицин.8,
Guide RNA DesignЦель: нацеливание на промоторную область гена или
первая пара экзонов. Критерии для последовательности гРНК: Должно быть около
Цель длиной 20 нуклеотидов находится непосредственно перед протоспейсером.
Последовательность смежного мотива (PAM): NGGSequence уникальна по сравнению с
остальная часть генома: низкая вероятность нецелевой активности
где начинается транскрипт мРНК
Таким образом, целью моих направляющих РНК было нацеливание на промоторную область и первую пару экзонов, так что мутация со сдвигом рамки вызовет преждевременный стоп-кодон в начале гена => Rb1 имеет 27 экзоны!Ниже вы видите схему промоторной области в соответствии с к структуре гена ретинобластомы по Hong et al (1989). Синий — это поле с данными, я выделил все последовательности NGG, а зеленый — где начинается транскрипт мРНК.9
Target SequencesgRNATarget RegionTarget SequenceOfftarget Оценка активностиRb1-KO1Promoter — TATA коробкаTAGCCCCGTTTAAGTGCACCC945/1000Rb1-KO2Promoter — Major Сайт инициации транскрипции, определенный Hong et al., 1989CCCCAGTTCCCCACAGACGC736/1000Rb1-KO3Exon 1GGCGCTCCTCCCACAGCTCGC991/1000
Нецелевая активность, предсказанная CCTop Prediction Tool 2015
Баллы из 1000, где 1000 указывает на самую низкую вероятность
нецелевой активности и самой низкой вероятности потенциального
вредные последствияУчитывает количество возможных
мишеней в геноме, количество несовпадений по
PAM и расстояние до экзонов гена. Нецелевые сайты ранжируются по
снижение вероятности потенциального Cas9активность (8)
Две направляющие РНК нацелены на промоторную область, 1 из них нацелен на первый экзон в Rb1Offtarget, оценка выходит за пределы 1000, с 1000 означает наименьшую вероятность нецелевой активности.
10
Последний семестр: связь между Rb1 и p53Нокаут отведений Rb1 к накоплению фактора транскрипции E2F1, который может действовать как сигнал для индуцированного р53 апоптоза (4) Остановка клеточного цикла E2F факторы транскрипции, секвестрированные pRb — транскрипция PCdk4pRbE2F факторы activeE2F1 ActiveEntry в Sp19/ARF блок накопления Накопление Mdm2p53: индуцированный p53 апоптоз Передача сигналов роста
Итак, в прошлом семестре я обнаружил, что нокаут Rb1 в клеточной линии
с р53 дикого типа обладал потенциалом индуцировать индуцированный р53
апоптоз за счет накопления факторов транскрипции E2F. И я
было много проблем с сохранением достаточного количества живых клеток для запуска
процедуры на них.
Итак, в этом семестре я заразил другой тип клеток, HIO80s, который инактивировал p53 через Т-антиген SV40. Так это устраняет потенциал плохой выживаемости клеток из-за индуцированного p53 апоптоз.11
Лентивирусная инфекция HIO80sДень 1: Разморозить пробирки с лентивирусом ice.Seed 10 см планшет с 100 000 клеток/планшетДобавить 10 мл среды/планшет и 2 пробирки с размороженным вирусом. День 2: Добавьте 5 мл среды и инкубируйте в течение 72 часа. День 6: сменить среду и обеззаразить. Начать пуромицин отбор. Концентрация 2 мкг пуромицина/мл среды
День 9: Все клетки на контрольном планшете погибли. планшеты с пуромицина и вернуться к нормальным средам.
В прошлом семестре была очень низкая выживаемость после пуромицина, поэтому
В этом семестре я пытался оптимизировать выживаемость клеток с помощью нескольких советов от
одна из других лабораторий здесь, в ветеринарной школе. Единственное, что я
изменение заключалось в добавлении вируса одновременно с посевом клеток
и я действительно видел гораздо более высокий уровень успеха. Последний семестр, после
puro, я бы пересеял в 24-луночный планшет и получил бы ~50%
сливаются, но в этом семестре у меня было достаточно клеток, чтобы
10-сантиметровая пластина при степени слияния около 40 %.12
День 6 выздоровления после окончания лечения пуромицином инфекцииHIO80Rb1LV5infection
Итак, вот несколько фотографий колоний клеток после восстановления из пуромициновой селекции. Это прямо перед тем, как я бы их поменял чтобы они не начали расти друг над другом.
pcW — контрольный вирус, который режет случайным образом.
Гораздо более крупные колонии, которые рассредоточены. немного отличаться от контрольных клеток. Они были длиннее и больше расширений и более тонкие тела клеток.
pcW по сравнению с Rb1LV1
HIO80 pcW, стр. 2 4XHIO80 Rb1LV1, стр. 24X
Два пассажа после инфицирования и обработки пуромицином Клетка тела, казалось, становились тоньше и имели больше расширений.
15
pcW по сравнению с Rb1LV2
HIO80 pcW, стр. 24XHIO80 Rb1LV2, стр. 24X
Два пассажа после инфицирования и обработки пуромицином Клетка тела, казалось, становились тоньше и имели больше расширений.
16
pcW по сравнению с Rb1LV3
HIO80 pcW, стр. 24XHIO80 Rb1LV2, стр. 24X
Два пассажа после инфицирования и обработки пуромицином Клетка тела, казалось, становились тоньше и имели больше расширений. Я не уверен если это только потому, что клетки млекопитающих действительно не любят 17
Вестерн-блоттингЛизат клеток был получен с помощью RIPA буфер. Концентрацию белка определяли с помощью анализа белка BCA.15 г общего белка загружали на лунку. Rb1: первичное антитело: очищенное Мышиный белок против ретинобластомы человека, BD Biosciences, Концентрация 2 г/мл, 10% BSAВторичное антитело: антимышиное, IgG-HRP, разведение 1:2000, 3% BSAGAPDH Первичное антитело: коза Поликлональный GAPDH (V-18), Santa Cruz Biotechnology, разведение 1:2000, 5% молокоВторичное антитело: Anti-Goat IgG-HRP, разведение 1:2000, 1% молоко
Когда у меня было достаточно клеток для заморозки, я получил клеточный лизат с
Буфер RIPA. Я использовал анализ белка BCA для определения белка
концентрации и загружали 15 мкг белка на лунку.18
Результаты вестерн-блоттинга. Вывод: Мои конструкции не работали.
ppRb (116 кДа)pRb (110 кДа)
130 кДа110 кДа
pcW Rb1 LV1Rb1 LV2Rb1 LV3Null
40 кДаGAPDH 9000 3
Много фона, первичные антитела не очень четкие и есть много групп. I19
Что делать дальше? У меня есть около 5 других конструкций Rb1 для тест (я тестировал только те, которые нацелены на промоторную область). Эти другие конструкции нацелены на экзоны вместо промоторной области и 2 из них были сделаны с помощью другого онлайн-инструмента (лаборатория Zhang инструмент).
Спасибо всем в Лаборатории Никитина!
Вопросы?
Ссылки1. Джемал А., Сигел Р., Сюй Дж., Уорд Э. Статистика рака,
2010. CA Cancer J Clin 2010; 60:277300. 2. Атлас генома рака
Исследовательская сеть, Комплексный геномный анализ рака яичников.
Природа 2011; 474:60915. 3. Хасигути Ю., Цуда Х. , Иноуэ Т.,
Нисимура С., Судзуки Т., Кавамура Н. Изменение клеточного цикла
регуляторов коррелирует с выживаемостью при эпителиальном раке яичников
пациенты. Хум Патол 2004; 35: 16575.4. Невинс Дж. Rb/E2F
путь и рак. Молекулярная генетика человека 2001, Vol. 10, №7.5.
https://www.addgene.org/CRISPR/guide/6.
https://www.addgene.org/static/cms/files/Zhang_lab_LentiCRISPR_library_protocol.pdf7.
Хонг Ф., Хуан Х., То Х., Янг Л., Оро А., Букштейн Р., Ли Э., Ли В.
Структура гена ретинобластомы человека. ПНАС 1989, Том. 86,
5502-5506.
23
Пл. Колледж Годаварибай Ганпатрао Хадсе, Муктайнагар
Смт. Колледж Годаварибай Ганпатрао Хадсе, Муктайнагар — Исторический факультетИсторический факультет
Предмет истории преподавался на общем уровне с августа 1993 года, а с августа 1994 года на специальном уровне. На кафедре истории есть два штатных преподавателя и около 400 текстов и справочников, а шесть журналов, связанных с предметом, доступны в Центральной библиотеке колледжа.
Общие цели обучения Предмет истории:
- Историческое изучение Индии и мира.
- Чтобы изучить важность нашего наследия.
- Дать правильное представление о времени, пространстве и обществе.
- Научить терпимости.
- Для обучения моральным принципам.
- Воспитывать национальные чувства.
- Для развития международного взаимопонимания.
- Воспитывать взгляд вперед.
-
Инфраструктура:
HOD и комната персонала -01
Административная инфраструктура :
Шкаф
Учебные пособия:
Карты-02, Карты-04, Аудиокассеты -05, O. H.P. Слайды-06
Особенность отдела:
Предложите учащимся участвовать в конференциях/соревнованиях национального/государственного уровня.
Продвигайте студентов для участия в соревнованиях университетского уровня, таких как Aviskar.
Студенту даются проекты по местным историческим местам.
Внеклассная/дополнительная деятельность:
Кружок социальных наук создан для организации гостевых лекций и ознакомительных поездок для студентов.
Учителя публикуют несколько статей в газетах для повышения осведомленности Общества о сохранении и сохранении исторических памятников в районе Муктайнагар.
Коэффициент успешности студентов последнего курса: 53,33%
Другое: 04 студента, занесенных в список заслуг Университета Северной Махараштры.
| Выпускник | |
|---|---|
| |
Исследования/публикации сотрудников Публикация: д-р П. С. Премсагар-
| Старший Нет. | Подробности публикации | Публикация | Автор(ы) / Редактор(ы) | Уровень и дата |
|---|---|---|---|---|
| 1 | Документ — [Индо-иранские политические отношения: с древних времен до Бабара] Research Link, ISSN 0973-1628, выпуск-31, том-V(6), август (специальный) 2006 г. , с 51 по 53 | Исследовательская связь, Старая Палазия, Индаур-452018 | ПАНКАДЖКУМАР ШАНКАР ПРЕМСАГАР | Национальный — [ 31-08-2006 ] |
| 2 | Резюме исследовательской работы — [Аваданкатхас: изображено на фресках Аджанты] | Сборник тезисов: буддизм — прошлое и настоящее, издатель — исторический факультет Колледжа Абасахеба Гарваре, Пуна. | П.Д. ДЖАГТАП И ПАНКАДЖКУМАР ШАНКАР ПРЕМСАГАР | Международный — [ 27-01-2011 ] |
| 3 | Аннотация исследовательской работы — [Коммерческие контакты между Индией и Ираном (до 7 века нашей эры)] | Книга резюме: Индия и Иран: наше культурное наследие прошлого, ISBN-978-81-920045-2-5, Издатель — кафедра истории, Колледж искусств Пуна, наук. & Com., Пуна | ПАНКАДЖКУМАР ШАНКАР ПРЕМСАГАР | Международный — [ 03-03-2011 ] |
| 4 | Бумага — [Коммерческие контакты между Индией и Ираном] Индия и Иран: наше наследие прошлого, первое издание, ISBN 978-81-920045-2-5 с 26 по 32 | Индия и Иран: наше наследие прошлого , издатель — колледж Пуна, Пуна, и совместный директор высшего образования, регион Пуна, Пуна-01. | ПАНКАДЖКУМАР ШАНКАР ПРЕМСАГАР | Международный — [ 10-12-2011 ] |
| 5 | Статья — [Неизбежность европейских путешествий в социокультурных исследованиях позднесредневековой Махараштры] Conference Proceedings of ICHSS 2012, 2-я Международная конференция по гуманитарным и социальным наукам, 23-24 марта 2012 г., Тирана (Албания), Vol. 2, ISBN 978-2-634982-45-7 со 113 по 117 | Материалы конференции ICHSS 2012, 2-я международная конференция, Тирана (Албания), издательство — Средиземноморский центр социальных и образовательных исследований, Рим (Италия) | ПАНКАДЖКУМАР ШАНКАР ПРЕМСАГАР | Международный — [ 31-03-2012 ] |
| 6 | Статья — [Неизбежность европейских путешествий в социокультурных исследованиях позднесредневековой Махараштры] Средиземноморский журнал социальных наук, Vol. 3, № 6, ISSN 2039-9340 (печатная версия) ISSN 2039-2117 (онлайн) С 117 по 122 | Средиземноморский журнал социальных наук, издательство — Средиземноморский центр социальных и образовательных исследований, Рим (Италия) | ПАНКАДЖКУМАР ШАНКАР ПРЕМСАГАР | Международный — [ 31-03-2012 ] |
| Старший Нет. | Название статьи | Уровень | Место | Период |
|---|---|---|---|---|
| 1 | Индо-иранские отношения: с древних времен до Бабура (политические и экономические) | Национальный | Университет Мадраса, Ченнаи | 21-24 октября 2002 г. |
| 2 | Шаху Махараджанче Аартик Дхоран ва Вичар (Экономическая политика и мысль Шаху Махараджей) | Национальный | Колледж Видья Вардини, Дхуле | 1-2 марта 2003 г. |
| 3 | Мадхьяюгин паркий праваши Никитин Афанасий ва доктор Фрайер Джон янчя чакшутун диснаре Юннер (Юннер глазами средневековых иностранных путешественников: Никитин Афанасий и Фрайер Джон) | Состояние | Колледж Шри Шив Чатрапати, Юннер, р-н. Пуна | 23-25 ноября 2006 г. |
| 4 | Исави Саначья Сатаравья Шатакат Махараштрат Аалеля Френч Правашанчья Друштиконатун Махараштра (Махараштра в 17 веке: глазами французских путешественников) | Состояние | Женский колледж Шардабай Павар, Барамати, р-н. Пуна | 11-12 декабря 2006 г. |
| 5 | Пещеры Махараштры глазами иностранных путешественников позднего средневековья | Международный | Университет Мумбаи, Мумбаи | |
Департамент политологии организует семинары, мастер-классы, поездки/пикники в течение всего года.